Pereiti prie turinio
35.1
Audinys
Bliuzas (B ląstelių kilmės) / Kaulų čiulpai (NSI/1 mielomos jungimosi partneris)
Liga
Hibridoma (B ląstelių ir mielomos susijungimas); gamina monokloninį antikūną prieš žmogaus CD2 (Tp50)
Metastazių vieta
Netaikoma (hibridomų ląstelių linija; tai nėra pirminio naviko mėginys)
Sinonimai
HB-222

Dokumentai

35.1

Cell line · Prekės numeris 305002

35.1 yra hibridomos ląstelės, gautos iš „Mus musculus“ B ląstelių ir mielomos. Ypač įdomus yra jų reaktyvumas žmogaus T ląstelių paviršiaus baltymui Tp50 ...

€700.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas
35.1 yra hibridomos ląstelės, gautos iš Mus musculus B ląstelių ir mielomos. Ypač įdomus jų reaktyvumas į žmogaus T ląstelių paviršiaus baltymą Tp50 (CD2), todėl jos yra vertingas įrankis tiksliniams tyrimams. 35.1 ląstelių gaminami antikūnai slopina T ląstelių proliferacinį atsaką ir citotoksiškumą, netrukdydami antikūnų medijuojamam ląstelių citotoksiškumui. 35.1 ląstelės, gautos susijungus blužnies ląstelėms su NSI/1 mielomos ląstelėmis, išreiškia genus imunoglobulinų gamybai, ypač monokloninių antikūnų prieš žmogaus CD2. Antikūnų izotipas yra IgG2a.
Audinys
Bliuzas (B ląstelių kilmės) / Kaulų čiulpai (NSI/1 mielomos jungimosi partneris)
Liga
Hibridoma (B ląstelių ir mielomos susijungimas); gamina monokloninį antikūną prieš žmogaus CD2 (Tp50)
Metastazių vieta
Netaikoma (hibridomų ląstelių linija; tai nėra pirminio naviko mėginys)
Paraiškos
Monokloninių antikūnų gamyba (prieš žmogaus CD2, IgG2a); T ląstelių biologijos tyrimai; CD2 reguliuojamos T ląstelių aktyvacijos ir proliferacijos tyrimai; imunologiniai tyrimai, kuriems reikalingas CD2 blokavimas; citotoksiškumo tyrimai; hibridomų technologija
Sinonimai
  • HB-222

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Nenurodyta
Augimo savybės
Pakaba
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Limfoblastai
Ląstelių tipas
B limfoblastų / hibridomų ląstelės
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug nuo 24 iki 36 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
1
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_7239

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
Imunoglobulinas, monokloninis antikūnas prieš žmogaus CD2

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Į terpę įpilkite 10 % FBS ir 0,05 mM 2-merkaptoetanolio
Disociacijos reagentas
Nėra
Subkultūrinis auginimas
Švelniai homogenizuokite kolboje esantį ląstelių suspensiją, pipetuodami aukštyn ir žemyn, tada paimkite reprezentatyvią mėginį, kad nustatytumėte ląstelių tankį ml. Praskieskite suspensiją, kad pasiektumėte 1 x 105 ląstelių/ml koncentraciją šviežia kultūrinė terpė, ir padalinkite pakoreguotą suspensiją į naujas kolbas tolesniam auginimui.
Skaidymo santykis
1–5
Sėjos tankis
nuo 1 iki 5 × 10⁵ ląstelių/ml
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius ląsteles, centrifuguokite jas 300×g greičiu 5 minutes, pašalinkite krioprotektanto turintį supernatantą ir resuspenduokite šviežioje, iš anksto pašildytoje pilnoje terpėje, kad koncentracija būtų 1 × 10⁵ ląstelių/ml. Prieš pirmąjį perėjimą palikite ląsteles atsigauti ir padaugėti mažiausiai 24–48 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
BALB/c (su NSI/1 mielomos fonu)
Donoro amžius
Amžius nenurodytas
Etninė priklausomybė
Netaikoma (pelės ląstelių linija)