Vai al contenuto
TCMK-1
Tessuto
Rene
Malattia
Normale
Sinonimi
TCMK1, Transformed C3H Mouse Kidney-1

Documenti

TCMK-1

Cell line · Codice prodotto 305361

TCMK-1 is a mouse kidney epithelial cell line that was transformed using simian virus 40 (SV40). This cell line was established to study SV40-induced cell...

€540.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

La TCMK-1 è una linea cellulare epiteliale renale di topo che è stata trasformata utilizzando il virus simiano 40 (SV40). Questa linea cellulare è stata creata per studiare la trasformazione cellulare indotta dall’SV40 e l’oncogenesi nel tessuto renale murino. Il processo di trasformazione ha portato alla formazione di cellule con una morfologia alterata, una maggiore capacità proliferativa e la capacità di mantenere una crescita continua in vitro. Le cellule TCMK-1 presentano un fenotipo prevalentemente epiteliale con alcune cellule fusiformi e cellule giganti multinucleate, che sono caratteristiche comuni delle linee cellulari trasformate.

Una delle caratteristiche chiave delle cellule TCMK-1 è la presenza dell’antigene T grande dell’SV40, che contribuisce a alterare la normale regolazione del ciclo cellulare inattivando proteine oncosoppressive quali p53 e RB. Questo meccanismo facilita la divisione cellulare incontrollata e favorisce la sopravvivenza cellulare. Studi di immunofluorescenza hanno confermato l’espressione di antigeni specifici dell’SV40 nelle cellule TCMK-1, fornendo un’ulteriore prova della trasformazione indotta dal virus. Inoltre, nonostante la loro natura trasformata, non è stato osservato che queste cellule formino tumori in vivo quando iniettate in topi immunocompetenti.

La linea cellulare TCMK-1 è stata utilizzata nella ricerca riguardante l’oncogenesi virale, la fisiologia delle cellule renali e i meccanismi di trasformazione cellulare. Grazie alla sua trasformazione da parte dell’SV40, essa funge da utile modello per lo studio delle interazioni virus-ospite e delle vie molecolari associate all’immortalizzazione cellulare. Tuttavia, i ricercatori dovrebbero tenere conto del fatto che la presenza dell’antigene T dell’SV40 può influire sulle normali funzioni cellulari, il che potrebbe influenzare i risultati sperimentali.

Tessuto
Rene
Malattia
Normale
Sinonimi
  • TCMK1
  • Transformed C3H Mouse Kidney-1

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Non specificato
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This murine kidney-derived cell line (TCMK-1) contains an SV40 T-Antigen introduced by infection with SV40 strain 777, supporting transformed and sustained proliferation. The viral sequences are stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tumorigenico
No; No, nei topi immunodepressi; Sì, in terreno di coltura semisolido
Cariotipo
Numero modale = 78; intervallo = da 64 a 157. Tutte le cellule presentavano da 2 a 6 cromosomi acrocentrici con costrizioni secondarie e da 1 a 4 cromosomi a due bracci per cellula. Il 60% delle cellule presentava uno o più cromosomi minuscoli.

04Identificatori

Riferimento bibliografico
TCMK-1 (codice catalogo Cytion 305361)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2772

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
H-2k
Virus
SV40
Suscettibilità ai virus
Stomatite vescicolare, Glasgow (Indiana); Poliovirus umano 1

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Aggiungere al terreno di coltura il 10% di FBS, 10 mM di HEPES, 2,5 g/L di glucosio e 1 mM di piruvato di sodio
Reagente di dissociazione
Accutase per 10 minuti a 37 °C
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rapporto di frazionamento
da 1 a 3
Densità di semina
Da 2 a 4 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
Ogni 2 o 3 giorni
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
C3H/Mai
Età dei donatori
1-2 mesi