TCMK-1

TCMK-1 on hiiren munuaisepiteelisolulinja, joka on transformoitu simianvirus 40:llä (SV40). Tämä solulinja perustettiin SV40:n aiheuttaman solutransformaation ja onkogeneesin tutkimiseksi hiiren munuaiskudoksessa. Transformaatioprosessin seurauksena syntyi soluja, joiden morfologia oli muuttunut, joiden proliferaatiokyky oli lisääntynyt ja jotka kykenivät ylläpitämään jatkuvaa kasvua in vitro. TCMK-1-soluilla on pääasiassa epiteelinen fenotyyppi, ja niissä esiintyy joitakin sukkulamaisia soluja sekä monitumaisia jättisoluja, jotka ovat transformaatioiden läpikäyneiden solulinjojen tyypillisiä piirteitä.

Yksi TCMK-1:n keskeisistä ominaisuuksista on SV40:n suuren T-antigeenin läsnäolo, jolla on rooli normaalin solusyklin säätelyn häiritsemisessä inaktivoimalla kasvainten estäjäproteiineja, kuten p53:a ja RB:tä. Tämä mekanismi edistää hallitsematonta solujen jakautumista ja parantaa solujen eloonjäämistä. Immunofluoresenssitutkimukset ovat vahvistaneet SV40-spesifisten antigeenien ilmentymisen TCMK-1-soluissa, mikä tarjoaa lisätodisteita viruksen aiheuttamasta transformaatiosta. Lisäksi näiden solujen transformaatiosta huolimatta niiden ei ole havaittu muodostavan kasvaimia in vivo, kun niitä on injektoitu immuunivastekykyisiin hiiriin.

TCMK-1-solua on käytetty tutkimuksissa, jotka liittyvät virusperäiseen syövän syntyyn, munuaissolujen fysiologiaan ja solujen transformaatiomekanismeihin. SV40-transformaationsa ansiosta se toimii hyödyllisenä mallina virus-isäntä-vuorovaikutusten ja solujen ikuistumiseen liittyvien molekyylireittien tutkimuksessa. Tutkijoiden tulisi kuitenkin ottaa huomioon, että SV40-T-antigeenin läsnäolo voi vaikuttaa solujen normaaleihin toimintoihin, mikä puolestaan voi vaikuttaa kokeiden tuloksiin.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa