Tartalomra ugrás
35.1
Szövet
Lép (B-sejt eredetű) / Csontvelő (NSI/1 mielóma fúziós partner)
Betegség
Hibridoma (B-sejt × mielóma fúzió); emberi CD2 ellen monoklonális antitestet termel (Tp50)
Áttétes hely
Nem alkalmazható (hibridoma sejtvonal; nem elsődleges daganati minta)
Szinonimák
HB-222

Dokumentumok

35.1

Cell line · Termékszám 305002

A 35.1-es hibridómasejtek a Mus musculus B-sejtjéből és mielómából származnak. Különösen érdekes az emberi T-sejt felszíni fehérjéjével, a Tp50-nel szembeni reaktivitásuk …

€700.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás
35.1 Mus musculus B-sejtből és myelomából származó hibridomasejtek. Különösen érdekes a humán T-sejtek Tp50 (CD2) felszíni fehérjével szembeni reaktivitásuk, ami értékes eszközzé teszi őket a célzott kutatás számára. A 35.1-es sejtek által termelt antitest gátolja a T-sejtek proliferatív válaszát és citotoxicitását anélkül, hogy az antitest által közvetített sejtes citotoxicitást megzavarná. A lépsejtek és az NSI/1 myeloma sejtek fúziójából származó 35.1-es sejtek immunglobulinok, különösen a humán CD2 elleni monoklonális antitestek termelésére szolgáló géneket expresszálnak. Az antitest izotípusa IgG2a.
Szövet
Lép (B-sejt eredetű) / Csontvelő (NSI/1 mielóma fúziós partner)
Betegség
Hibridoma (B-sejt × mielóma fúzió); emberi CD2 ellen monoklonális antitestet termel (Tp50)
Áttétes hely
Nem alkalmazható (hibridoma sejtvonal; nem elsődleges daganati minta)
Alkalmazások
Monoklonális antitestek előállítása (anti-humán CD2, IgG2a); T-sejt-biológiai kutatások; a CD2 által közvetített T-sejt-aktivációval és -proliferációval kapcsolatos vizsgálatok; CD2-blokádot igénylő immunológiai vizsgálatok; citotoxicitási kutatások; hibridoma-technológia
Szinonimák
  • HB-222

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nem meghatározott
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Limfoblasztok
Sejttípus
B-limfoblaszt / hibridoma sejtek
Kettőzési idő
kb. 24–36 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
1
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_7239

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
Immunglobulin, monoklonális antitest, humán CD2-vel szemben

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10%-os FBS-sel és 0,05 mM 2-merkaptoetanollal
Diszociációs reagens
Nincs
Átültetés
A lombikban lévő sejtszuszpenziót óvatosan homogenizálja fel-le pipettázással, majd vegyen egy reprezentatív mintát a sejtsűrűség ml-enkénti meghatározásához. A szuszpenziót hígítsa friss tenyésztőközeggel 1 x 105 sejt/ml sejtkoncentráció eléréséig, majd az így beállított szuszpenziót új lombikokba osztva továbbtenyésztse.
Osztási arány
1–5
Ültetési sűrűség
1–5 × 10⁵ sejt/ml
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
A felolvasztás után centrifugálja a sejteket 300×g-nél 5 percig, távolítsa el a krioprotektánst tartalmazó felülúszót, majd friss, előmelegített teljes tápközegben 1 × 10⁵ sejt/ml koncentrációra szuszpendálja újra. Az első átültetési lépés előtt hagyjon legalább 24–48 órát a sejtek regenerálódására és szaporodására.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
BALB/c (NSI/1-es mielóma-háttér)
Az adományozó életkora
Meghatározatlan életkor
Etnikai hovatartozás
Nem alkalmazható (egérsejtvonal)