Przejdź do treści
NCI-N87-Luc
Chusteczka
Żołądek
Choroba
Gruczolakorak cewkowy żołądka
Miejsce przerzutów
Wątroba
Synonimy
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Dokumenty

NCI-N87-Luc

Cell line · Numer produktu 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

NCI-N87-Luc to bioluminescencyjna odmiana ludzkiej linii komórkowej gruczolakoraka żołądka NCI-N87, zmodyfikowana genetycznie w celu stabilnej ekspresji genu reporterowego lucyferazy świetlika. Pierwotna linia komórkowa NCI-N87 została wyizolowana z przerzutów do wątroby raka gruczołowego żołądka u pacjenta płci męskiej pochodzenia afrykańskiego i charakteryzuje się amplifikacją genu HER2 (ERBB2) oraz nadekspresją białka, co czyni ją jednym z podstawowych modeli przedklinicznych raka żołądka HER2-dodatniego. Komórki NCI-N87 wykazują morfologię nabłonkową i są szeroko stosowane do oceny skuteczności terapii ukierunkowanych na HER2, w tym trastuzumabu, pertuzumabu i trastuzumabu-emtansyny (T-DM1).

Stabilna integracja lucyferazy w komórkach NCI-N87-Luc umożliwia czułe, nieinwazyjne obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) obciążenia nowotworowego w modelach przeszczepów podskórnych i ortotopowych u gospodarzy z obniżoną odpornością. Sygnał luminescencyjny koreluje z liczbą żywych komórek nowotworowych, co umożliwia długoterminowe monitorowanie wszczepienia guza, kinetyki wzrostu oraz odpowiedzi na leki ukierunkowane na HER2 lub środki chemioterapeutyczne. Linia NCI-N87-Luc jest szczególnie cenna w przedklinicznej ocenie koniugatów przeciwciał z lekami (ADC), przeciwciał bispecyficznych oraz nowych strategii ukierunkowanych na HER2 w raku żołądka, a także w zastosowaniach związanych z wysokoprzepustowym przesiewaniem leków.

NCI-N87-Luc zachowuje fenotyp molekularny z amplifikacją HER2 oraz cechy wzrostu adhezyjnego macierzystej linii NCI-N87. Reporter lucyferazy zwiększa wydajność eksperymentalną i czułość badań obrazowania in vivo. Przed zastosowaniem w badaniach obrazowania ilościowego lub badaniach farmakologicznych naukowcy powinni potwierdzić aktywność lucyferazy, status ekspresji HER2 oraz kinetykę wzrostu w swoich konkretnych warunkach eksperymentalnych.

Chusteczka
Żołądek
Choroba
Gruczolakorak cewkowy żołądka
Miejsce przerzutów
Wątroba
Synonimy
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek
Nowotworotwórczy
Tak

04Identyfikatory

Źródło
NCI-N87-Luc (numer katalogowy Cytion 305695)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Do pożywki należy dodać 10% FBS, 10 mM HEPES, 2,5 g/l glukozy oraz 1 mM pirogronianu sodu
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase – 10 minut w temperaturze 37°C
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
2 do 4 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
Wiek nieokreślony
Pochodzenie etniczne
Afrykański