- Tessuto
- Milza (di origine delle cellule B) / Midollo osseo (partner di fusione del mieloma NSI/1)
- Malattia
- Ibridoma (fusione tra cellula B e mieloma); produce un anticorpo monoclonale contro il CD2 umano (Tp50)
- Sito metastatico
- Non applicabile (linea cellulare di ibridoma; non si tratta di un campione di tumore primario)
- Sinonimi
- HB-222
Documenti
35.1
Cell line · Codice prodotto 305002
35.1 sono cellule ibridoma derivate da una cellula B di Mus musculus e da un mieloma. Di particolare interesse è la loro reattività alla proteina di superficie delle cellule T umane Tp50 ...
Personalizzazione / Suggerimenti
- 35.1Cell line€700.00
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01Informazioni generali
- Descrizione
- 35.1 sono cellule di ibridoma derivate da cellule B e mieloma di Musculus. Di particolare interesse è la loro reattività alla proteina di superficie delle cellule T umane Tp50 (CD2), che le rende strumenti preziosi per la ricerca mirata. L'anticorpo prodotto dalle cellule 35.1 inibisce le risposte proliferative e la citotossicità delle cellule T senza interferire con la citotossicità cellulare mediata dagli anticorpi. Derivate dalla fusione di cellule della milza con cellule di mieloma NSI/1, le cellule 35.1 esprimono geni per la produzione di immunoglobuline, in particolare anticorpi monoclonali contro il CD2 umano. L'isotipo dell'anticorpo è IgG2a.
- Tessuto
- Milza (di origine delle cellule B) / Midollo osseo (partner di fusione del mieloma NSI/1)
- Malattia
- Ibridoma (fusione tra cellula B e mieloma); produce un anticorpo monoclonale contro il CD2 umano (Tp50)
- Sito metastatico
- Non applicabile (linea cellulare di ibridoma; non si tratta di un campione di tumore primario)
- Applicazioni
- Produzione di anticorpi monoclonali (anti-CD2 umano, IgG2a); ricerca sulla biologia delle cellule T; studi sull’attivazione e la proliferazione delle cellule T mediate dal CD2; test immunologici che richiedono il blocco del CD2; ricerca sulla citotossicità; tecnologia degli ibridomi
- Sinonimi
- HB-222
02Classificazione
- Organismo
- Mouse
- Sesso
- Non specificato
- Proprietà di crescita
- Sospensione
- Presenza di OGM
- GMO-S1
- Dettagli sullo stato degli OGM
- GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Livello di biosicurezza
- 2
03Caratteristiche
- Morfologia
- Linfoblasto
- Tipo di cellula
- Cellule linfoblastiche B / cellule di ibridoma
- Tempo di raddoppio
- circa da 24 a 36 ore
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- 1
- Codice fiscale NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_7239
05Espressione e suscettibilità
- Espressione proteica
- Immunoglobulina, anticorpo monoclonale, contro CD2 umano
06Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Aggiungere al terreno di coltura il 10% di FBS e 0,05 mM di 2-mercaptoetanolo
- Reagente di dissociazione
- Nessuno
- Subcoltura
- Omogeneizzare delicatamente la sospensione cellulare nel pallone pipettando verso l'alto e verso il basso, quindi prelevare un campione rappresentativo per determinare la densità cellulare per ml. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione cellulare di 1 x 105 cellule/ml con terreno di coltura fresco e aliquotare la sospensione regolata in nuovi palloni per l'ulteriore coltivazione.
- Rapporto di frazionamento
- Da 1 a 5
- Densità di semina
- da 1 a 5 × 10⁵ cellule/ml
- Rinnovo dei fluidi
- da 2 a 3 volte alla settimana
- Recupero post-scongelamento
- Dopo lo scongelamento, centrifugare le cellule a 300×g per 5 minuti, rimuovere il surnatante contenente il crioprotettore e risospendere in terreno di coltura completo fresco e preriscaldato a una concentrazione di 1 × 10⁵ cellule/ml. Lasciare trascorrere almeno 24–48 ore per il recupero e l’espansione prima della prima fase di passaggio.
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
08Donatore
- Razza / sottospecie
- BALB/c (con background di mieloma NSI/1)
- Età dei donatori
- Età non specificata
- Etnia
- Non applicabile (linea cellulare di topo)
09Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì