Tartalomra ugrás
NCI-N87-Luc
Szövet
Gyomor
Betegség
Gyomor tubuláris adenokarcinóma
Áttétes hely
Máj
Szinonimák
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Dokumentumok

NCI-N87-Luc

Cell line · Termékszám 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az NCI-N87-Luc az emberi NCI-N87 gyomor-adenokarcinóma sejtvonal biolumineszcens származéka, amelyet úgy alakítottak ki, hogy stabilan kifejezze a szentjánosbogár-luciferáz riportergént. Az eredeti NCI-N87 sejtvonalat egy afrikai származású férfi beteg gyomorcső-adenokarcinómájának májmetasztázisából állították elő, és a HER2 (ERBB2) gén amplifikációja, valamint a fehérje túltermelése jellemzi, ami a HER2-pozitív gyomorrák egyik legfontosabb preklinikai modelljévé teszi. Az NCI-N87 sejtek epiteliális morfológiát mutatnak, és széles körben használják a HER2-célzott terápiák – többek között a trastuzumab, a pertuzumab és a trastuzumab-emtansine (T-DM1) – hatékonyságának értékelésére.

A NCI-N87-Luc sejtekbe integrált stabil luciferáz lehetővé teszi a tumorterhelés érzékeny, nem invazív biolumineszcens képalkotását (BLI) szubkután és ortotópos xenotranszplantátum-modellekben immunhiányos gazdaszervezetekben. A lumineszcens jel korrelál az életképes tumorsejtek számával, ami lehetővé teszi a tumor beültetésének, növekedési kinetikájának, valamint a HER2-célzott vagy kemoterápiás szerekre adott válasz hosszanti nyomon követését. Az NCI-N87-Luc különösen értékes az antitest-gyógyszer konjugátumok (ADC-k), a bispecifikus antitestek és a gyomorrákban alkalmazott új, HER2-célzott stratégiák preklinikai értékeléséhez, valamint a nagy áteresztőképességű gyógyszerszűrési alkalmazásokhoz.

Az NCI-N87-Luc megőrzi az anyavonal, az NCI-N87 HER2-amplifikált molekuláris fenotípusát és adhezív növekedési jellemzőit. A luciferáz-riporter növeli a kísérleti áteresztőképességet és az érzékenységet az in vivo képalkotó vizsgálatok során. A kutatóknak a kvantitatív képalkotó vagy farmakológiai vizsgálatokban való felhasználás előtt saját kísérleti körülményeik között meg kell erősíteniük a luciferáz-aktivitást, a HER2-expresszió állapotát és a növekedési kinetikát.

Szövet
Gyomor
Betegség
Gyomor tubuláris adenokarcinóma
Áttétes hely
Máj
Szinonimák
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis
Daganatképző
Igen

04Azonosítók

Hivatkozás
NCI-N87-Luc (Cytion katalógusszám: 305695)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
Luc2 (szentjánosbogár, kodonoptimalizált)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-sel, 10 mM HEPES-szel, 2,5 g/l glükózzal és 1 mM nátrium-piruváttal
Diszociációs reagens
Accutase 10 percig 37 °C-on
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–3
Ültetési sűrűség
2–4 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Meghatározatlan életkor
Etnikai hovatartozás
Afrikai