Skip to content
TCMK-1
Tissue
Thận
Disease
Bình thường
Synonyms
TCMK1, Transformed C3H Mouse Kidney-1

Documents

TCMK-1

Cell line · Product number 305361

TCMK-1 is a mouse kidney epithelial cell line that was transformed using simian virus 40 (SV40). This cell line was established to study SV40-induced cell...

€540.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

TCMK-1 là một dòng tế bào biểu mô thận chuột được biến đổi bằng virus khỉ 40 (SV40). Dòng tế bào này được thiết lập nhằm nghiên cứu quá trình biến đổi tế bào và sự hình thành khối u do SV40 gây ra trong mô thận chuột. Quá trình biến đổi đã dẫn đến các tế bào có hình thái thay đổi, khả năng sinh sôi tăng lên và khả năng duy trì sự phát triển liên tục trong ống nghiệm. Các tế bào TCMK-1 biểu hiện kiểu hình biểu mô chủ yếu với một số tế bào hình trục và tế bào khổng lồ đa nhân, là những đặc điểm phổ biến của các dòng tế bào biến đổi.

Một trong những đặc điểm chính của TCMK-1 là sự hiện diện của kháng nguyên T lớn của SV40, có vai trò làm gián đoạn sự điều hòa chu kỳ tế bào bình thường bằng cách vô hiệu hóa các protein ức chế khối u như p53 và RB. Cơ chế này thúc đẩy sự phân chia tế bào không kiểm soát và tăng cường khả năng sống sót của tế bào. Các nghiên cứu miễn dịch huỳnh quang đã xác nhận sự biểu hiện của các kháng nguyên đặc hiệu SV40 trong tế bào TCMK-1, cung cấp thêm bằng chứng về quá trình biến đổi do virus gây ra. Ngoài ra, mặc dù có bản chất đã biến đổi, các tế bào này chưa được quan sát thấy hình thành khối u in vivo khi tiêm vào chuột có hệ miễn dịch bình thường.

TCMK-1 đã được sử dụng trong các nghiên cứu liên quan đến quá trình gây ung thư do virus, sinh lý tế bào thận và cơ chế biến đổi tế bào. Do quá trình biến đổi do SV40 gây ra, dòng tế bào này đóng vai trò là mô hình hữu ích để nghiên cứu tương tác giữa virus và vật chủ cũng như các con đường phân tử liên quan đến quá trình bất tử hóa tế bào. Tuy nhiên, các nhà nghiên cứu cần lưu ý rằng sự hiện diện của kháng nguyên T của SV40 có thể ảnh hưởng đến các chức năng tế bào bình thường, từ đó có thể tác động đến kết quả thí nghiệm.

Tissue
Thận
Disease
Bình thường
Synonyms
  • TCMK1
  • Transformed C3H Mouse Kidney-1

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine kidney-derived cell line (TCMK-1) contains an SV40 T-Antigen introduced by infection with SV40 strain 777, supporting transformed and sustained proliferation. The viral sequences are stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Thượng bì
Tumourigenic
Không; Không, ở chuột bị ức chế miễn dịch; Có, trong môi trường bán rắn
Karyotype
Số lượng nhiễm sắc thể trung bình = 78; khoảng dao động = 64 đến 157. Tất cả các tế bào đều có 2–6 nhiễm sắc thể acrocentric có điểm thắt thứ cấp và 1–4 nhiễm sắc thể hai nhánh trên mỗi tế bào. 60% số tế bào có một hoặc nhiều nhiễm sắc thể rất nhỏ.

04Identifiers

Citation
TCMK-1 (Mã sản phẩm Cytion 305361)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_2772

05Expression and susceptibility

Antigen expression
H-2k
Viruses
SV40
Virus susceptibility
Viêm miệng mụn nước, Glasgow (Indiana); Vi-rút bại liệt ở người type 1

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% FBS và 10 mM HEPES, 2,5 g/L glucose, 1 mM natri pyruvate
Dissociation reagent
Accutase trong 10 phút ở 37°C
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Split ratio
1 đến 3
Seeding density
2 đến 4 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
Mỗi 2 đến 3 ngày
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
C3H/Mai
Donor age
1–2 tháng