Mine otse sisu juurde
NCI-N87-Luc
Kude
Maha
Haigus
Mao tubulaarset adenokartsinoomi
Metastaaside asukoht
Maksa
Sünonüümid
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Dokumendid

NCI-N87-Luc

Cell line · Toote number 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NCI-N87-Luc on inimese NCI-N87 mao adenokartsinoomi rakuliini bioluminestsentne derivaat, mis on geneetiliselt muundatud särava sääse lucifereesi reportergeeni stabiilseks ekspresseerimiseks. Algrakuliin NCI-N87 loodi Aafrika päritolu meespatsiendi mao tubulaarse adenokartsinoomi maksametastaasist ning seda iseloomustab HER2 (ERBB2) geeni amplifikatsioon ja valgu üliekspressioon, mis teeb sellest ühe peamistest HER2-positiivse maovähi prekliinilistest mudelitest. NCI-N87 rakud omavad epiteelilist morfoloogiat ja neid kasutatakse laialdaselt HER2-suunatud ravimite, sealhulgas trastuzumabi, pertuzumabi ja trastuzumab-emtansiini (T-DM1) efektiivsuse hindamiseks.

Stabiilne lusiferaasi integratsioon NCI-N87-Luc-is võimaldab tundlikku, mitteinvasiivset bioluminestsentskuvamist (BLI) kasvajakoormuse hindamiseks nahaalustes ja ortotopilistes ksenotransplantaadi mudelites immuunpuudulikkusega peremeesorganismides. Luminestsentssignaal korreleerub elujõuliste kasvajarakkude arvuga, võimaldades kasvajasiirdamise, kasvu kineetika ning HER2-suunatud ravimite või kemoteraapiapreparaatidele reageerimise pikaajalist jälgimist. NCI-N87-Luc on eriti väärtuslik antikeha-ravimkonjugaatide (ADC-de), bispetsiifiliste antikehade ja uute HER2-suunatud strateegiate prekliiniliseks hindamiseks maovähi puhul, samuti suure läbilaskevõimega ravimite sõelumise rakendustes.

NCI-N87-Luc säilitab emaliini NCI-N87 HER2-amplifitseeritud molekulaarse fenotüübi ja adhesiivse kasvu omadused. Lusiferaasi reporter suurendab eksperimendi läbilaskevõimet ja tundlikkust in vivo pildistamisuuringutes. Teadlased peaksid enne kvantitatiivsetes pildistamis- või farmakoloogilistes uuringutes kasutamist kinnitama lusiferase aktiivsuse, HER2 ekspressiooni staatuse ja kasvukineetika oma konkreetsetes katsetingimustes.

Kude
Maha
Haigus
Mao tubulaarset adenokartsinoomi
Metastaaside asukoht
Maksa
Sünonüümid
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Tuumorigeenne
Jah

04Tunnused

Viide
NCI-N87-Luc (Cytioni katalooginumber 305695)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Lisage kasvukeskkonnale 10% FBS-i, 10 mM HEPES-i, 2,5 g/l glükoosi ja 1 mM naatriumpüruvaati
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase 10 minutit 37 °C juures
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
2 kuni 4 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täpsustamata vanus
Etniline kuuluvus
Aafrika