Lec1

De Lec1-cellijn is een mutante kloon die is geselecteerd op basis van zijn resistentie tegen tarwekiemagglutinine, afkomstig van de oorspronkelijke CHO-kloon Pro-5. Dit selectieproces heeft geleid tot een cellijn met een specifiek glycosylatiedefect, gekenmerkt door de aanwezigheid van N-gebonden koolhydraten met een geblokkeerd Man5-GlcNAc2-Asn-tussenproduct. Deze blokkade is het gevolg van de afwezigheid van N-acetylglucosaminyltransferase I (GlcNAc-TI), een enzym dat cruciaal is voor de voortgang van de glycaansynthese naar complexere vormen. Als gevolg hiervan accumuleren Lec1-cellen glycoproteïnen met verkorte oligosachariden van het type met een hoog mannosegehalte.

Lec1-cellen zijn van onschatbare waarde voor de studie van glycoproteïnebiosynthese, met name om te begrijpen hoe veranderde N-gebonden glycosylatie de celfunctie beïnvloedt. Onderzoekers gebruiken Lec1-cellen om de invloed van glycosylatie op eiwitvouwing, stabiliteit, receptorfunctie en intracellulair transport te onderzoeken. Bovendien bieden deze cellen een uniek platform voor het bestuderen van de compartimentering van endogene glycoproteïnen die worden geïnduceerd door virale infectie of transfectie met vreemd DNA. De vereenvoudigde glycaanstructuren in Lec1-cellen maken ze ook ideaal voor het produceren van glycoproteïnen die gemakkelijker te analyseren zijn in verschillende experimentele contexten.

Ze worden voornamelijk in vitro gebruikt voor mechanistische studies en biotechnologische toepassingen waarbij de productie en analyse van glycoproteïnen betrokken zijn.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring