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35.1
ティッシュ
脾臓（B細胞由来）／骨髄（NSI/1骨髄腫融合パートナー）
病気
ハイブリドーマ（B細胞×骨髄腫の融合）；ヒトCD2に対するモノクローナル抗体を産生する（Tp50）
転移部位
該当なし（ハイブリドーマ細胞株；原発性腫瘍サンプルではない）
同義語
HB-222

文書

35.1

Cell line · 製品番号 305002

35.1は、Mus musculusのB細胞および骨髄腫由来のハイブリドーマ細胞である。特に注目されるのは、ヒトT細胞表面タンパク質Tp50に対するその反応性である……

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1

01概要

説明
35.1は、ムササビのB細胞と骨髄腫に由来するハイブリドーマ細胞である。特に興味深いのは、ヒトT細胞表面タンパク質Tp50（CD2）との反応性であり、標的研究のための貴重なツールとなっている。35.1細胞が産生する抗体は、抗体を介した細胞性細胞傷害性を阻害することなく、T細胞の増殖反応と細胞傷害性を阻害する。脾臓細胞とNSI/1骨髄腫細胞との融合に由来する35.1細胞は、免疫グロブリン産生用の遺伝子、特にヒトCD2に対するモノクローナル抗体を発現している。抗体のアイソタイプはIgG2aである。
ティッシュ
脾臓（B細胞由来）／骨髄（NSI/1骨髄腫融合パートナー）
病気
ハイブリドーマ（B細胞×骨髄腫の融合）；ヒトCD2に対するモノクローナル抗体を産生する（Tp50）
転移部位
該当なし（ハイブリドーマ細胞株；原発性腫瘍サンプルではない）
用途
モノクローナル抗体の作製（抗ヒトCD2、IgG2a）；T細胞生物学の研究；CD2を介したT細胞の活性化および増殖に関する研究；CD2遮断を必要とする免疫学的アッセイ；細胞毒性に関する研究；ハイブリドーマ技術
同義語
  • HB-222

02分類

生物
マウス
セックス
未指定
成長特性
サスペンション
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
2

03特徴

形態学
リンパ芽球
細胞の種類
Bリンパ芽球／ハイブリドーマ細胞
倍増時間
約24～36時間

04識別子

引用
1
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_7239

05発現と感受性

タンパク質の発現
免疫グロブリン、モノクローナル抗体、ヒトCD2に対して

06取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w：2.0mM安定グルタミン、w：2.0g/L NaHCO3（Cytion article number 820700a）
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBS、0.05 mM 2-メルカプトエタノールを添加する
解離試薬
なし
継代培養
フラスコ内の細胞懸濁液をピペッティングにより上下に優しく均質化し、代表的なサンプルを採取して1mlあたりの細胞密度を測定する。新鮮な培養液で懸濁液を希釈し、細胞濃度を1×10⁵細胞/mlに調整した後、調整した懸濁液を新たなフラスコに分注し、さらなる培養を行う。
分割比率
1～5
播種密度
1～5 × 10⁵ 細胞/ml
流体の更新
週2～3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を300×gで5分間遠心分離し、凍結保護剤を含む上清を除去した後、あらかじめ温めておいた新鮮な完全培地に1 × 10⁵ 細胞/mlの濃度で再懸濁する。 最初の継代を行う前に、少なくとも24～48時間の回復および増殖期間を設けてください。
解凍と培養

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地（FBSを含む）＋10％DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1（Cytionカタログ番号800100）を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種／亜種
BALB/c（NSI/1型骨髄腫系統）
ドナーの年齢
年齢不詳
民族
該当なし（マウス細胞株）