Gå direkte til indholdet
NCI-N87-Luc
Væv
Mave
Sygdom
Gastrisk tubulær adenokarcinom
Metastasested
Lever
Synonymer
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Dokumenter

NCI-N87-Luc

Cell line · Varenummer 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

NCI-N87-Luc er et bioluminescerende derivat af den humane NCI-N87-cellelinje for gastrisk adenokarcinom, der er genetisk modificeret til stabilt at udtrykke et reportergen for ildflue-luciferase. Den oprindelige NCI-N87-cellelinje blev etableret ud fra en levermetastase fra et tubulært adenokarcinom i maven hos en mandlig patient af afrikansk afstamning og er kendetegnet ved HER2 (ERBB2)-genamplifikation og proteinoverudtryk, hvilket gør den til en af de primære prækliniske modeller for HER2-positiv mavekræft. NCI-N87-celler udviser epitelial morfologi og anvendes i vid udstrækning til at evaluere effektiviteten af HER2-målrettede behandlinger, herunder trastuzumab, pertuzumab og trastuzumab-emtansin (T-DM1).

Den stabile luciferase-integration i NCI-N87-Luc muliggør følsom, ikke-invasiv bioluminescensbilleddannelse (BLI) af tumorbyrden i subkutane og ortotopiske xenotransplantatmodeller hos immunkompromitterede værter. Det luminescerende signal korrelerer med antallet af levedygtige tumorceller, hvilket understøtter langtidsovervågning af tumorens inkorporering, vækstkinetik og respons på HER2-målrettede midler eller kemoterapeutiske midler. NCI-N87-Luc er særligt værdifuld til præklinisk evaluering af antistof-lægemiddelkonjugater (ADC'er), bispecifikke antistoffer og nye HER2-målrettede strategier ved mavekræft samt til højkapacitets-lægemiddelscreening.

NCI-N87-Luc bevarer den HER2-amplificerede molekylære fænotype og de adhærente vækstkarakteristika fra den oprindelige NCI-N87-linje. Luciferase-reporteren forbedrer den eksperimentelle gennemstrømning og følsomheden ved in vivo-billeddannelsesundersøgelser. Forskere bør bekræfte luciferaseaktiviteten, HER2-ekspressionsstatus og vækstkinetikken under deres specifikke eksperimentelle betingelser, inden de anvender cellelinjen til kvantitativ billeddannelse eller farmakologiske undersøgelser.

Væv
Mave
Sygdom
Gastrisk tubulær adenokarcinom
Metastasested
Lever
Synonymer
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial
Tumorfremkaldende
Yeees

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCI-N87-Luc (Cytion-katalognummer 305695)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
Luc2 (ildflue, kodonoptimeret)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilsæt 10 % FBS, 10 mM HEPES, 2,5 g/l glukose og 1 mM natriumpyruvat til mediet
Dissociationsreagens
Accutase i 10 minutter ved 37 °C
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 3
Såtæthed
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium + 10 % DMSO for at opnå tilstrækkelig levedygtighed efter optøning.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Uspecificeret alder
Etnisk tilhørsforhold
Afrikansk