Lec1

Lec1-cellelinjen er en mutantklon, der er udvalgt på grund af sin resistens over for hvedekimagglutinin, og som stammer fra den oprindelige CHO-klon Pro-5. Denne udvælgelsesproces resulterede i en cellelinje med en specifik glykosyleringsdefekt, der er kendetegnet ved tilstedeværelsen af N-forbundne kulhydrater med et blokeret Man5-GlcNAc2-Asn-mellemprodukt. Denne blokering skyldes fraværet af N-acetylglucosaminyltransferase I (GlcNAc-TI), et enzym, der er afgørende for fremskridtet i glykansyntesen til mere komplekse former. Som følge heraf akkumulerer Lec1-celler glykoproteiner med trunkerede oligosaccharider af typen med højt mannoseindhold.

Lec1-celler er uvurderlige for studiet af glykoproteinbiosyntese, især for at forstå, hvordan ændret N-bundet glykosylering påvirker cellefunktionen. Forskere anvender Lec1-celler til at undersøge glykosyleringens indvirkning på proteinfoldning, stabilitet, receptorfunktion og intracellulær transport. Derudover udgør disse celler en unik platform til at studere kompartimenteringen af endogene glykoproteiner, der induceres af virusinfektion eller transfektion med fremmed DNA. De forenklede glykanstrukturer i Lec1-celler gør dem også ideelle til produktion af glykoproteiner, der er lettere at analysere i forskellige eksperimentelle sammenhænge.

De anvendes primært in vitro til mekanistiske studier og bioteknologiske anvendelser, der involverer produktion og analyse af glykoproteiner.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring