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NCI-N87-Luc
Gewebe
Magen
Krankheit
Tubuläres Adenokarzinom des Magens
Metastasenherd
Leber
Synonyme
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

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NCI-N87-Luc

Cell line · Artikelnummer 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

NCI-N87-Luc ist ein biolumineszentes Derivat der menschlichen Magenadenokarzinom-Zelllinie NCI-N87, das so modifiziert wurde, dass es ein Firefly-Luciferase-Reportergen stabil exprimiert. Die ursprüngliche NCI-N87-Zelllinie wurde aus einer Lebermetastase eines tubulären Magenadenokarzinoms bei einem männlichen Patienten afrikanischer Herkunft etabliert und ist durch eine HER2 (ERBB2)-Genamplifikation und -Proteinüberexpression gekennzeichnet, was sie zu einem der wichtigsten präklinischen Modelle für HER2-positiven Magenkrebs macht. NCI-N87-Zellen weisen eine epitheliale Morphologie auf und werden häufig zur Bewertung der Wirksamkeit von HER2-gerichteten Therapien wie Trastuzumab, Pertuzumab und Trastuzumab-Emtansin (T-DM1) eingesetzt.

Die stabile Integration der Luciferase in NCI-N87-Luc ermöglicht eine empfindliche, nichtinvasive Biolumineszenz-Bildgebung (BLI) der Tumorlast in subkutanen und orthotopen Xenotransplantatmodellen bei immungeschwächten Wirten. Das Lumineszenzsignal korreliert mit der Anzahl lebensfähiger Tumorzellen und ermöglicht so die longitudinale Überwachung der Tumoransiedlung, der Wachstumskinetik und des Ansprechens auf HER2-gerichtete oder chemotherapeutische Wirkstoffe. NCI-N87-Luc ist besonders wertvoll für die präklinische Bewertung von Antikörper-Wirkstoff-Konjugaten (ADCs), bispezifischen Antikörpern und neuartigen HER2-gerichteten Strategien bei Magenkrebs sowie für Hochdurchsatz-Wirkstoffscreening-Anwendungen.

NCI-N87-Luc behält den molekularen Phänotyp mit HER2-Amplifikation und die Eigenschaften des adhärenten Wachstums der Elternlinie NCI-N87 bei. Der Luziferase-Reporter erhöht den experimentellen Durchsatz und die Empfindlichkeit für In-vivo-Bildgebungsstudien. Forscher sollten vor der Verwendung in quantitativen Bildgebungs- oder pharmakologischen Studien die Luziferaseaktivität, den HER2-Expressionsstatus und die Wachstumskinetik unter ihren spezifischen Versuchsbedingungen bestätigen.

Gewebe
Magen
Krankheit
Tubuläres Adenokarzinom des Magens
Metastasenherd
Leber
Synonyme
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Tumorauslösend
Ja

04Bezeichner

Quellenangabe
NCI-N87-Luc (Cytion-Katalognummer 305695)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
Luc2 (Firefly, codonoptimiert)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Das Medium mit 10 % FBS, 10 mM HEPES, 2,5 g/l Glukose und 1 mM Natriumpyruvat ergänzen
Dissoziationsreagenz
Accutase 10 Minuten bei 37 °C
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Split-Verhältnis
1 bis 3
Aussaatdichte
2 bis 4 x 104 Zellen/cm2
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir vollständiges Wachstumsmedium + 10 % DMSO, um eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen zu gewährleisten.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Alter nicht spezifiziert
Ethnische Zugehörigkeit
Afrika