Prejsť na obsah
35,1
Tkanivo
Slezina (pôvod B-buniek) / Kostná dreň (fúzny partner pri myelóme NSI/1)
Choroba
Hybridóm (fúzia B-buniek a myelómu); produkuje monoklonálnu protilátku proti ľudskému CD2 (Tp50)
Miesto metastáz
Neplatí (hybridómová bunková línia; nejde o vzorku primárneho nádoru)
Synonymá
HB-222

Dokumenty

35,1

Cell line · Číslo výrobku 305002

35.1 sú hybridómové bunky odvodené z B-bunky a myelómu druhu Mus musculus. Zvláštny záujem vzbudzuje ich reaktivita voči povrchovému proteínu ľudských T-buniek Tp50 ...

€700.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis
35.1 sú hybridómové bunky odvodené z B-buniek Mus musculus a myelómu. Mimoriadne zaujímavá je ich reaktivita na povrchový proteín ľudských T-buniek Tp50 (CD2), čo z nich robí cenné nástroje pre cielený výskum. Protilátka produkovaná bunkami 35.1 inhibuje proliferačné reakcie a cytotoxicitu T-buniek bez toho, aby zasahovala do protilátkou sprostredkovanej bunkovej cytotoxicity. Bunky 35.1, odvodené z fúzie buniek sleziny s myelómovými bunkami NSI/1, exprimujú gény pre produkciu imunoglobulínov, konkrétne monoklonálnych protilátok proti ľudskému CD2. Izotyp protilátky je IgG2a.
Tkanivo
Slezina (pôvod B-buniek) / Kostná dreň (fúzny partner pri myelóme NSI/1)
Choroba
Hybridóm (fúzia B-buniek a myelómu); produkuje monoklonálnu protilátku proti ľudskému CD2 (Tp50)
Miesto metastáz
Neplatí (hybridómová bunková línia; nejde o vzorku primárneho nádoru)
Aplikácie
Výroba monoklonálnych protilátok (proti ľudskému CD2, IgG2a); výskum biológie T-buniek; štúdie aktivácie a proliferácie T-buniek sprostredkované CD2; imunologické testy vyžadujúce blokádu CD2; výskum cytotoxicity; technológia hybridómov
Synonymá
  • HB-222

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Lymfoblast
Typ bunky
B-lymfoblastové / hybridómové bunky
Doba zdvojnásobenia
približne 24 až 36 hodín

04Identifikátory

Citácia
1
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_7239

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
Imunoglobulín, monoklonálna protilátka proti ľudskému CD2

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Do živného média pridajte 10 % FBS a 0,05 mM 2-merkaptoetanolu
Disociačné činidlo
Žiadne
Rozmnožovanie kultúr
Jemne homogenizujte bunkovú suspenziu v banke pipetovaním hore a dole, potom odoberte reprezentatívnu vzorku na stanovenie hustoty buniek na ml. Suspenziu zrieďte čerstvým kultivačným médiom, aby ste dosiahli koncentráciu buniek 1 x 105 buniek/ml, a upravenú suspenziu rozdeľte do nových baniek na ďalšie kultivovanie.
Pomer rozdelenia
1 až 5
Hustota výsevu
1 až 5 × 10⁵ buniek/ml
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení odstreďte bunky pri 300×g po dobu 5 minút, odstráňte supernatant obsahujúci kryoprotektant a bunky resuspendujte v čerstvom, vopred zahriatom kompletnom médiu v koncentrácii 1 × 10⁵ buniek/ml. Pred prvým pasážovaním nechajte bunky aspoň 24–48 hodín na zotavenie a rozmnoženie.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
BALB/c (na pozadí myelómu NSI/1)
Vek darcu
Vek nešpecifikovaný
Etnická príslušnosť
Neplatí (myšia bunková línia)