- Tissue
- Baço (de origem das células B) / Medula óssea (parceiro de fusão do mieloma NSI/1)
- Disease
- Hibridoma (fusão de célula B × mieloma); produz anticorpo monoclonal contra o CD2 humano (Tp50)
- Metastatic site
- Não aplicável (linha celular de hibridoma; não se trata de uma amostra de tumor primário)
- Synonyms
- HB-222
Documents
35.1
Cell line · Product number 305002
35.1 are hybridoma cells derived from a Mus musculus B cell and myeloma. Of particular interest is their reactivity to the human T cell surface protein Tp50 ...
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01General information
- Description
- As células 35.1 são células de hibridoma derivadas de uma célula B de Mus musculus e de um mieloma. De particular interesse é sua reatividade à proteína de superfície das células T humanas Tp50 (CD2), o que as torna ferramentas valiosas para pesquisas direcionadas. O anticorpo produzido pelas células 35.1 inibe as respostas proliferativas das células T e a citotoxicidade, sem interferir na citotoxicidade celular mediada por anticorpos. Derivadas da fusão de células do baço com células de mieloma NSI/1, as células 35.1 expressam genes para a produção de imunoglobulinas, especificamente anticorpos monoclonais contra o CD2 humano. O isotipo do anticorpo é IgG2a.
- Tissue
- Baço (de origem das células B) / Medula óssea (parceiro de fusão do mieloma NSI/1)
- Disease
- Hibridoma (fusão de célula B × mieloma); produz anticorpo monoclonal contra o CD2 humano (Tp50)
- Metastatic site
- Não aplicável (linha celular de hibridoma; não se trata de uma amostra de tumor primário)
- Applications
- Produção de anticorpos monoclonais (anti-CD2 humano, IgG2a); pesquisa em biologia de células T; estudos sobre ativação e proliferação de células T mediadas por CD2; ensaios imunológicos que requerem bloqueio do CD2; pesquisa em citotoxicidade; tecnologia de hibridomas
- Synonyms
- HB-222
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Suspension
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- Linfoblasto
- Cell type
- Células linfoblastos B / hibridomas
- Doubling time
- aproximadamente 24 a 36 horas
04Identifiers
- Citation
- 1
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_7239
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Imunoglobulina, anticorpo monoclonal, contra o CD2 humano
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione ao meio 10% de FBS e 0,05 mM de 2-mercaptoetanol
- Dissociation reagent
- Nenhum
- Subculturing
- Homogeneíze suavemente a suspensão celular no frasco por meio de pipetagem para cima e para baixo e, em seguida, colete uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão com meio de cultura fresco até atingir uma concentração celular de 1 x 10⁵ células/ml e distribua a suspensão ajustada em alíquotas em novos frascos para continuação do cultivo.
- Split ratio
- 1 a 5
- Seeding density
- 1 a 5 × 10⁵ células/ml
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Post-thaw recovery
- Após o descongelamento, centrifugue as células a 300×g por 5 minutos, remova o sobrenadante contendo o crioprotetor e ressuspenda-as em meio completo novo e pré-aquecido a uma concentração de 1 × 10⁵ células/ml. Aguarde pelo menos 24 a 48 horas para a recuperação e expansão antes da primeira etapa de passagem.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Breed / subspecies
- BALB/c (com fundo de mieloma NSI/1)
- Donor age
- Idade não especificada
- Ethnicity
- Não aplicável (linha celular de camundongo)
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes