TCMK-1
Cell line · Productnummer 305361
TCMK-1 is a mouse kidney epithelial cell line that was transformed using simian virus 40 (SV40). This cell line was established to study SV40-induced cell...
Maatwerk / Aanbevelingen
- TCMK-1Cell line€540.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
TCMK-1 is een epitheelcellijn afkomstig uit de nier van een muis, die is getransformeerd met behulp van het simian virus 40 (SV40). Deze cellijn is opgezet om de door SV40 geïnduceerde cellulaire transformatie en oncogenese in nierweefsel van muizen te bestuderen. Het transformatieproces resulteerde in cellen met een veranderde morfologie, een verhoogd proliferatievermogen en het vermogen om in vitro continu te blijven groeien. TCMK-1-cellen vertonen een overwegend epitheliaal fenotype met enkele spindelvormige cellen en meerkernige reuzencellen, wat veelvoorkomende kenmerken zijn van getransformeerde cellijnen.
Een van de belangrijkste kenmerken van TCMK-1 is de aanwezigheid van het grote T-antigeen van SV40, dat een rol speelt bij het verstoren van de normale regulatie van de celcyclus door tumorsuppressoreiwitten zoals p53 en RB te inactiveren. Dit mechanisme bevordert ongecontroleerde celdeling en versterkt de overleving van de cellen. Immunofluorescentieonderzoeken hebben de expressie van SV40-specifieke antigenen in TCMK-1-cellen bevestigd, wat verder bewijs levert voor viraal-geïnduceerde transformatie. Bovendien is, ondanks hun getransformeerde aard, niet waargenomen dat deze cellen in vivo tumoren vormen wanneer ze worden geïnjecteerd in immuuncompetente muizen.
TCMK-1 is gebruikt in onderzoek naar virale oncogenese, de fysiologie van niercellen en mechanismen van cellulaire transformatie. Vanwege de SV40-transformatie dient het als een nuttig model voor het bestuderen van interacties tussen virus en gastheer en de moleculaire routes die verband houden met celimmortaliteit. Onderzoekers moeten er echter rekening mee houden dat de aanwezigheid van het SV40 T-antigeen de normale cellulaire functies kan beïnvloeden, wat van invloed kan zijn op de experimentele resultaten.
- Weefsel
- Nieren
- Ziekte
- Normaal
- Synoniemen
- TCMK1
- Transformed C3H Mouse Kidney-1
02Classificatie
- Organisme
- Muis
- Seks
- Niet gespecificeerd
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- GMO-S1
- Details over de GGO-status
- GMO-S1: This murine kidney-derived cell line (TCMK-1) contains an SV40 T-Antigen introduced by infection with SV40 strain 777, supporting transformed and sustained proliferation. The viral sequences are stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheel
- Tumorverwekkend
- Nee; Nee, bij immuungecompromitteerde muizen; Ja, in halfvast medium
- Karyotype
- Modaal aantal = 78; bereik = 64 tot 157. Alle cellen vertoonden 2-6 acrocentrische chromosomen met secundaire vernauwingen en 1-4 tweearmige chromosomen per cel. Zestig procent van de cellen had één of meer minuscule chromosomen.
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- TCMK-1 (Cytion-catalogusnummer 305361)
- NCBI-belastingnummer
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_2772
05Expressie en vatbaarheid
- Antigeenexpressie
- H-2k
- Virussen
- SV40
- Gevoeligheid voor virussen
- Vesiculaire stomatitis, Glasgow (Indiana); Menselijk poliovirus 1
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Voeg aan het medium 10% FBS en 10 mM HEPES, 2,5 g/l glucose en 1 mM natriumpyruvaat toe
- Dissociatiereagens
- Accutase 10 minuten bij 37 °C
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Splitsingsverhouding
- 1 tot en met 3
- Zaaidichtheid
- 2 tot 4 x 104 cellen/cm2
- Vloeistofverversing
- Om de 2 tot 3 dagen
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Soort / ondersoort
- C3H/Mai
- Leeftijd van de donor
- 1-2 maanden
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja
