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NCI-N87-Luc
Tessuto
Stomaco
Malattia
Adenocarcinoma tubulare gastrico
Sito metastatico
Fegato
Sinonimi
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Documenti

NCI-N87-Luc

Cell line · Codice prodotto 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

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01Informazioni generali

Descrizione

NCI-N87-Luc è un derivato bioluminescente della linea cellulare umana NCI-N87 di adenocarcinoma gastrico, ingegnerizzata per esprimere in modo stabile un gene reporter della luciferasi di lucciola. La linea cellulare parentale NCI-N87 è stata ottenuta da una metastasi epatica di un adenocarcinoma tubulare gastrico in un paziente di sesso maschile di origine africana ed è caratterizzata dall’amplificazione del gene HER2 (ERBB2) e dalla sovraespressione della proteina, il che la rende uno dei principali modelli preclinici per il carcinoma gastrico HER2-positivo. Le cellule NCI-N87 presentano una morfologia epiteliale e sono ampiamente utilizzate per valutare l’efficacia delle terapie mirate a HER2, tra cui trastuzumab, pertuzumab e trastuzumab-emtansine (T-DM1).

L’integrazione stabile della luciferasi nelle cellule NCI-N87-Luc consente un’imaging bioluminescente (BLI) sensibile e non invasivo del carico tumorale in modelli di xenotrapianto sottocutaneo e ortotopico in ospiti immunocompromessi. Il segnale luminescente è correlato al numero di cellule tumorali vitali, consentendo il monitoraggio longitudinale dell’attecchimento del tumore, della cinetica di crescita e della risposta agli agenti mirati a HER2 o chemioterapici. NCI-N87-Luc è particolarmente utile per la valutazione preclinica di coniugati anticorpo-farmaco (ADC), anticorpi bispecifici e nuove strategie mirate a HER2 nel cancro gastrico, nonché per applicazioni di screening farmacologico ad alta produttività.

NCI-N87-Luc conserva il fenotipo molecolare con amplificazione di HER2 e le caratteristiche di crescita aderente della linea parentale NCI-N87. Il reporter luciferasi migliora la produttività sperimentale e la sensibilità per gli studi di imaging in vivo. I ricercatori dovrebbero verificare l’attività della luciferasi, lo stato di espressione di HER2 e la cinetica di crescita nelle proprie specifiche condizioni sperimentali prima di utilizzarla in studi di imaging quantitativo o farmacologici.

Tessuto
Stomaco
Malattia
Adenocarcinoma tubulare gastrico
Sito metastatico
Fegato
Sinonimi
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tumorigenico
Sì

04Identificatori

Riferimento bibliografico
NCI-N87-Luc (codice catalogo Cytion 305695)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
Luc2 (lucciola, ottimizzata a livello di codoni)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Aggiungere al terreno di coltura il 10% di FBS, 10 mM di HEPES, 2,5 g/L di glucosio e 1 mM di piruvato di sodio
Reagente di dissociazione
Accutase per 10 minuti a 37 °C
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rapporto di frazionamento
da 1 a 3
Densità di semina
Da 2 a 4 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
Età non specificata
Etnia
Africano