Přejít na obsah
NCI-N87-Luc
Tkáň
Žaludek
Nemoc
Tubulární adenokarcinom žaludku
Místo metastázy
Játra
Synonyma
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Dokumenty

NCI-N87-Luc

Cell line · Číslo výrobku 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

NCI-N87-Luc je bioluminiscenční derivát lidské buněčné linie NCI-N87 pocházející z adenokarcinomu žaludku, který byl geneticky upraven tak, aby stabilně exprimoval reportérový gen luciferázy světlušky. Původní buněčná linie NCI-N87 byla izolována z jaterní metastázy tubulárního adenokarcinomu žaludku u mužského pacienta afrického původu a vyznačuje se amplifikací genu HER2 (ERBB2) a nadměrnou expresí tohoto proteinu, což z ní činí jeden z hlavních předklinických modelů HER2-pozitivního karcinomu žaludku. Buňky NCI-N87 vykazují epiteliální morfologii a jsou široce využívány k hodnocení účinnosti terapií zaměřených na HER2, včetně trastuzumabu, pertuzumabu a trastuzumabu-emtansinu (T-DM1).

Stabilní integrace luciferázy do buněk NCI-N87-Luc umožňuje citlivé, neinvazivní bioluminiscenční zobrazování (BLI) nádorové zátěže v podkožních a ortotopických modelech xenotransplantátů u imunokompromitovaných hostitelů. Luminiscenční signál koreluje s počtem životaschopných nádorových buněk, což umožňuje dlouhodobé sledování přihojení nádoru, kinetiky růstu a odezvy na léky zaměřené na HER2 nebo na chemoterapeutická činidla. NCI-N87-Luc je obzvláště cenný pro předklinické hodnocení konjugátů protilátek a léčiv (ADC), bispecifických protilátek a nových strategií zaměřených na HER2 u rakoviny žaludku, stejně jako pro aplikace vysokokapacitního screeningu léčiv.

NCI-N87-Luc si zachovává molekulární fenotyp s amplifikací HER2 a charakteristiky adhezivního růstu původní linie NCI-N87. Reportér luciferázy zvyšuje experimentální propustnost a citlivost pro studie zobrazování in vivo. Výzkumníci by měli před použitím v kvantitativním zobrazování nebo farmakologických studiích ověřit aktivitu luciferázy, stav exprese HER2 a růstovou kinetiku za svých specifických experimentálních podmínek.

Tkáň
Žaludek
Nemoc
Tubulární adenokarcinom žaludku
Místo metastázy
Játra
Synonyma
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové
Tumorogenní
Ano

04Identifikátory

Citace
NCI-N87-Luc (katalogové číslo Cytion 305695)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
Luc2 (světluška, s optimalizovanými kodony)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 10 mM HEPES, 2,5 g/l glukózy a 1 mM pyruvátu sodného
Disociační činidlo
Accutase 10 minut při 37 °C
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
2 až 4 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Věk nespecifikován
Etnická příslušnost
Africké