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NCI-N87-Luc
Tecido
Estômago
Doença
Adenocarcinoma tubular gástrico
Local da metástase
Fígado
Sinónimos
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Documentos

NCI-N87-Luc

Cell line · Número do produto 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

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1

01Informações gerais

Descrição

A NCI-N87-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular humana NCI-N87 de adenocarcinoma gástrico, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de pirilampo. A linha celular parental NCI-N87 foi estabelecida a partir de uma metástase hepática de um adenocarcinoma tubular gástrico num doente do sexo masculino de ascendência africana e caracteriza-se pela amplificação do gene HER2 (ERBB2) e pela sobreexpressão da proteína, o que a torna um dos principais modelos pré-clínicos para o cancro gástrico HER2-positivo. As células NCI-N87 apresentam morfologia epitelial e são amplamente utilizadas para avaliar a eficácia de terapias direcionadas ao HER2, incluindo trastuzumab, pertuzumab e trastuzumab-emtansina (T-DM1).

A integração estável da luciferase nas células NCI-N87-Luc permite a obtenção de imagens por bioluminescência (BLI) sensíveis e não invasivas da carga tumoral em modelos de xenoenxertos subcutâneos e ortotópicos em hospedeiros imunocomprometidos. O sinal luminescente está correlacionado com o número de células tumorais viáveis, permitindo a monitorização longitudinal do enxerto tumoral, da cinética de crescimento e da resposta a agentes direcionados para o HER2 ou a agentes quimioterapêuticos. A NCI-N87-Luc é particularmente valiosa para a avaliação pré-clínica de conjugados anticorpo-fármaco (ADCs), anticorpos bispecíficos e novas estratégias direcionadas para o HER2 no cancro gástrico, bem como para aplicações de triagem de fármacos de alto rendimento.

A NCI-N87-Luc mantém o fenótipo molecular com amplificação de HER2 e as características de crescimento aderente da linha parental NCI-N87. O repórter de luciferase aumenta o rendimento experimental e a sensibilidade para estudos de imagiologia in vivo. Os investigadores devem confirmar a atividade da luciferase, o estado de expressão do HER2 e a cinética de crescimento nas suas condições experimentais específicas antes da utilização em estudos de imagiologia quantitativa ou farmacológicos.

Tecido
Estômago
Doença
Adenocarcinoma tubular gástrico
Local da metástase
Fígado
Sinónimos
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tumorigénico
Sim

04Identificadores

Referência
NCI-N87-Luc (número de catálogo da Cytion 305695)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Luc2 (firefly, com codões otimizados)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Adicione ao meio 10 % de FBS, 10 mM de HEPES, 2,5 g/L de glicose e 1 mM de piruvato de sódio
Reagente de dissociação
Accutase, 10 minutos a 37 °C
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 3
Densidade de sementeira
2 a 4 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
Idade não especificada
Etnia
Africano