Ga naar de inhoud
NCI-N87-Luc
Weefsel
Maag
Ziekte
Maag tubulair adenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Lever
Synoniemen
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Documenten

NCI-N87-Luc

Cell line · Productnummer 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

NCI-N87-Luc is een bioluminescent derivaat van de menselijke NCI-N87-cellijn voor maagadenocarcinoom, dat genetisch is gemodificeerd om op stabiele wijze een vuurvlieg-luciferase-reportergen tot expressie te brengen. De oorspronkelijke NCI-N87-cellijn is afkomstig van een levermetastase van een tubulair maagadenocarcinoom bij een mannelijke patiënt van Afrikaanse afkomst en wordt gekenmerkt door HER2 (ERBB2)-genamplificatie en eiwitoverproductie, waardoor deze cellijn een van de belangrijkste preklinische modellen voor HER2-positieve maagkanker is. NCI-N87-cellen vertonen een epitheliale morfologie en worden op grote schaal gebruikt om de werkzaamheid te beoordelen van op HER2 gerichte therapieën, waaronder trastuzumab, pertuzumab en trastuzumab-emtansine (T-DM1).

De stabiele integratie van luciferase in NCI-N87-Luc maakt gevoelige, niet-invasieve bioluminescentiebeeldvorming (BLI) mogelijk van de tumorbelasting in subcutane en orthotope xenotransplantaatmodellen bij immuungecompromitteerde gastheren. Het luminescentiesignaal correleert met het aantal levensvatbare tumorcellen, wat longitudinale monitoring van de tumorengrafting, de groeikinetiek en de respons op HER2-gerichte of chemotherapeutische middelen ondersteunt. NCI-N87-Luc is met name waardevol voor de preklinische evaluatie van antilichaam-geneesmiddelconjugaten (ADC’s), bispecifieke antilichamen en nieuwe HER2-gerichte strategieën bij maagkanker, evenals voor high-throughput-toepassingen voor het screenen van geneesmiddelen.

NCI-N87-Luc behoudt het moleculaire fenotype met HER2-amplificatie en de hechtende groeikenmerken van de oorspronkelijke NCI-N87-lijn. De luciferase-reporter verhoogt de experimentele doorvoer en gevoeligheid voor in-vivo-beeldvormingsonderzoeken. Onderzoekers dienen de luciferase-activiteit, de HER2-expressiestatus en de groeikinetiek onder hun specifieke experimentele omstandigheden te verifiëren alvorens het te gebruiken in kwantitatieve beeldvormings- of farmacologische studies.

Weefsel
Maag
Ziekte
Maag tubulair adenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Lever
Synoniemen
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel
Tumorverwekkend
Ja

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCI-N87-Luc (Cytion-catalogusnummer 305695)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
Luc2 (vuurvlieg, codon-geoptimaliseerd)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Voeg aan het medium 10% FBS, 10 mM HEPES, 2,5 g/l glucose en 1 mM natriumpyruvaat toe
Dissociatiereagens
Accutase 10 minuten bij 37 °C
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 3
Zaaidichtheid
2 tot 4 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Leeftijd onbepaald
Etnische afkomst
Afrikaans