Gå direkte til indholdet
TCMK-1
Væv
Nyre
Sygdom
Normal
Synonymer
TCMK1, Transformed C3H Mouse Kidney-1

Dokumenter

TCMK-1

Cell line · Varenummer 305361

TCMK-1 is a mouse kidney epithelial cell line that was transformed using simian virus 40 (SV40). This cell line was established to study SV40-induced cell...

€540.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

TCMK-1 er en epitelcellelinje fra musenyrer, der blev transformeret ved hjælp af simianvirus 40 (SV40). Denne cellelinje blev etableret med henblik på at undersøge SV40-induceret cellulær transformation og onkogenese i nyrevæv fra mus. Transformationsprocessen resulterede i celler med ændret morfologi, øget proliferationskapacitet og evnen til at opretholde kontinuerlig vækst in vitro. TCMK-1-celler udviser en overvejende epitelial fænotype med nogle spindelformede celler og multinukleære kæmpeceller, hvilket er almindelige træk ved transformerede cellelinjer.

Et af de centrale kendetegn ved TCMK-1 er tilstedeværelsen af SV40-stort T-antigen, som spiller en rolle i forstyrrelsen af den normale cellecyklusregulering ved at inaktivere tumorsuppressorproteiner såsom p53 og RB. Denne mekanisme fremmer ukontrolleret celledeling og øger cellernes overlevelse. Immunfluorescensundersøgelser har bekræftet ekspressionen af SV40-specifikke antigener i TCMK-1-celler, hvilket giver yderligere bevis for virusinduceret transformation. Desuden er det, trods deres transformerede natur, ikke blevet observeret, at disse celler danner tumorer in vivo, når de injiceres i immunkompetente mus.

TCMK-1 er blevet anvendt i forskning vedrørende viral onkogenese, nyrecellefysiologi og cellulære transformationsmekanismer. På grund af sin SV40-transformation fungerer den som en nyttig model til at studere interaktioner mellem virus og vært samt de molekylære signalveje, der er forbundet med celleimmortalisering. Forskere bør dog tage højde for, at tilstedeværelsen af SV40 T-antigen kan påvirke normale cellulære funktioner, hvilket kan have indflydelse på forsøgsresultaterne.

Væv
Nyre
Sygdom
Normal
Synonymer
  • TCMK1
  • Transformed C3H Mouse Kidney-1

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Uspecificeret
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This murine kidney-derived cell line (TCMK-1) contains an SV40 T-Antigen introduced by infection with SV40 strain 777, supporting transformed and sustained proliferation. The viral sequences are stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial
Tumorfremkaldende
Nej; Nej, hos immunsupprimerede mus; Ja, i halvfast medium
Karyotype
Modalt antal = 78; interval = 64 til 157. Alle celler udviste 2–6 akrocentriske kromosomer med sekundære indsnævringer og 1–4 toarmede kromosomer pr. celle. 60 % af cellerne havde et eller flere meget små kromosomer.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
TCMK-1 (Cytion-katalognummer 305361)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_2772

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
H-2k
Vira
SV40
Virusfølsomhed
Vesikulær stomatitis, Glasgow (Indiana); humant poliovirus 1

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilsæt 10 % FBS og 10 mM HEPES, 2,5 g/l glukose samt 1 mM natriumpyruvat til mediet
Dissociationsreagens
Accutase i 10 minutter ved 37 °C
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 3
Såtæthed
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
Hver 2. til 3. dag
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
C3H/Mai
Donorens alder
1–2 måneder