Lec1

A linha celular Lec1 é um clone mutante selecionado pela sua resistência à aglutinina de gérmen de trigo, derivado do clone CHO parental Pro-5. Este processo de seleção resultou numa linha celular com um defeito específico de glicosilação, caracterizada pela presença de hidratos de carbono ligados a N com um intermediário Man5-GlcNAc2-Asn bloqueado. Este bloqueio deve-se à ausência de N-acetilglucosaminiltransferase I (GlcNAc-TI), uma enzima essencial para a progressão da síntese de glicanos para formas mais complexas. Como resultado, as células Lec1 acumulam glicoproteínas com oligossacarídeos truncados do tipo de alto teor de manose.

As células Lec1 são inestimáveis para o estudo da biossíntese de glicoproteínas, particularmente para compreender como a glicosilação N-ligada alterada afeta a função celular. Os investigadores utilizam as células Lec1 para investigar o impacto da glicosilação no dobramento das proteínas, na estabilidade, na função dos recetores e no tráfego intracelular. Além disso, estas células proporcionam uma plataforma única para estudar a compartimentação de glicoproteínas endógenas induzidas por infeção viral ou por transfecção de ADN estranho. As estruturas glicânicas simplificadas nas células Lec1 também as tornam ideais para a produção de glicoproteínas que são mais fáceis de analisar em vários contextos experimentais.

São utilizadas principalmente in vitro para estudos mecanísticos e aplicações biotecnológicas que envolvem a produção e análise de glicoproteínas.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia