- Vev
- Milt (av B-celler) / Benmarg (NSI/1-myelomfusjonspartner)
- Sykdom
- Hybridom (fusjon av B-celle og myelom); produserer monoklonalt antistoff mot humant CD2 (Tp50)
- Metastaseområde
- Ikke relevant (hybridomcellelinje; ikke en primær tumorprøve)
- Synonymer
- HB-222
Dokumenter
35,1
Cell line · Produktnummer 305002
35.1 er hybridomceller avledet fra en B-celle og et myelom fra Mus musculus. Av særlig interesse er deres reaktivitet overfor det humane T-celleoverflateproteinet Tp50 ...
Tilpasning / Anbefalinger
- 35,1Cell line€700.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
- 35.1 er hybridomceller avledet fra en Mus musculus B-celle og myelom. De er spesielt interessante på grunn av sin reaktivitet mot det humane T-celleoverflateproteinet Tp50 (CD2), noe som gjør dem til verdifulle verktøy for målrettet forskning. Antistoffet som produseres av 35.1-celler, hemmer T-celleproliferative responser og cytotoksisitet uten å forstyrre antistoffmediert cellulær cytotoksisitet. 35.1-cellene, som stammer fra fusjon av miltceller med NSI/1-myelomceller, uttrykker gener for produksjon av immunglobuliner, spesielt monoklonale antistoffer mot humant CD2. Isotypen til antistoffet er IgG2a.
- Vev
- Milt (av B-celler) / Benmarg (NSI/1-myelomfusjonspartner)
- Sykdom
- Hybridom (fusjon av B-celle og myelom); produserer monoklonalt antistoff mot humant CD2 (Tp50)
- Metastaseområde
- Ikke relevant (hybridomcellelinje; ikke en primær tumorprøve)
- Søknader
- Produksjon av monoklonale antistoffer (anti-humant CD2, IgG2a); forskning på T-cellebiologi; studier av CD2-mediert aktivering og proliferasjon av T-celler; immunologiske analyser som krever CD2-blokkering; forskning på cytotoksisitet; hybridomteknologi
- Synonymer
- HB-222
02Klassifisering
- Organisme
- Mus
- Sex
- Uspesifisert
- Vekstegenskaper
- Oppheng
- GMO-status
- GMO-S1
- Detaljer om GMO-status
- GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosikkerhetsnivå
- 2
03Egenskaper
- Morfologi
- Lymfoblast
- Celletype
- B-lymfoblast-/hybridomceller
- Fordoblingstid
- ca. 24 til 36 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- 1
- NCBI-skattenummer
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_7239
05Uttrykk og mottakelighet
- Proteinekspresjon
- Immunglobulin, monoklonalt antistoff, mot humant CD2
06Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Tilsett 10 % FBS og 0,05 mM 2-merkaptoetanol i mediet
- Dissosiasjonsmiddel
- Ingen
- Subkultivering
- Homogeniser cellesuspensjonen i kolben forsiktig ved å pipettere opp og ned, og ta deretter en representativ prøve for å bestemme celletettheten per ml. Fortynn suspensjonen til en cellekonsentrasjon på 1 x 105 celler/ml med ferskt dyrkningsmedium, og fordel den justerte suspensjonen i nye kolber for videre dyrking.
- Oppdelingsforhold
- 1 til 5
- Såtetthet
- 1 til 5 × 10⁵ celler/ml
- Væskefornyelse
- 2 til 3 ganger per uke
- Gjenoppretting etter tining
- Etter opptining sentrifugeres cellene ved 300×g i 5 minutter, supernatanten som inneholder kryobeskyttelsesmiddel fjernes, og cellene resuspenderes i ferskt, forvarmet komplett medium med en konsentrasjon på 1 × 10⁵ celler/ml. La cellene få minst 24–48 timer til å komme seg og formere seg før det første passasjetrinnet.
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
08Donor
- Rase / underart
- BALB/c (NSI/1-myelombakgrunn)
- Donorens alder
- Uspesifisert alder
- Etnisitet
- Ikke relevant (musecellelinje)
09Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtale om materialoverføring kreves
- Ja