- Weefsel
- Milt (van B-cellen afkomstig) / Beenmerg (fusiepartner van NSI/1-myeloom)
- Ziekte
- Hybridoma (fusie van B-cel en myeloom); produceert monoklonaal antilichaam tegen menselijk CD2 (Tp50)
- Plaats van uitzaaiingen
- Niet van toepassing (hybridomacellijn; geen primair tumormonster)
- Synoniemen
- HB-222
Documenten
35.1
Cell line · Productnummer 305002
35.1 zijn hybridomacellen die zijn afgeleid van een B-cel en een myeloom van Mus musculus. Van bijzonder belang is hun reactie op het menselijke T-cel-oppervlakte-eiwit Tp50 ...
Maatwerk / Aanbevelingen
- 35.1Cell line€700.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
- 35.1 zijn hybridomacellen afgeleid van een Mus musculus B-cel en myeloom. Van bijzonder belang is hun reactiviteit op het menselijke T-cel-oppervlakte-eiwit Tp50 (CD2), waardoor ze waardevolle hulpmiddelen zijn voor gericht onderzoek. Het antilichaam dat wordt geproduceerd door 35.1 cellen remt de proliferatieve respons en cytotoxiciteit van T-cellen zonder te interfereren met de door antilichamen gemedieerde cellulaire cytotoxiciteit. 35.1 cellen zijn afgeleid van de fusie van miltcellen met NSI/1 myeloomcellen en brengen genen tot expressie voor de productie van immunoglobulinen, met name monoklonale antilichamen tegen humaan CD2. Het isotype van het antilichaam is IgG2a.
- Weefsel
- Milt (van B-cellen afkomstig) / Beenmerg (fusiepartner van NSI/1-myeloom)
- Ziekte
- Hybridoma (fusie van B-cel en myeloom); produceert monoklonaal antilichaam tegen menselijk CD2 (Tp50)
- Plaats van uitzaaiingen
- Niet van toepassing (hybridomacellijn; geen primair tumormonster)
- Toepassingen
- Productie van monoklonale antilichamen (anti-menselijk CD2, IgG2a); onderzoek naar T-celbiologie; onderzoek naar CD2-gemedieerde activering en proliferatie van T-cellen; immunologische testen waarbij CD2-blokkade vereist is; onderzoek naar cytotoxiciteit; hybridoma-technologie
- Synoniemen
- HB-222
02Classificatie
- Organisme
- Muis
- Seks
- Niet gespecificeerd
- Groei-eigenschappen
- Ophanging
- GGO-status
- GMO-S1
- Details over de GGO-status
- GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioveiligheidsniveau
- 2
03Kenmerken
- Morfologie
- Lymfoblast
- Celtype
- B-lymfoblasten / hybridomacellen
- Verdubbelingstijd
- ongeveer 24 tot 36 uur
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- 1
- NCBI-belastingnummer
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_7239
05Expressie en vatbaarheid
- Eiwit-expressie
- Immunoglobuline, monoklonaal antilichaam, tegen humaan CD2
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Voeg aan het medium 10% FBS en 0,05 mM 2-mercaptoethanol toe
- Dissociatiereagens
- Geen
- Heruitplanten
- Homogeniseer de celsuspensie in de kolf voorzichtig door op en neer te pipetteren en neem vervolgens een representatief monster om de celdichtheid per ml te bepalen. Verdun de suspensie tot een celconcentratie van 1 x 105 cellen/ml met vers kweekmedium en verdeel de aangepaste suspensie in nieuwe kolven voor verdere kweek.
- Splitsingsverhouding
- 1 tot en met 5
- Zaaidichtheid
- 1 tot 5 × 10⁵ cellen/ml
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Herstel na ontdooiing
- Centrifugeer de cellen na het ontdooien gedurende 5 minuten bij 300×g, verwijder het supernatant dat het cryoprotectant bevat en breng de cellen opnieuw in suspensie in vers, voorverwarmd compleet medium met een concentratie van 1 × 10⁵ cellen/ml. Geef de cellen ten minste 24–48 uur de tijd om te herstellen en zich te vermenigvuldigen vóór de eerste passagestap.
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Soort / ondersoort
- BALB/c (met NSI/1-myeloomachtergrond)
- Leeftijd van de donor
- Leeftijd onbepaald
- Etnische afkomst
- Niet van toepassing (muizencellijn)
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja