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NCI-N87-Luc
Tissu
Estomac
Maladie
Adénocarcinome tubulaire gastrique
Site métastatique
Foie
Synonymes
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Documents

NCI-N87-Luc

Cell line · Référence du produit 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

€800.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire NCI-N87-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire humaine NCI-N87 d'adénocarcinome gastrique, modifiée génétiquement pour exprimer de manière stable un gène rapporteur codant pour la luciférase de luciole. La lignée cellulaire parentale NCI-N87 a été établie à partir d’une métastase hépatique d’un adénocarcinome tubulaire gastrique chez un patient de sexe masculin d’origine africaine ; elle se caractérise par une amplification du gène HER2 (ERBB2) et une surexpression de la protéine, ce qui en fait l’un des principaux modèles précliniques du cancer gastrique HER2-positif. Les cellules NCI-N87 présentent une morphologie épithéliale et sont largement utilisées pour évaluer l’efficacité des traitements ciblant HER2, notamment le trastuzumab, le pertuzumab et le trastuzumab-emtansine (T-DM1).

L’intégration stable de la luciférase dans les cellules NCI-N87-Luc permet une imagerie par bioluminescence (BLI) sensible et non invasive de la charge tumorale dans des modèles de xénogreffes sous-cutanées et orthotopiques chez des hôtes immunodéprimés. Le signal luminescent est en corrélation avec le nombre de cellules tumorales viables, ce qui permet un suivi longitudinal de la prise de greffe tumorale, de la cinétique de croissance et de la réponse aux agents ciblant HER2 ou aux agents chimiothérapeutiques. La lignée NCI-N87-Luc est particulièrement utile pour l’évaluation préclinique des conjugués anticorps-médicaments (ADC), des anticorps bispécifiques et des nouvelles stratégies ciblant HER2 dans le cancer gastrique, ainsi que pour les applications de criblage de médicaments à haut débit.

La lignée NCI-N87-Luc conserve le phénotype moléculaire caractérisé par une amplification de HER2 ainsi que les caractéristiques de croissance adhérente de la lignée parentale NCI-N87. Le rapporteur luciférase améliore le débit expérimental et la sensibilité des études d’imagerie in vivo. Les chercheurs doivent vérifier l’activité de la luciférase, le statut d’expression de HER2 et la cinétique de croissance dans leurs conditions expérimentales spécifiques avant toute utilisation dans le cadre d’études d’imagerie quantitative ou pharmacologiques.

Tissu
Estomac
Maladie
Adénocarcinome tubulaire gastrique
Site métastatique
Foie
Synonymes
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale
Tumorigène
Oui

04Identifiants

Référence
NCI-N87-Luc (référence Cytion 305695)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Expression et sensibilité

Expression des antigènes
Luc2 (firefly, optimisé au niveau des codons)

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 10 mM d'HEPES, 2,5 g/L de glucose et 1 mM de pyruvate de sodium.
Réactif de dissociation
Accutase : 10 minutes à 37 °C
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Rapport de fractionnement
1 à 3
Densité de semis
2 à 4 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Contrôle qualité et cryoconservation

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Âge non spécifié
Origine ethnique
Africains