Gå til innholdet
NCI-N87-Luc
Vev
Mage
Sykdom
Adenokarsinom i magesekken
Metastaseområde
Lever
Synonymer
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Dokumenter

NCI-N87-Luc

Cell line · Produktnummer 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

NCI-N87-Luc er et bioluminescerende derivat av den humane NCI-N87-cellelinjen for adenokarsinom i magesekken, som er genetisk modifisert til å uttrykke et reportergen for ildflue-luciferase på en stabil måte. Den opprinnelige NCI-N87-cellelinjen ble etablert fra en levermetastase av et tubulært adenokarsinom i magesekken hos en mannlig pasient av afrikansk opprinnelse og er preget av HER2 (ERBB2)-genamplifikasjon og proteinoveruttrykk, noe som gjør den til en av de viktigste prekliniske modellene for HER2-positiv magekreft. NCI-N87-celler har epitelial morfologi og brukes i stor utstrekning til å evaluere effekten av HER2-rettede behandlinger, inkludert trastuzumab, pertuzumab og trastuzumab-emtansine (T-DM1).

Den stabile luciferase-integrasjonen i NCI-N87-Luc muliggjør sensitiv, ikke-invasiv bioluminescensavbildning (BLI) av tumorbyrden i subkutane og ortotopiske xenotransplantatmodeller hos immunsvekkede verter. Det luminescerende signalet korrelerer med antall levedyktige tumorceller, noe som muliggjør langtidsovervåking av tumorinnpodning, vekstkinetikk og respons på HER2-rettede midler eller kjemoterapeutiske midler. NCI-N87-Luc er spesielt verdifull for preklinisk evaluering av antistoff-legemiddelkonjugater (ADC-er), bispesifikke antistoffer og nye HER2-rettede strategier ved magekreft, samt for legemiddelscreening med høy gjennomstrømning.

NCI-N87-Luc beholder den HER2-amplifiserte molekylære fenotypen og de vedheftende vekstegenskapene til den opprinnelige NCI-N87-linjen. Luciferase-reporteren forbedrer eksperimentell gjennomstrømning og følsomhet for in vivo-avbildningsstudier. Forskere bør bekrefte luciferaseaktivitet, HER2-ekspresjonsstatus og vekstkinetikk under sine spesifikke eksperimentelle forhold før bruk i kvantitativ avbildning eller farmakologiske studier.

Vev
Mage
Sykdom
Adenokarsinom i magesekken
Metastaseområde
Lever
Synonymer
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial
Tumorinduserende
Ja

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCI-N87-Luc (Cytion-katalognummer 305695)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
Luc2 (ildflue, kodonoptimalisert)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Tilsett 10 % FBS, 10 mM HEPES, 2,5 g/l glukose og 1 mM natriumpyruvat til mediet
Dissosiasjonsmiddel
Accutase i 10 minutter ved 37 °C
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Oppdelingsforhold
1 til 3
Såtetthet
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Uspesifisert alder
Etnisitet
Afrikansk