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NCI-N87-Luc
Pañuelo de papel
Estómago
Enfermedad
Adenocarcinoma tubular gástrico
Lugar de metástasis
Hígado
Sinónimos
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Documentos

NCI-N87-Luc

Cell line · Número de producto 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

€800.00sin impuestos ni gastos de envío

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1

01Información general

Descripción

NCI-N87-Luc es un derivado bioluminiscente de la línea celular humana NCI-N87 de adenocarcinoma gástrico, modificada genéticamente para expresar de forma estable un gen reportero de luciferasa de luciérnaga. La línea celular parental NCI-N87 se estableció a partir de una metástasis hepática de un adenocarcinoma tubular gástrico en un paciente varón de ascendencia africana y se caracteriza por la amplificación del gen HER2 (ERBB2) y la sobreexpresión de la proteína, lo que la convierte en uno de los principales modelos preclínicos para el cáncer gástrico HER2-positivo. Las células NCI-N87 presentan una morfología epitelial y se utilizan ampliamente para evaluar la eficacia de las terapias dirigidas contra HER2, entre las que se incluyen el trastuzumab, el pertuzumab y el trastuzumab-emtansina (T-DM1).

La integración estable de luciferasa en las células NCI-N87-Luc permite obtener imágenes de bioluminiscencia (BLI) sensibles y no invasivas de la carga tumoral en modelos de xenoinjertos subcutáneos y ortotópicos en huéspedes inmunodeprimidos. La señal luminiscente se correlaciona con el número de células tumorales viables, lo que permite el seguimiento longitudinal del injerto tumoral, la cinética de crecimiento y la respuesta a agentes dirigidos contra HER2 o a agentes quimioterapéuticos. La línea NCI-N87-Luc resulta especialmente valiosa para la evaluación preclínica de conjugados de anticuerpos y fármacos (ADC), anticuerpos biespecíficos y nuevas estrategias dirigidas contra HER2 en el cáncer gástrico, así como para aplicaciones de cribado de fármacos de alto rendimiento.

La línea NCI-N87-Luc conserva el fenotipo molecular con amplificación de HER2 y las características de crecimiento adherente de la línea parental NCI-N87. El reportero de luciferasa mejora el rendimiento experimental y la sensibilidad para los estudios de imagen in vivo. Los investigadores deben confirmar la actividad de la luciferasa, el estado de expresión de HER2 y la cinética de crecimiento en sus condiciones experimentales específicas antes de utilizarla en estudios de imagen cuantitativa o farmacológicos.

Pañuelo de papel
Estómago
Enfermedad
Adenocarcinoma tubular gástrico
Lugar de metástasis
Hígado
Sinónimos
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial
Tumorigénico
Sí

04Identificadores

Referencia
NCI-N87-Luc (número de catálogo de Cytion 305695)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
Luc2 (luciérnaga, optimizada por codones)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Añade al medio un 10 % de FBS, 10 mM de HEPES, 2,5 g/l de glucosa y 1 mM de piruvato sódico.
Reactivo de disociación
Accutase, 10 minutos a 37 °C
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Relación de división
Del 1 al 3
Densidad de siembra
De 2 a 4 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Control de calidad y criopreservación

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos medio de crecimiento completo + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Edad no especificada
Origen étnico
Africano