İçeriğe atla
NCI-N87-Luc
Doku
Mide
Hastalık
Gastrik tübüler adenokarsinom
Metastaz yeri
Karaciğer
Eş anlamlılar
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

NCI-N87-Luc

Cell line · Ürün numarası 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NCI-N87-Luc, insan NCI-N87 mide adenokarsinomu hücre hattının biyolüminesan bir türevidir ve ateşböceği lusiferaz raportör genini kararlı bir şekilde eksprese edecek şekilde tasarlanmıştır. Ana NCI-N87 hücre hattı, Afrika kökenli bir erkek hastada görülen gastrik tübüler adenokarsinomun karaciğer metastazından elde edilmiştir ve HER2 (ERBB2) gen amplifikasyonu ile protein aşırı ekspresyonu ile karakterize edilir; bu da onu HER2-pozitif mide kanseri için başlıca preklinik modellerden biri haline getirir. NCI-N87 hücreleri epitelyal morfoloji sergiler ve trastuzumab, pertuzumab ve trastuzumab-emtansin (T-DM1) dahil olmak üzere HER2'yi hedef alan tedavilerin etkinliğini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılmaktadır.

NCI-N87-Luc'taki stabil lusiferaz entegrasyonu, bağışıklık sistemi baskılanmış konakçılarda subkutan ve ortotopik ksenogreft modellerinde tümör yükünün hassas ve noninvaziv biyolüminesans görüntülemesini (BLI) mümkün kılar. Lüminesan sinyal, canlı tümör hücresi sayısı ile korelasyon gösterir ve bu da tümörün greftlenmesi, büyüme kinetiği ve HER2 hedefli veya kemoterapötik ajanlara yanıtın uzun süreli izlenmesini destekler. NCI-N87-Luc, mide kanserinde antikor-ilaç konjugatlarının (ADC'ler), bispesifik antikorların ve yeni HER2'ye yönelik stratejilerin preklinik değerlendirmesi için olduğu kadar, yüksek verimli ilaç tarama uygulamaları için de özellikle değerlidir.

NCI-N87-Luc, ana NCI-N87 hattının HER2 amplifiye moleküler fenotipini ve yapışkan büyüme özelliklerini korur. Lüseraz raportörü, in vivo görüntüleme çalışmaları için deneysel verimi ve duyarlılığı artırır. Araştırmacılar, kantitatif görüntüleme veya farmakolojik çalışmalarda kullanmadan önce, kendi özel deney koşulları altında lusiferaz aktivitesini, HER2 ekspresyon durumunu ve büyüme kinetiğini doğrulamalıdır.

Doku
Mide
Hastalık
Gastrik tübüler adenokarsinom
Metastaz yeri
Karaciğer
Eş anlamlılar
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Tümör oluşturucu
Evet

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCI-N87-Luc (Cytion katalog numarası 305695)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
Luc2 (ateşböceği, kodon optimizasyonlu)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Besiyerine %10 FBS, 10 mM HEPES, 2,5 g/L glikoz ve 1 mM sodyum piruvat ekleyin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase, 37°C’de 10 dakika
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 3'e kadar
Ekim yoğunluğu
2 ila 4 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Yaş belirtilmemiş
Etnik köken
Afrika