Skip to content
NCI-N87-Luc
Tissue
กระเพาะอาหาร
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดท่อในกระเพาะอาหาร
Metastatic site
ตับ
Synonyms
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Documents

NCI-N87-Luc

Cell line · Product number 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

NCI-N87-Luc เป็นสายพันธุ์เซลล์อะดีโนคาร์ซิโนมาของกระเพาะอาหาร NCI-N87 ของมนุษย์ที่ได้รับการดัดแปลงให้มีความสามารถในการเรืองแสงชีวภาพ โดยถูกออกแบบให้แสดงออกอย่างคงที่ของยีนรีพอร์ตเตอร์ลูซิเฟอเรสของหิ่งห้อย สายเซลล์ NCI-N87 ต้นแบบถูกสร้างขึ้นจากก้อนมะเร็งที่แพร่กระจายไปยังตับของมะเร็งอะดีโนคาร์ซิโนมาแบบท่อในกระเพาะอาหารของผู้ป่วยชายเชื้อสายแอฟริกัน และมีลักษณะเด่นคือการเพิ่มจำนวนของยีน HER2 (ERBB2) และการแสดงออกของโปรตีนที่มากเกินไป ทำให้เป็นหนึ่งในแบบจำลองก่อนคลินิกหลักสำหรับมะเร็งกระเพาะอาหาร HER2-positive เซลล์ NCI-N87 มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบเยื่อบุผิว และถูกใช้อย่างแพร่หลายในการประเมินประสิทธิภาพของการรักษาที่มุ่งเป้าไปที่ HER2 รวมถึง trastuzumab, pertuzumab และ trastuzumab-emtansine (T-DM1)

การบูรณาการลูซิเฟอเรสที่เสถียรใน NCI-N87-Luc ช่วยให้สามารถทำการถ่ายภาพชีวเรืองแสง (BLI) ที่มีความไวและไม่รุกล้ำ เพื่อประเมินปริมาณเนื้องอกในแบบจำลองการปลูกถ่ายเนื้องอกใต้ผิวหนังและแบบออร์โทโทปิกในสัตว์ทดลองที่มีระบบภูมิคุ้มกันบกพร่อง สัญญาณลูมิเนสเซนซ์มีความสัมพันธ์กับจำนวนเซลล์มะเร็งที่ยังมีชีวิต ซึ่งสนับสนุนการติดตามผลแบบต่อเนื่องเกี่ยวกับการฝังตัวของเนื้องอก อัตราการเติบโต และการตอบสนองต่อยาที่มุ่งเป้า HER2 หรือยาเคมีบำบัด NCI-N87-Luc มีประโยชน์อย่างยิ่งในการประเมินก่อนคลินิกของสารประกอบแอนติบอดี-ยา (ADCs), แอนติบอดีสองจำเพาะ และกลยุทธ์ใหม่ที่มุ่งเป้าไปที่ HER2 ในมะเร็งกระเพาะอาหาร รวมถึงสำหรับการคัดกรองยาแบบผ่านปริมาณสูง

NCI-N87-Luc ยังคงรักษาลักษณะทางโมเลกุลที่มีการเพิ่มจำนวน HER2 และลักษณะการเจริญเติบโตแบบยึดติดของสายพันธุ์ NCI-N87 ต้นแบบไว้ได้ ตัวรายงานลูซิเฟอเรสช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการทดลองและความไวสำหรับการศึกษาภาพในร่างกาย นักวิจัยควรยืนยันกิจกรรมของลูซิเฟอเรส สถานะการแสดงออกของ HER2 และพลวัตการเจริญเติบโตภายใต้เงื่อนไขการทดลองเฉพาะของตนเอง ก่อนที่จะนำไปใช้ในการศึกษาภาพเชิงปริมาณหรือการศึกษาทางเภสัชวิทยา

Tissue
กระเพาะอาหาร
Disease
มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดท่อในกระเพาะอาหาร
Metastatic site
ตับ
Synonyms
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่

04Identifiers

Citation
NCI-N87-Luc (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305695)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Expression and susceptibility

Antigen expression
Luc2 (ไฟลั๊ก, โคดอน-ออปติไมซ์)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติม FBS 10%, HEPES 10 mM, Glucose 2.5 g/L และ Sodiumpyruvate 1 mM ลงในสื่อเพาะเลี้ยง
Dissociation reagent
Accutase 10 นาที ที่ 37°C
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 3
Seeding density
2 ถึง 4 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
อายุไม่ระบุ
Ethnicity
แอฟริกัน