TCMK-1
Cell line · Produktnummer 305361
TCMK-1 is a mouse kidney epithelial cell line that was transformed using simian virus 40 (SV40). This cell line was established to study SV40-induced cell...
Tilpasning / Anbefalinger
- TCMK-1Cell line€540.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
TCMK-1 er en epitelcellelinje fra musenyre som ble transformert ved hjelp av simianvirus 40 (SV40). Denne cellelinjen ble etablert for å studere SV40-indusert cellulær transformasjon og onkogenese i nyrevev fra mus. Transformasjonsprosessen resulterte i celler med endret morfologi, økt proliferasjonsevne og evnen til å opprettholde kontinuerlig vekst in vitro. TCMK-1-celler viser en overveiende epitelial fenotype med noen spindelformede celler og flerkjernede kjempeceller, som er vanlige trekk ved transformerte cellelinjer.
Et av de viktigste kjennetegnene ved TCMK-1 er tilstedeværelsen av det store T-antigenet fra SV40, som spiller en rolle i å forstyrre den normale reguleringen av cellesyklusen ved å inaktivere tumorsuppressorproteiner som p53 og RB. Denne mekanismen muliggjør ukontrollert celledeling og forbedrer cellenes overlevelse. Immunfluorescensstudier har bekreftet uttrykket av SV40-spesifikke antigener i TCMK-1-celler, noe som gir ytterligere bevis på virusindusert transformasjon. I tillegg har det, til tross for deres transformerte natur, ikke blitt observert at disse cellene danner svulster in vivo når de injiseres i immunkompetente mus.
TCMK-1 har blitt brukt i forskning knyttet til viral onkogenese, nyrecellefysiologi og mekanismer for cellulær transformasjon. På grunn av sin SV40-transformasjon fungerer den som en nyttig modell for å studere interaksjoner mellom virus og vert samt de molekylære signalveiene knyttet til celleimmortalisering. Forskere bør imidlertid ta hensyn til at tilstedeværelsen av SV40 T-antigen kan påvirke normale cellefunksjoner, noe som kan påvirke eksperimentelle resultater.
- Vev
- Nyre
- Sykdom
- Normal
- Synonymer
- TCMK1
- Transformed C3H Mouse Kidney-1
02Klassifisering
- Organisme
- Mus
- Sex
- Uspesifisert
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- GMO-status
- GMO-S1
- Detaljer om GMO-status
- GMO-S1: This murine kidney-derived cell line (TCMK-1) contains an SV40 T-Antigen introduced by infection with SV40 strain 777, supporting transformed and sustained proliferation. The viral sequences are stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelial
- Tumorinduserende
- Nei; Nei, hos immunsupprimerte mus; Ja, i halvfast medium
- Karyotype
- Modaltall = 78; spennvidde = 64 til 157. Alle cellene viste 2–6 akrocentriske kromosomer med sekundære innsnevringer og 1–4 kromosomer med to armer per celle. Seksti prosent av cellene hadde ett eller flere svært små kromosomer.
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- TCMK-1 (Cytion-katalognummer 305361)
- NCBI-skattenummer
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_2772
05Uttrykk og mottakelighet
- Antigenuttrykk
- H-2k
- Virus
- SV40
- Virusfølsomhet
- Vesikulær stomatitt, Glasgow (Indiana); Humant poliovirus 1
06Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Tilsett 10 % FBS og 10 mM HEPES, 2,5 g/l glukose og 1 mM natriumpyruvat til mediet
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase i 10 minutter ved 37 °C
- Subkultivering
- Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
- Oppdelingsforhold
- 1 til 3
- Såtetthet
- 2 til 4 x 104 celler/cm2
- Væskefornyelse
- Hver 2. til 3. dag
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
08Donor
- Rase / underart
- C3H/Mai
- Donorens alder
- 1–2 måneder
09Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtale om materialoverføring kreves
- Ja
