Preskoči na vsebino
35,1
Tkivo
Vranica (izvor B-celic) / Kostni mozeg (partner v fuziji pri mielomu NSI/1)
Bolezen
Hibridom (fuzija B-celic in mieloma); proizvaja monoklonalno protitelo proti človeškemu CD2 (Tp50)
Mesto metastaze
Ne velja (hibridomska celična linija; ne gre za vzorec primarnega tumorja)
Sinonimi
HB-222

Dokumenti

35,1

Cell line · Številka izdelka 305002

35.1 so hibridomske celice, pridobljene iz B-celice in mieloma vrste Mus musculus. Zlasti zanimiva je njihova reaktivnost na površinski protein človeških T-celic Tp50 ...

€700.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis
35.1 so hibridomske celice, pridobljene iz celic B in mieloma Mus musculus. Posebej zanimiva je njihova reaktivnost na površinski protein človeških celic T Tp50 (CD2), zaradi česar so dragoceno orodje za usmerjene raziskave. Protitelo, ki ga proizvajajo celice 35.1, zavira proliferacijske odzive in citotoksičnost celic T, ne da bi posegalo v celično citotoksičnost, posredovano s protitelesi. Celice 35.1, pridobljene z združitvijo celic vranice s celicami mieloma NSI/1, izražajo gene za proizvodnjo imunoglobulinov, zlasti monoklonskih protiteles proti človeškemu CD2. Izotip protitelesa je IgG2a.
Tkivo
Vranica (izvor B-celic) / Kostni mozeg (partner v fuziji pri mielomu NSI/1)
Bolezen
Hibridom (fuzija B-celic in mieloma); proizvaja monoklonalno protitelo proti človeškemu CD2 (Tp50)
Mesto metastaze
Ne velja (hibridomska celična linija; ne gre za vzorec primarnega tumorja)
Uporaba
Proizvodnja monoklonskih protiteles (proti človeškemu CD2, IgG2a); raziskave na področju biologije T-celic; študije aktivacije in proliferacije T-celic, posredovane s CD2; imunološke analize, ki zahtevajo blokado CD2; raziskave citotoksičnosti; tehnologija hibridomov
Sinonimi
  • HB-222

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Limfoblast
Vrsta celice
B-limfoblastne / hibridomske celice
Čas podvojitve
približno 24 do 36 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
1
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_7239

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Imunoglobulin, monoklonsko protitelo proti človeškemu CD2

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojilnemu mediju dodajte 10 % FBS in 0,05 mM 2-merkaptoetanola
Reagenca za disociacijo
Nič
Preusmeritev v drugo kulturo
Nežno homogenizirajte celično suspenzijo v kolbi s pipetiranjem navzgor in navzdol, nato odvzemite reprezentativni vzorec za določitev gostote celic na ml. Suspenzijo razredčite, da dosežete koncentracijo celic 1 x 105 celic/ml s svežim kultiviranim medijem, in prilagojeno suspenzijo razdelite v nove kolbe za nadaljnje gojenje.
Razmerje delitve
1 do 5
Gostota setve
1 do 5 × 10⁵ celic/ml
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice centrifugirajte pri 300×g 5 minut, odstranite supernatant, ki vsebuje krioprotektant, in jih ponovno suspendirajte v svežem, predhodno ogretem popolnem gojišču v koncentraciji 1 × 10⁵ celic/ml. Pred prvim prestavljanjem celic počakajte vsaj 24–48 ur, da se celice opomorejo in razmnožijo.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
BALB/c (z ozadjem mieloma NSI/1)
Starost darovalca
Nedoločena starost
Etnična pripadnost
Ni relevantno (celična linija miši)