Przejdź do treści
35.1
Chusteczka
Śledziona (pochodzenie komórek B) / Szpik kostny (partner fuzji w szpiczaku NSI/1)
Choroba
Hybrydom (fuzja komórek B i komórek szpiczaka); wytwarza przeciwciało monoklonalne przeciwko ludzkiemu CD2 (Tp50)
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (linia komórkowa hibridomowa; nie jest to próbka guza pierwotnego)
Synonimy
HB-222

Dokumenty

35.1

Cell line · Numer produktu 305002

35.1 to komórki hybrydomowe pochodzące z komórek B i szpiczaka myszy Mus musculus. Na szczególną uwagę zasługuje ich reaktywność wobec ludzkiego białka powierzchniowego komórek T, Tp50 ...

€700.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis
35.1 to komórki hybrydoma pochodzące z komórek B Mus musculus i szpiczaka. Szczególnie interesująca jest ich reaktywność na białko powierzchniowe ludzkich komórek T Tp50 (CD2), co czyni je cennymi narzędziami do ukierunkowanych badań. Przeciwciało wytwarzane przez komórki 35.1 hamuje odpowiedzi proliferacyjne i cytotoksyczność komórek T bez zakłócania cytotoksyczności komórkowej, w której pośredniczą przeciwciała. Pochodzące z fuzji komórek śledziony z komórkami szpiczaka NSI/1, komórki 35.1 wyrażają geny do produkcji immunoglobulin, w szczególności przeciwciał monoklonalnych przeciwko ludzkiemu CD2. Izotypem przeciwciała jest IgG2a.
Chusteczka
Śledziona (pochodzenie komórek B) / Szpik kostny (partner fuzji w szpiczaku NSI/1)
Choroba
Hybrydom (fuzja komórek B i komórek szpiczaka); wytwarza przeciwciało monoklonalne przeciwko ludzkiemu CD2 (Tp50)
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (linia komórkowa hibridomowa; nie jest to próbka guza pierwotnego)
Zastosowania
Produkcja przeciwciał monoklonalnych (przeciw ludzkiemu CD2, IgG2a); badania z zakresu biologii komórek T; badania nad aktywacją i proliferacją komórek T za pośrednictwem CD2; testy immunologiczne wymagające blokady CD2; badania nad cytotoksycznością; technologia hybrydomowa
Synonimy
  • HB-222

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Nieokreślone
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Limfoblast
Typ komórki
Komórki limfoblastów typu B / komórki hybrydomowe
Czas podwojenia
ok. 24–36 godzin

04Identyfikatory

Źródło
1
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_7239

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Immunoglobulina, przeciwciało monoklonalne przeciwko ludzkiemu CD2

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Do pożywki dodać 10% FBS oraz 0,05 mM 2-merkaptoetanolu
Odczynnik dysocjacyjny
Brak
Hodowla komórek w subkulturze
Delikatnie homogenizować zawiesinę komórek w kolbie, pipetując w górę i w dół, a następnie pobrać reprezentatywną próbkę w celu określenia gęstości komórek na ml. Rozcieńczyć zawiesinę świeżym podłożem hodowlanym, aby uzyskać stężenie komórek wynoszące 1 x 105 komórek/ml, a następnie podzielić dostosowaną zawiesinę na porcje w nowych kolbach w celu dalszej hodowli.
Współczynnik podziału
od 1 do 5
Gęstość wysiewu
od 1 do 5 × 10⁵ komórek/ml
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu komórki należy odwirować przy 300×g przez 5 minut, usunąć supernatant zawierający środek krioprotekcyjny, a następnie zawiesić je w świeżej, wstępnie podgrzanej pożywce kompletnej w stężeniu 1 × 10⁵ komórek/ml. Przed pierwszym pasażowaniem należy odczekać co najmniej 24–48 godzin na regenerację i namnożenie komórek.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
BALB/c (na tle szpiczaka NSI/1)
Wiek dawcy
Wiek nieokreślony
Pochodzenie etniczne
Nie dotyczy (linia komórkowa myszy)