Siirry sisältöön
35,1
Kudos
Perna (B-soluperäinen) / Luuydin (NSI/1-myelooman fuusiokumppani)
Sairaus
Hybridoma (B-solu × myelooma-fuusio); tuottaa monoklonaalista vasta-ainetta ihmisen CD2:ta vastaan (Tp50)
Metastaasikohde
Ei sovelleta (hybridomasolulinja; ei primaarinen kasvainnäyte)
Synonyymit
HB-222

Asiakirjat

35,1

Cell line · Tuotenumero 305002

35.1 ovat Mus musculus -lajin B-solusta ja myeloomasta peräisin olevia hybridomasoluja. Erityisen kiinnostavaa on niiden reaktiivisuus ihmisen T-solun pintaproteiiniin Tp50 ...

€700.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus
35.1 ovat hybridoomasoluja, jotka on johdettu Mus musculus B-soluista ja myeloomasta. Erityisen kiinnostavaa on niiden reaktiivisuus ihmisen T-solujen pintaproteiinille Tp50 (CD2), mikä tekee niistä arvokkaita välineitä kohdennettuun tutkimukseen. 35.1-solujen tuottama vasta-aine estää T-solujen proliferatiivisia vasteita ja sytotoksisuutta häiritsemättä vasta-aineen välittämää solujen sytotoksisuutta. Pernasolujen ja NSI/1-myeloomasolujen fuusiosta peräisin olevat 35.1-solut ilmentävät immunoglobuliinien, erityisesti ihmisen CD2:ta vastaan tarkoitettujen monoklonaalisten vasta-aineiden tuotantoon tarkoitettuja geenejä. Vasta-aineen isotyyppi on IgG2a.
Kudos
Perna (B-soluperäinen) / Luuydin (NSI/1-myelooman fuusiokumppani)
Sairaus
Hybridoma (B-solu × myelooma-fuusio); tuottaa monoklonaalista vasta-ainetta ihmisen CD2:ta vastaan (Tp50)
Metastaasikohde
Ei sovelleta (hybridomasolulinja; ei primaarinen kasvainnäyte)
Sovellukset
Monoklonaalisten vasta-aineiden tuotanto (ihmisen CD2:ta vastaan, IgG2a); T-solubiologian tutkimus; CD2:n välittämää T-solujen aktivaatiota ja proliferaatiota koskevat tutkimukset; CD2:n salpausta edellyttävät immunologiset määritykset; sytotoksisuustutkimus; hybridoma-tekniikka
Synonyymit
  • HB-222

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Jousitus
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Lymfoblastit
Solutyyppi
B-lymfoblasti- / hybridomasolut
Kaksinkertaistumisaika
noin 24–36 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
1
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_7239

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Immunoglobuliini, monoklonaalinen vasta-aine, ihmisen CD2:ta vastaan

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisää elatusaineeseen 10 % FBS:ää ja 0,05 mM 2-merkaptoetanolia
Dissosiaatioreagenssi
Ei mitään
Soluviljely
Homogenoi solususpensio varovasti pullossa pipetoimalla ylös ja alas, ota sitten edustava näyte solutiheyden määrittämiseksi millilitraa kohti. Laimenna suspensio tuoreella viljelyalustalla solupitoisuudeksi 1 x 105 solua/ml ja jaa säädetty suspensio uusiin pulloihin jatkokäsittelyä varten.
Jakosuhde
1–5
Kylvötiheys
1–5 × 10⁵ solua/ml
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulatuksen jälkeen sentrifugoi solut 300×g:n voimalla 5 minuutin ajan, poista kryoprotektiivia sisältävä supernatantti ja suspendoi solut uudelleen tuoreeseen, esilämmitettyyn täydelliseen elatusaineeseen pitoisuudella 1 × 10⁵ solua/ml. Anna solujen toipua ja lisääntyä vähintään 24–48 tuntia ennen ensimmäistä siirtoa.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
BALB/c (NSI/1-myeloomatausta)
Luovuttajan ikä
Ikä määrittelemätön
Etnisyys
Ei sovelleta (hiiren solulinja)