
- Tissue
- Estomac
- Disease
- Adénocarcinome tubulaire gastrique
- Metastatic site
- Foie
- Synonyms
- NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87
Documents
NCI-N87-Luc
Cell line · Product number 305695
NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...
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01General information
- Description
La lignée cellulaire NCI-N87-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire humaine NCI-N87 d’adénocarcinome gastrique, modifiée génétiquement pour exprimer de manière stable un gène rapporteur codant pour la luciférase de luciole. La lignée cellulaire parentale NCI-N87 a été établie à partir d’une métastase hépatique d’un adénocarcinome tubulaire gastrique chez un patient de sexe masculin d’origine africaine; elle se caractérise par une amplification du gène HER2 (ERBB2) et une surexpression de la protéine, ce qui en fait l’un des principaux modèles précliniques du cancer gastrique HER2-positif. Les cellules NCI-N87 présentent une morphologie épithéliale et sont largement utilisées pour évaluer l’efficacité des thérapies ciblant HER2, notamment le trastuzumab, le pertuzumab et le trastuzumab-emtansine (T-DM1).
L’intégration stable de la luciférase dans la lignée NCI-N87-Luc permet une imagerie par bioluminescence (IBL) sensible et non invasive de la charge tumorale dans des modèles de xénogreffes sous-cutanées et orthotopiques chez des hôtes immunodéprimés. Le signal luminescent est en corrélation avec le nombre de cellules tumorales viables, ce qui facilite le suivi longitudinal de la prise de greffe, de la cinétique de croissance et de la réponse aux agents ciblant HER2 ou aux agents chimiothérapeutiques. La lignée NCI-N87-Luc est particulièrement utile pour l’évaluation préclinique des conjugués anticorps-médicaments (ADC), des anticorps bispécifiques et des nouvelles stratégies ciblant HER2 dans le cancer de l’estomac, ainsi que pour les applications de criblage de médicaments à haut débit.
La lignée NCI-N87-Luc conserve le phénotype moléculaire caractérisé par une amplification de HER2 ainsi que les caractéristiques de croissance adhérente de la lignée parentale NCI-N87. Le rapporteur luciférase améliore le débit expérimental et la sensibilité des études d’imagerie in vivo. Les chercheurs doivent confirmer l’activité de la luciférase, le statut d’expression de HER2 et la cinétique de croissance dans leurs conditions expérimentales spécifiques avant toute utilisation dans le cadre d’études d’imagerie quantitative ou d’études pharmacologiques.
- Tissue
- Estomac
- Disease
- Adénocarcinome tubulaire gastrique
- Metastatic site
- Foie
- Synonyms
- NCI-N87
- NCI N87
- N-87
- NCI-H87
- H87
- H-87
- NCIN87
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Épithélial
- Tumourigenic
- Oui
04Identifiers
- Citation
- NCI-N87-Luc (numéro de catalogue Cytion 305695)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1603
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- Luc2 (firefly, optimisé au niveau des codons)
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 10 % de FBS, 10 mM d’HEPES, 2,5 g/L de glucose et 1 mM de pyruvate de sodium.
- Dissociation reagent
- Accutase : 10 minutes à 37 °C
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Split ratio
- 1 à 3
- Seeding density
- de 2 à 4 × 10⁴ cellules/cm²
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- Âge non précisé
- Ethnicity
- africain
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes