Lec1

Lec1 rakuliin on mutatsioonikloon, mis on valitud välja selle vastupidavuse tõttu nisukliide aglutiniinile ja mis on saadud vanemkloonist CHO Pro-5. Selle valikuprotsessi tulemusena saadi rakuliin, millel on spetsiifiline glükosüleerimise defekt, mida iseloomustab N-seotud süsivesikute esinemine, mille vaheühendina on blokeeritud Man5-GlcNAc2-Asn. See blokeerumine on tingitud N-atsetüülglükosaminüültransferaasi I (GlcNAc-TI) puudumisest, mis on ensüüm, mis on oluline glükaani sünteesi edasiliikumisel keerulisemate vormide suunas. Selle tulemusena kogunevad Lec1 rakkudesse glükoproteiinid, millel on lühendatud, kõrge mannoosisisaldusega oligosahhariidid.

Lec1-rakud on hindamatud glükoproteiini biosünteesi uurimisel, eriti selleks, et mõista, kuidas muutunud N-seotud glükosüleerimine mõjutab raku funktsiooni. Teadlased kasutavad Lec1-rakke, et uurida glükosüleerimise mõju valkude kokkupakkimisele, stabiilsusele, retseptorite funktsioonile ja rakusisese transpordile. Lisaks pakuvad need rakud ainulaadset platvormi viirusinfektsiooni või võõra DNA transfektsiooni poolt indutseeritud endogeensete glükoproteiinide kompartmentaliseerumise uurimiseks. Lec1-rakkude lihtsustatud glükaanstruktuurid muudavad need ideaalseks ka selliste glükoproteiinide tootmiseks, mida on erinevates eksperimentaalsetes kontekstides lihtsam analüüsida.

Neid kasutatakse peamiselt in vitro mehhanistiliste uuringute ja biotehnoloogiliste rakenduste jaoks, mis hõlmavad glükoproteiinide tootmist ja analüüsi.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest