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TCMK-1
Tissu
Rein
Maladie
Normal
Synonymes
TCMK1, Transformed C3H Mouse Kidney-1

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TCMK-1

Cell line · Référence du produit 305361

TCMK-1 is a mouse kidney epithelial cell line that was transformed using simian virus 40 (SV40). This cell line was established to study SV40-induced cell...

€540.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire TCMK-1 est une lignée de cellules épithéliales rénales de souris qui a été transformée à l'aide du virus simien 40 (SV40). Cette lignée cellulaire a été mise au point afin d'étudier la transformation cellulaire et l'oncogenèse induites par le SV40 dans le tissu rénal murin. Le processus de transformation a donné naissance à des cellules présentant une morphologie altérée, une capacité proliférative accrue et la capacité de maintenir une croissance continue in vitro. Les cellules TCMK-1 présentent un phénotype principalement épithélial, avec quelques cellules fusiformes et des cellules géantes multinucléées, qui sont des caractéristiques courantes des lignées cellulaires transformées.

L’une des principales caractéristiques de la lignée TCMK-1 est la présence du grand antigène T du SV40, qui contribue à perturber la régulation normale du cycle cellulaire en inactivant des protéines suppressives de tumeurs telles que p53 et RB. Ce mécanisme favorise une division cellulaire incontrôlée et améliore la survie cellulaire. Des études d’immunofluorescence ont confirmé l’expression d’antigènes spécifiques du SV40 dans les cellules TCMK-1, apportant ainsi une preuve supplémentaire de la transformation d’origine virale. De plus, malgré leur nature transformée, ces cellules ne semblent pas former de tumeurs in vivo lorsqu’elles sont injectées à des souris immunocompétentes.

La lignée TCMK-1 a été utilisée dans des recherches portant sur l’oncogenèse virale, la physiologie des cellules rénales et les mécanismes de transformation cellulaire. En raison de sa transformation par le SV40, elle constitue un modèle utile pour étudier les interactions virus-hôte et les voies moléculaires associées à l’immortalisation cellulaire. Toutefois, les chercheurs doivent tenir compte du fait que la présence de l’antigène T du SV40 peut altérer les fonctions cellulaires normales, ce qui pourrait influencer les résultats expérimentaux.

Tissu
Rein
Maladie
Normal
Synonymes
  • TCMK1
  • Transformed C3H Mouse Kidney-1

02Classification

Organisme
Souris
Sexe
Non précisé
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This murine kidney-derived cell line (TCMK-1) contains an SV40 T-Antigen introduced by infection with SV40 strain 777, supporting transformed and sustained proliferation. The viral sequences are stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale
Tumorigène
Non ; non, chez les souris immunodéprimées ; oui, dans un milieu semi-solide
Caryotype
Nombre modal = 78 ; intervalle = 64 à 157. Toutes les cellules présentaient 2 à 6 chromosomes acrocentriques avec des constrictions secondaires et 1 à 4 chromosomes à deux bras par cellule. Soixante pour cent des cellules comportaient un ou plusieurs chromosomes minuscules.

04Identifiants

Référence
TCMK-1 (référence Cytion 305361)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2772

05Expression et sensibilité

Expression des antigènes
H-2k
Virus
SV40
Sensibilité aux virus
Stomatite vésiculeuse, Glasgow (Indiana) ; poliovirus humain de type 1

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 10 mM d'HEPES, 2,5 g/L de glucose et 1 mM de pyruvate de sodium.
Réactif de dissociation
Accutase : 10 minutes à 37 °C
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Rapport de fractionnement
1 à 3
Densité de semis
2 à 4 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
Tous les 2 ou 3 jours
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
C3H/Mai
Âge du donneur
1 à 2 mois