Lec1

Die Lec1-Zelllinie ist ein mutierter Klon, der aufgrund seiner Resistenz gegen Weizenkeim-Agglutinin selektiert wurde und vom elterlichen CHO-Klon Pro-5 abstammt. Dieser Selektionsprozess führte zu einer Zelllinie mit einem spezifischen Glykosylierungsdefekt, der durch das Vorhandensein von N-gebundenen Kohlenhydraten mit einem blockierten Man5-GlcNAc2-Asn-Zwischenprodukt gekennzeichnet ist. Diese Blockade ist auf das Fehlen von N-Acetylglucosaminyltransferase I (GlcNAc-TI) zurückzuführen, einem Enzym, das für den Fortgang der Glykansynthese zu komplexeren Formen entscheidend ist. Infolgedessen reichern Lec1-Zellen Glykoproteine mit verkürzten Oligosacchariden vom Typ „High-Mannose“ an.

Lec1-Zellen sind von unschätzbarem Wert für die Erforschung der Glykoproteinbiosynthese, insbesondere für das Verständnis, wie eine veränderte N-gebundene Glykosylierung die Zellfunktion beeinflusst. Forscher nutzen Lec1-Zellen, um den Einfluss der Glykosylierung auf die Proteinfaltung, Stabilität, Rezeptorfunktion und den intrazellulären Transport zu untersuchen. Darüber hinaus bieten diese Zellen eine einzigartige Plattform für die Untersuchung der Kompartimentierung von endogenen Glykoproteinen, die durch virale Infektionen oder die Transfektion mit fremder DNA induziert werden. Die vereinfachten Glykanstrukturen in Lec1-Zellen machen sie zudem ideal für die Herstellung von Glykoproteinen, die in verschiedenen experimentellen Kontexten leichter zu analysieren sind.

Sie werden vor allem in vitro für mechanistische Studien und biotechnologische Anwendungen im Zusammenhang mit der Glykoproteinproduktion und -analyse eingesetzt.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung