Mine otse sisu juurde
35,1
Kude
Põrn (B-rakkude päritolu) / Luuüdi (NSI/1-müeloomi fusioonipartner)
Haigus
Hübriidoma (B-rakk × müeloomi fusioon); toodab inimese CD2-vastast monoklonaalset antikeha (Tp50)
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (hübriidoma rakuliin; ei ole esmane kasvajaproov)
Sünonüümid
HB-222

Dokumendid

35,1

Cell line · Toote number 305002

35.1 on hübriidrakkudest saadud rakud, mis pärinevad Mus musculus’e B-rakkudest ja müeloomist. Erilist huvi pakub nende reaktsioon inimese T-raku pinnavalgu Tp50 suhtes ...

€700.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus
35.1 on Mus musculus B-rakkudest ja müeloomist saadud hübriidrakud. Erilist huvi pakub nende reaktiivsus inimese T-rakkude pinnavalgu Tp50 (CD2) suhtes, mis muudab nad väärtuslikuks vahendiks sihtotstarbelistes uuringutes. Rakkude 35.1 toodetud antikeha pärsib T-rakkude proliferatiivset reaktsiooni ja tsütotoksilisust, ilma et see häiriks antikehade poolt vahendatud rakkude tsütotoksilisust. 35.1 rakud, mis on saadud põrna rakkude ja NSI/1 müeloomirakkude fusioonist, ekspresseerivad immunoglobuliini tootmise geene, eriti inimese CD2 vastu suunatud monoklonaalseid antikehi. Antikeha isotüüp on IgG2a.
Kude
Põrn (B-rakkude päritolu) / Luuüdi (NSI/1-müeloomi fusioonipartner)
Haigus
Hübriidoma (B-rakk × müeloomi fusioon); toodab inimese CD2-vastast monoklonaalset antikeha (Tp50)
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (hübriidoma rakuliin; ei ole esmane kasvajaproov)
Rakendused
Monoklonaalsete antikehade tootmine (anti-inimese CD2, IgG2a); T-rakkude bioloogia alased uuringud; CD2-vahendatud T-rakkude aktiveerimise ja proliferatsiooni uuringud; CD2 blokeerimist nõudvad immunoloogilised analüüsid; tsütotoksilisuse uuringud; hübriidoma tehnoloogia
Sünonüümid
  • HB-222

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Vedrustus
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This hybridoma contains rearranged immunoglobulin genes from a B cell-myeloma fusion. IgG2a heavy and light chain genes are expressed from the B cell fusion partner. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Lümfoblastid
Rakutüüp
B-lümfoblastid / hübriidrakkud
Kahekordistumisaeg
umbes 24–36 tundi

04Tunnused

Viide
1
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_7239

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Immunoglobuliin, monoklonaalne antikeha, inimese CD2 vastu

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Lisage kasvukeskkonnale 10% FBS-i ja 0,05 mM 2-merkaptoetanooli
Dissotsiatsioonireaktiiv
Puudub
Kultuuri edasikasvatamine
Homogeniseerige kolvis olev rakususpensioon õrnalt pipeteerides üles-alla, seejärel võtke representatiivne proov, et määrata rakkude tihedus ml kohta. Lahjendage suspensiooni värske kultuurikeskkonnaga, et saavutada rakkude kontsentratsioon 1 x 105 rakku/ml, ja jaotage reguleeritud suspensioon uute kolvide vahel edasiseks kasvatamiseks.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
1 kuni 5 × 10⁵ rakku/ml
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist tsentrifuugige rakke 300×g juures 5 minutit, eemaldage krüoprotektiivi sisaldav supernatant ja suspendeerige rakud uuesti värskes, eelsoojendatud täiskeskkonnas kontsentratsiooniga 1 × 10⁵ rakku/ml. Enne esimest passaaži laske rakkudel taastuda ja paljuneda vähemalt 24–48 tundi.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/c (NSI/1-müeloomi taust)
Doonori vanus
Täpsustamata vanus
Etniline kuuluvus
Ei kohaldata (hiire rakuliin)