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35,1
Pañuelo de papel
Bazo (de origen de células B) / Médula ósea (socio de fusión del mieloma NSI/1)
Enfermedad
Hibridoma (fusión de célula B y mieloma); produce un anticuerpo monoclonal contra el CD2 humano (Tp50)
Lugar de metástasis
No aplicable (línea celular de hibridoma; no es una muestra de tumor primario)
Sinónimos
HB-222

Documentos

35,1

Cell line · Número de producto 305002

35.1 son células de hibridoma derivadas de una célula B de Mus musculus y de un mieloma. Resulta de especial interés su reactividad frente a la proteína Tp50, presente en la superficie de las células T humanas...

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1

01Información general

Descripción
35.1 son células de hibridoma derivadas de una célula B y un mieloma de Mus musculus. De particular interés es su reactividad a la proteína de superficie de células T humanas Tp50 (CD2), lo que las convierte en valiosas herramientas para la investigación dirigida. El anticuerpo producido por las células 35.1 inhibe las respuestas proliferativas y la citotoxicidad de las células T sin interferir con la citotoxicidad celular mediada por anticuerpos. Derivadas de la fusión de células de bazo con células de mieloma NSI/1, las células 35.1 expresan genes para la producción de inmunoglobulinas, concretamente anticuerpos monoclonales contra CD2 humano. El isotipo del anticuerpo es IgG2a.
Pañuelo de papel
Bazo (de origen de células B) / Médula ósea (socio de fusión del mieloma NSI/1)
Enfermedad
Hibridoma (fusión de célula B y mieloma); produce un anticuerpo monoclonal contra el CD2 humano (Tp50)
Lugar de metástasis
No aplicable (línea celular de hibridoma; no es una muestra de tumor primario)
Aplicaciones
Producción de anticuerpos monoclonales (anti-CD2 humano, IgG2a); investigación sobre la biología de las células T; estudios sobre la activación y proliferación de las células T mediadas por CD2; ensayos inmunológicos que requieren el bloqueo de CD2; investigación sobre citotoxicidad; tecnología de hibridomas
Sinónimos
  • HB-222

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Sin especificar
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
2

03Características

Morfología
Linfoblasto
Tipo de célula
Células linfoblastos B / células de hibridoma
Tiempo de duplicación
entre 24 y 36 horas, aproximadamente

04Identificadores

Referencia
1
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_7239

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
Inmunoglobulina, anticuerpo monoclonal, contra CD2 humano

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Añade al medio un 10 % de FBS y 0,05 mM de 2-mercaptoetanol
Reactivo de disociación
Ninguno
Subcultivo
Homogeneice suavemente la suspensión celular en el matraz pipeteando hacia arriba y hacia abajo, y luego tome una muestra representativa para determinar la densidad celular por ml. Diluya la suspensión para alcanzar una concentración celular de 1 x 105 células/ml con medio de cultivo fresco, y divida la suspensión ajustada en nuevos matraces para su posterior cultivo.
Relación de división
Del 1 al 5
Densidad de siembra
De 1 a 5 × 10⁵ células/ml
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Tras la descongelación, centrifuga las células a 300×g durante 5 minutos, retira el sobrenadante que contiene el crioprotector y resuspendelas en medio completo nuevo y precalentado a una concentración de 1 × 10⁵ células/ml. Deje que las células se recuperen y se multipliquen durante al menos 24-48 horas antes de realizar el primer paso de pasaje.
Descongelación y cultivo

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
BALB/c (con fondo de mieloma NSI/1)
Edad del donante
Edad no especificada
Origen étnico
No aplicable (línea celular de ratón)