Gå direkte til indholdet
35,1
Væv
Milten (af B-celleoprindelse) / Knoglemarven (NSI/1-myelom-fusionspartner)
Sygdom
Hybridom (fusion mellem B-celle og myelom); producerer monoklonalt antistof mod humant CD2 (Tp50)
Metastasested
Ikke relevant (hybridomcellelinje; ikke en primær tumorprøve)
Synonymer
HB-222

Dokumenter

35,1

Cell line · Varenummer 305002

35.1 er hybridomceller, der stammer fra en B-celle fra Mus musculus og et myelom. Af særlig interesse er deres reaktivitet over for det humane T-celleoverfladeprotein Tp50 ...

€700.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse
35.1 er hybridomceller, der stammer fra en Mus musculus B-celle og myelom. Af særlig interesse er deres reaktivitet over for det humane T-celleoverfladeprotein Tp50 (CD2), hvilket gør dem til værdifulde værktøjer til målrettet forskning. Det antistof, der produceres af 35.1-celler, hæmmer T-celleproliferative reaktioner og cytotoksicitet uden at forstyrre den antistofmedierede cellulære cytotoksicitet. 35.1-cellerne stammer fra fusion af miltceller med NSI/1-myelomceller og udtrykker gener til produktion af immunglobuliner, specifikt monoklonale antistoffer mod humant CD2. Antistoffets isotype er IgG2a.
Væv
Milten (af B-celleoprindelse) / Knoglemarven (NSI/1-myelom-fusionspartner)
Sygdom
Hybridom (fusion mellem B-celle og myelom); producerer monoklonalt antistof mod humant CD2 (Tp50)
Metastasested
Ikke relevant (hybridomcellelinje; ikke en primær tumorprøve)
Anvendelser
Produktion af monoklonale antistoffer (anti-human CD2, IgG2a); forskning i T-cellebiologi; undersøgelser af CD2-medieret T-celleaktivering og -proliferation; immunologiske analyser, der kræver blokering af CD2; forskning i cytotoksicitet; hybridomteknologi
Synonymer
  • HB-222

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Uspecificeret
Vækstegenskaber
Affjedring
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Lymfoblast
Celletype
B-lymfoblast-/hybridomceller
Fordoblingstid
ca. 24 til 36 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
1
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_7239

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
Immunoglobulin, monoklonalt antistof, mod humant CD2

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilsæt 10 % FBS og 0,05 mM 2-mercaptoethanol til mediet
Dissociationsreagens
Ingen
Oddyrkning
Homogeniser forsigtigt cellesuspensionen i kolben ved at pipettere op og ned, og tag derefter en repræsentativ prøve for at bestemme celletætheden pr. ml. Fortynd suspensionen til en cellekoncentration på 1 x 105 celler/ml med frisk dyrkningsmedium, og fordel den justerede suspension i nye kolber til videre dyrkning.
Opdelingsforhold
1 til 5
Såtæthed
1 til 5 × 10⁵ celler/ml
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning centrifugeres cellerne ved 300×g i 5 minutter, supernatanten, der indeholder kryobeskyttelsesmidlet, fjernes, og cellerne resuspenderes i frisk, forvarmet komplet medium til en koncentration på 1 × 10⁵ celler/ml. Giv cellerne mindst 24–48 timer til at komme sig og formere sig, inden den første passagering foretages.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
BALB/c (med NSI/1-myelombaggrund)
Donorens alder
Uspecificeret alder
Etnisk tilhørsforhold
Ikke relevant (musecellelinje)