TCMK-1
Cell line · Product number 305361
TCMK-1 is a mouse kidney epithelial cell line that was transformed using simian virus 40 (SV40). This cell line was established to study SV40-induced cell...
Customization / Recommendations
- TCMK-1Cell line€540.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
TCMK-1 เป็นสายพันธุ์เซลล์เยื่อบุผิวไตของหนูที่ถูกเปลี่ยนแปลงโดยไวรัสซิมแปนซีไวรัส 40 (SV40) สายพันธุ์เซลล์นี้ถูกสร้างขึ้นเพื่อศึกษาการเปลี่ยนแปลงของเซลล์และการเกิดมะเร็งที่เกิดจาก SV40 ในเนื้อเยื่อไตของหนู กระบวนการเปลี่ยนแปลงส่งผลให้เซลล์มีรูปร่างที่เปลี่ยนแปลงไป มีความสามารถในการเพิ่มจำนวนมากขึ้น และมีความสามารถในการเจริญเติบโตอย่างต่อเนื่องในหลอดทดลอง เซลล์ TCMK-1 แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบเยื่อบุเป็นส่วนใหญ่ โดยมีเซลล์บางชนิดที่มีรูปร่างคล้ายแกนหมุนและเซลล์ยักษ์ที่มีหลายนิวเคลียส ซึ่งเป็นลักษณะทั่วไปของเซลล์สายพันธุ์ที่เปลี่ยนแปลงแล้ว
หนึ่งในลักษณะสำคัญของ TCMK-1 คือการมีอยู่ของ SV40 large T-antigen ซึ่งมีบทบาทในการรบกวนการควบคุมวงจรเซลล์ปกติโดยการยับยั้งการทำงานของโปรตีนยับยั้งเนื้องอก เช่น p53 และ RB กลไกนี้ช่วยส่งเสริมการแบ่งตัวของเซลล์อย่างไม่มีการควบคุมและเพิ่มการอยู่รอดของเซลล์ การศึกษาด้วยวิธีอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์ได้ยืนยันการแสดงออกของแอนติเจนเฉพาะของ SV40 ในเซลล์ TCMK-1 ซึ่งให้หลักฐานเพิ่มเติมเกี่ยวกับการเปลี่ยนแปลงที่เกิดจากไวรัส นอกจากนี้ แม้ว่าเซลล์เหล่านี้จะมีลักษณะเปลี่ยนแปลงไป แต่ยังไม่พบการก่อตัวของเนื้องอกในร่างกายเมื่อฉีดเข้าไปในหนูที่มีระบบภูมิคุ้มกันสมบูรณ์
TCMK-1 ได้ถูกนำมาใช้ในการวิจัยที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการเกิดมะเร็งจากไวรัส, สรีรวิทยาของเซลล์ไต, และกลไกการเปลี่ยนแปลงของเซลล์. เนื่องจากมีการเปลี่ยนแปลงของ SV40, มันจึงเป็นแบบจำลองที่มีประโยชน์สำหรับการศึกษาการโต้ตอบระหว่างไวรัสกับโฮสต์ และเส้นทางโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการทำให้เซลล์เป็นอมตะ. อย่างไรก็ตาม นักวิจัยควรคำนึงถึงการมีอยู่ของ SV40 T-antigen ซึ่งอาจส่งผลกระทบต่อการทำงานของเซลล์ปกติ และอาจส่งผลต่อผลลัพธ์ของการทดลอง
- Tissue
- ไต
- Disease
- ปกติ
- Synonyms
- TCMK1
- Transformed C3H Mouse Kidney-1
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This murine kidney-derived cell line (TCMK-1) contains an SV40 T-Antigen introduced by infection with SV40 strain 777, supporting transformed and sustained proliferation. The viral sequences are stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- เยื่อบุผิว
- Tumourigenic
- ไม่; ไม่, ในหนูที่ภูมิคุ้มกันบกพร่อง; ใช่, ในอาหารเลี้ยงเชื้อแบบกึ่งแข็ง
- Karyotype
- ค่าโมดอล = 78; ช่วง = 64 ถึง 157. ทุกเซลล์แสดงโครโมโซมอะโครเซนทริก 2-6 แท่งพร้อมการหดตัวรอง และโครโมโซมสองแขน 1-4 แท่งต่อเซลล์. ร้อยละหกสิบของเซลล์มีโครโมโซมขนาดเล็กหนึ่งแท่งหรือมากกว่า.
04Identifiers
- Citation
- TCMK-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305361)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_2772
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- เอช-2เค
- Viruses
- เอสวี40
- Virus susceptibility
- โรคปากและเท้าเปื่อยชนิดถุงน้ำ, กลาสโกว์ (อินเดียนา); โปลิโอไวรัสในมนุษย์ 1
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมสารอาหารลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ HEPES 10 มิลลิโมลาร์, กลูโคส 2.5 กรัม/ลิตร, โซเดียมไพรูเวต 1 มิลลิโมลาร์
- Dissociation reagent
- Accutase 10 นาที ที่ 37°C
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Split ratio
- 1 ถึง 3
- Seeding density
- 2 ถึง 4 x 104 เซลล์/ซม.
- Fluid renewal
- ทุก 2 ถึง 3 วัน
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Breed / subspecies
- C3H/Mai
- Donor age
- 1-2 เดือน
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
