Preskoči na vsebino
NCI-N87-Luc
Tkivo
Želodec
Bolezen
Tubularni adenokarcinom želodca
Mesto metastaze
Jetra
Sinonimi
NCI-N87, NCI N87, N-87, NCI-H87, H87, H-87, NCIN87

Dokumenti

NCI-N87-Luc

Cell line · Številka izdelka 305695

NCI-N87-Luc is a bioluminescent derivative of the human NCI-N87 gastric adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase report...

€800.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

NCI-N87-Luc je bioluminiscenčni derivat človeške celične linije NCI-N87, ki izvira iz adenokarcinoma želodca, in je bil genetsko spremenjen tako, da stabilno izraža reporterni gen luciferaze svetlečih mušic. Izvorna celična linija NCI-N87 je bila vzpostavljena iz jetrne metastaze tubularnega adenokarcinoma želodca pri moškem pacientu afriškega porekla in je značilna po amplifikaciji gena HER2 (ERBB2) ter prekomerni ekspresiji beljakovine, kar jo uvršča med primarne predklinične modele za HER2-pozitivnega raka želodca. Celice NCI-N87 imajo epitelijsko morfologijo in se pogosto uporabljajo za ocenjevanje učinkovitosti terapij, usmerjenih v HER2, vključno s trastuzumabom, pertuzumabom in trastuzumab-emtansinom (T-DM1).

Stabilna integracija luciferaze v celicah NCI-N87-Luc omogoča občutljivo, neinvazivno slikanje z bioluminiscenco (BLI) obsega tumorja v podkožnih in ortotopnih modelih ksenotransplantatov pri imunsko oslabljenih gostiteljih. Luminescenčni signal je v korelaciji s številom živih tumorskih celic, kar omogoča longitudinalno spremljanje vživetja tumorja, kinetične rasti in odziva na zdravila, usmerjena proti HER2, ali kemoterapevtska sredstva. NCI-N87-Luc je še posebej koristen za predklinično ocenjevanje konjugatov protiteles in zdravil (ADC), bispecifičnih protiteles ter novih strategij, usmerjenih v HER2, pri raku želodca, pa tudi za aplikacije presejanja zdravil z visoko zmogljivostjo.

NCI-N87-Luc ohranja molekularni fenotip z amplifikacijo HER2 in značilnosti adhezivne rasti izvorne linije NCI-N87. Reporterna luciferaza poveča eksperimentalno zmogljivost in občutljivost za študije slikanja in vivo. Raziskovalci morajo pred uporabo v kvantitativnih slikovnih ali farmakoloških študijah potrditi aktivnost luciferaze, stanje izražanja HER2 in kinetično rast v svojih specifičnih eksperimentalnih pogojih.

Tkivo
Želodec
Bolezen
Tubularni adenokarcinom želodca
Mesto metastaze
Jetra
Sinonimi
  • NCI-N87
  • NCI N87
  • N-87
  • NCI-H87
  • H87
  • H-87
  • NCIN87

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Tumorigeničen
Da

04Identifikatorji

Navajanje vira
NCI-N87-Luc (kataloška številka Cytion 305695)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1603

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
Luc2 (svetlobna mušica, kodonsko optimizirana)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojilnemu mediju dodajte 10 % FBS, 10 mM HEPES, 2,5 g/l glukoze in 1 mM natrijevega piruvata
Reagenca za disociacijo
Accutase 10 minut pri 37 °C
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 3
Gostota setve
2 do 4 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Nedoločena starost
Etnična pripadnost
Afriški