Pāriet uz saturu
NCI-N87-Luc
Audums
Kuņģis
Slimība
Kuņģa kanāliņu adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Aknas
Sinonīmi
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Dokumenti

NCI-N87-Luc

Cell line · Preces numurs 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCI-N87-Luc ir cilvēka NCI-N87 kuņģa adenokarcinomas šūnu līnijas bioluminiscents atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskurku luciferāzes reportergēnu. Sākotnējā NCI-N87 šūnu līnija tika izveidota no kuņģa tubulārās adenokarcinomas aknu metastāzes vīrieša pacientam ar Āfrikas izcelsmi, un to raksturo HER2 (ERBB2) gēna amplifikācija un proteīna pārmērīga ekspresija, padarot to par vienu no galvenajiem pirmsklīniskajiem modeļiem HER2-pozitīvam kuņģa vēzim. NCI-N87 šūnas uzrāda epitēlija morfoloģiju un tiek plaši izmantotas, lai novērtētu HER2 mērķterapiju, tostarp trastuzumaba, pertuzumaba un trastuzumaba-emtansīna (T-DM1), efektivitāti.

Stabila luciferāzes integrācija NCI-N87-Luc šūnās ļauj veikt jutīgu, neinvazīvu bioluminiscences attēlveidošanu (BLI), lai novērtētu audzēja apjomu subkutānos un ortotopiskos ksenotransplantātu modeļos imūnsistēmas vājinātiem saņēmējiem. Luminiscences signāls korelē ar dzīvotspējīgo audzēja šūnu skaitu, kas ļauj ilgtermiņā novērot audzēja iesakņošanos, augšanas kinētiku un reakciju uz HER2 mērķtiecīgiem vai ķīmijterapijas līdzekļiem. NCI-N87-Luc ir īpaši vērtīgs antivielu-zāļu konjugātu (ADC), bispecifisko antivielu un jauno HER2 mērķtiecīgo stratēģiju pirmsklīniskai novērtēšanai kuņģa vēža gadījumā, kā arī zāļu skrīninga lietojumiem ar augstu caurlaidspēju.

NCI-N87-Luc saglabā HER2 amplificēto molekulāro fenotipu un adhezīvās augšanas īpašības, kas raksturīgas vecāku NCI-N87 līnijai. Luciferāzes reportera gēns uzlabo eksperimentālo caurlaidspēju un jutību in vivo attēlveidošanas pētījumos. Pirms izmantošanas kvantitatīvos attēlveidošanas vai farmakoloģiskajos pētījumos pētniekiem ir jāpārbauda luciferāzes aktivitāte, HER2 ekspresijas stāvoklis un augšanas kinētika savos konkrētajos eksperimentālajos apstākļos.

Audums
Kuņģis
Slimība
Kuņģa kanāliņu adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Aknas
Sinonīmi
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā

04Identifikatori

Atsauce
NCI-N87-Luc (Cytion kataloga numurs 305695)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10 % FBS, 10 mM HEPES, 2,5 g/l glikozes un 1 mM nātrija piruvātu
Disociācijas reaģents
Accutase 10 minūtes 37 °C temperatūrā
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
2 līdz 4 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Vecums nav precizēts
Etniskā piederība
Āfrikas