TCMK-1
Cell line · رقم المنتج 305361
TCMK-1 is a mouse kidney epithelial cell line that was transformed using simian virus 40 (SV40). This cell line was established to study SV40-induced cell...
التخصيص / التوصيات
- TCMK-1Cell line€540.00
موصى بها (أحدث دفعة)
01معلومات عامة
- الوصف
TCMK-1 هو خط خلوي ظهاري من كلى الفأر تم تحويله باستخدام فيروس القرود 40 (SV40). وقد تم إنشاء هذا الخط الخلوي لدراسة التحول الخلوي والتكوّن السرطاني الناجمين عن فيروس SV40 في أنسجة الكلى لدى الفئران. أسفرت عملية التحويل عن خلايا ذات شكل مورفولوجي متغير، وقدرة تكاثرية متزايدة، والقدرة على الحفاظ على نمو مستمر في المختبر. تُظهر خلايا TCMK-1 نمطًا ظاهريًّا ظهاريًّا في الغالب مع وجود بعض الخلايا المغزلية الشكل والخلايا العملاقة متعددة النوى، وهي سمات شائعة في سلالات الخلايا المحولة.
تتمثل إحدى الخصائص الرئيسية لـ TCMK-1 في وجود مستضد T الكبير لفيروس SV40، الذي يلعب دورًا في تعطيل التنظيم الطبيعي لدورة الخلية عن طريق تعطيل بروتينات كابحة الأورام مثل p53 وRB. تسهل هذه الآلية الانقسام الخلوي غير المنضبط وتعزز بقاء الخلايا. وقد أكدت دراسات المناعة الفلورية التعبير عن مستضدات خاصة بفيروس SV40 في خلايا TCMK-1، مما يوفر دليلاً إضافياً على التحول الناجم عن الفيروس. بالإضافة إلى ذلك، وعلى الرغم من طبيعتها المتحولة، لم يُلاحظ أن هذه الخلايا تشكل أورامًا في الجسم الحي عند حقنها في فئران ذات جهاز مناعي سليم.
وقد استُخدمت خلايا TCMK-1 في الأبحاث المتعلقة بالتسرطن الفيروسي، وفسيولوجيا خلايا الكلى، وآليات التحول الخلوي. ونظرًا لتحولها بفعل فيروس SV40، فإنها تُعد نموذجًا مفيدًا لدراسة التفاعلات بين الفيروس والمضيف والمسارات الجزيئية المرتبطة بإضفاء الخلود على الخلايا. ومع ذلك، يجب على الباحثين أن يأخذوا في الاعتبار أن وجود مستضد SV40 T قد يؤثر على الوظائف الخلوية الطبيعية، مما قد يؤثر بدوره على نتائج التجارب.
- الأنسجة
- الكلى
- المرض
- عادي
- المرادفات
- TCMK1
- Transformed C3H Mouse Kidney-1
02التصنيف
- كائن حي
- الماوس
- الجنس
- غير محدد
- خصائص النمو
- الملتزم
- حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- GMO-S1
- تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- GMO-S1: This murine kidney-derived cell line (TCMK-1) contains an SV40 T-Antigen introduced by infection with SV40 strain 777, supporting transformed and sustained proliferation. The viral sequences are stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- المورفولوجيا
- الظهارة
- مُسبِّب للأورام
- لا؛ لا، في الفئران التي تعاني من كبت المناعة؛ نعم، في الوسط شبه الصلب
- النمط الكروموسومي
- العدد الوسيط = 78؛ النطاق = 64 إلى 157. أظهرت جميع الخلايا 2-6 كروموسومات مركزية طرفية ذات تضييقات ثانوية و1-4 كروموسومات ثنائية الأذرع في كل خلية. واحتوت 60 في المائة من الخلايا على كروموسوم دقيق واحد أو أكثر.
04المعرّفات
- المرجع
- TCMK-1 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305361)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 10090
- سيلوصور
- CVCL_2772
05التعبير والقابلية للإصابة
- التعبير عن المستضد
- هـ-2ك
- الفيروسات
- SV40
- قابلية الإصابة بالفيروس
- التهاب الفم الحويصلي، غلاسكو (إنديانا)؛ فيروس شلل الأطفال البشري 1
06التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- أضف إلى الوسط 10% من مصل الدم البشري (FBS) و10 مليمولار من HEPES، و2,5 غ/لتر من الجلوكوز، و1 مليمولار من بيروفات الصوديوم
- كاشف التفكك
- أكوتاز لمدة 10 دقائق عند 37 درجة مئوية
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- نسبة التقسيم
- من 1 إلى 3
- كثافة البذر
- 2 إلى 4 × 104 خلية/سم2
- تجديد السوائل
- كل يومين إلى 3 أيام
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
08المانح
- السلالة / النوع الفرعي
- C3H/ماي
- عمر المتبرع
- 1-2 أشهر
09الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم
