Перейти до вмісту
TCMK-1
Тканина
Нирка
Хвороба
Нормально
Синоніми
TCMK1, Transformed C3H Mouse Kidney-1

Документи

TCMK-1

Cell line · Номер товару 305361

TCMK-1 is a mouse kidney epithelial cell line that was transformed using simian virus 40 (SV40). This cell line was established to study SV40-induced cell...

€540.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

TCMK-1 — це лінія епітеліальних клітин нирок миші, яка була трансформована за допомогою вірусу мавп № 40 (SV40). Ця клітинна лінія була створена для вивчення індукованої SV40 клітинної трансформації та онкогенезу в тканині нирок мишей. В результаті процесу трансформації утворилися клітини зі зміненою морфологією, підвищеною проліферативною здатністю та здатністю до безперервного росту in vitro. Клітини TCMK-1 мають переважно епітеліальний фенотип із деякою кількістю веретеноподібних клітин та багатоядерних гігантських клітин, що є типовими ознаками трансформованих клітинних ліній.

Однією з ключових характеристик TCMK-1 є наявність великого Т-антигену SV40, який відіграє роль у порушенні нормальної регуляції клітинного циклу шляхом інактивації білків-супресорів пухлин, таких як p53 та RB. Цей механізм сприяє неконтрольованому клітинному поділу та підвищує виживаність клітин. Імунофлуоресцентні дослідження підтвердили експресію SV40-специфічних антигенів у клітинах TCMK-1, що є додатковим доказом вірусно-індукованої трансформації. Крім того, незважаючи на свою трансформовану природу, ці клітини не утворюють пухлин in vivo при введенні імунокомпетентним мишам.

Лінію TCMK-1 використовують у дослідженнях, що стосуються вірусного онкогенезу, фізіології клітин нирок та механізмів клітинної трансформації. Завдяки трансформації вірусом SV40 вона слугує корисною моделлю для вивчення взаємодій «вірус-господар» та молекулярних шляхів, пов’язаних з імунізацією клітин. Однак дослідники повинні враховувати, що наявність Т-антигену SV40 може впливати на нормальні клітинні функції, що, у свою чергу, може вплинути на результати експериментів.

Тканина
Нирка
Хвороба
Нормально
Синоніми
  • TCMK1
  • Transformed C3H Mouse Kidney-1

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Не вказано
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This murine kidney-derived cell line (TCMK-1) contains an SV40 T-Antigen introduced by infection with SV40 strain 777, supporting transformed and sustained proliferation. The viral sequences are stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальний
Пухлиноутворювальний
Ні; Ні — у мишей з пригніченим імунітетом; Так — у напівтвердому середовищі
Каріотип
Модальне число = 78; діапазон = від 64 до 157. У всіх клітинах було виявлено 2–6 акроцентричних хромосом із вторинними звуженнями та 1–4 дворукавні хромосоми на клітину. У 60 % клітин було виявлено одну або кілька крихітних хромосом.

04Ідентифікатори

Посилання
TCMK-1 (номер у каталозі Cytion — 305361)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_2772

05Експресія та сприйнятливість

Експресія антигену
H-2k
Віруси
SV40
Вразливість до вірусів
Везикулярний стоматит, Глазго (Індіана); вірус поліомієліту людини № 1

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10 % FBS та 10 мМ HEPES, 2,5 г/л глюкози, 1 мМ піруват натрію
Реагент для дисоціації
Accutase — 10 хвилин при 37 °C
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Коефіцієнт розподілу
від 1 до 3
Щільність висіву
Від 2 до 4 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
Кожні 2-3 дні
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
C3H/Mai
Вік донора
1–2 місяці