TCMK-1

A TCMK-1 é uma linhagem celular epitelial renal de camundongo que foi transformada por meio do vírus simiano 40 (SV40). Essa linhagem celular foi estabelecida para estudar a transformação celular induzida pelo SV40 e a oncogênese no tecido renal murino. O processo de transformação resultou em células com morfologia alterada, maior capacidade proliferativa e a capacidade de manter crescimento contínuo in vitro. As células TCMK-1 apresentam um fenótipo predominantemente epitelial, com algumas células fusiformes e células gigantes multinucleadas, características comuns a linhagens celulares transformadas.

Uma das principais características da TCMK-1 é a presença do antígeno T grande do SV40, que desempenha um papel na perturbação da regulação normal do ciclo celular ao inativar proteínas supressoras de tumor, como p53 e RB. Esse mecanismo facilita a divisão celular descontrolada e aumenta a sobrevivência celular. Estudos de imunofluorescência confirmaram a expressão de antígenos específicos do SV40 nas células TCMK-1, fornecendo mais evidências da transformação induzida por vírus. Além disso, apesar de sua natureza transformada, não se observou que essas células formassem tumores in vivo quando injetadas em camundongos imunocompetentes.

A linha TCMK-1 tem sido utilizada em pesquisas envolvendo oncogênese viral, fisiologia das células renais e mecanismos de transformação celular. Devido à sua transformação pelo SV40, ela serve como um modelo útil para o estudo das interações vírus-hospedeiro e das vias moleculares associadas à imortalização celular. No entanto, os pesquisadores devem levar em conta que a presença do antígeno T do SV40 pode afetar as funções celulares normais, o que poderia influenciar os resultados experimentais.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.