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Accutase Cell Detachment Solution - 100 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€75.00

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Accutase Cell Detachment Solution - 500 ml

€310.00

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Cytion Endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850006

高度な内皮細胞増殖培地

「Advanced Endothelial Cell Growth Medium」は、大血管由来のヒト内皮細胞の培養に使用されます。VEGFやLong R3 IGF-1を含む、定義済みのヒト組換え成長因子が、粗製内皮細胞増殖補液に代わって配合されています。本完全培地には、胎児牛血清、L-グルタミン、ヘパリン、EGF、bFGF、VEGF、Long R3 IGF-1、アスコルビン酸、およびヒドロコルチゾンが含まれています。血清濃度を高めてより迅速な増殖を図る場合は、「内皮細胞増殖培地」をお選びください。 VEGFを含まない配合をご希望の場合は、「内皮細胞増殖培地」をお選びください。本培地は、500 mlの基礎培地として、単独で、あるいは補足成分と組み合わせて、個々の成分として、またはあらかじめ混合された「サプリメントミックス」としてご提供しています。個々の成分を使用すれば、特定の因子を調整したり除外したりできますが、「サプリメント・ミックス」は1ステップで添加できます。また、ベース培地にはフェノールレッドを含まないタイプも同様の形式で用意されており、蛍光測定や比色測定への干渉、およびフェノールレッドの弱いエストロゲン様活性を回避できます。使用にはサプリメントが必要であり、両方のサプリメント形式も個別に購入可能です。サプリメントを添加した後の完成培地には、2 %のFCS（基礎培地500 mlあたり10 ml）が含まれます。

€180.00

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Cytion Microvascular endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850019

高度な微小血管内皮細胞増殖培地

「Advanced Microvascular Endothelial Cell Growth Medium」は、真皮、肺、心臓など由来のヒト微小血管内皮細胞の培養に使用されます。定義済みのヒト組換え成長因子が、粗製内皮細胞増殖補足剤に代わって配合されています。本完全培地には、胎児牛血清、L-グルタミン、EGF、bFGF、VEGF、Long R3 IGF-1、アスコルビン酸、およびヒドロコルチゾンが含まれています。ECGS/Hを含み、VEGFを含まない配合をご希望の場合は、「微小血管内皮細胞増殖培地」をお選びください。本培地は、500 mlの基礎培地として、単独で、あるいは補足成分と組み合わせて、個々の成分として、またはあらかじめ混合された「サプリメントミックス」として提供しています。個々の成分を使用すれば、個々の因子の量を調整したり、除外したりすることが可能ですが、サプリメントミックスを使用すれば、1ステップで添加できます。基質培地は、フェノールレッドを含まないものについても同様の形式で提供されており、これにより蛍光測定や比色測定への干渉、およびフェノールレッドの弱いエストロゲン様活性を回避できます。使用にはサプリメントが必要であり、両方のサプリメント形式も個別に購入可能です。補液を加えた後の完全培地には、5％のFCS（基礎培地500 mlあたり25 ml）が含まれます。

€200.00

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Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

Volume: 100 ml Storage: ≤-15°C Sterility: Sterile-filtered Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) is a sterile, ready-to-use concentrate designed to reduce microbial contamination risks in cell culture and related laboratory applications. This 100x solution contains a well-established combination of penicillin, streptomycin, and amphotericin B—providing broad-spectrum antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeasts, and filamentous fungi. The formulation is suitable for use in eukaryotic cell cultures, bacterial media, and other contamination-sensitive systems, supporting clean and consistent lab operations. Application and Benefits Optimized for routine research protocols, this solution is widely used to maintain aseptic conditions in cell culture workflows. It offers reliable performance in contamination-sensitive environments, helping researchers reduce the risk of microbial overgrowth without compromising cell health or experimental reproducibility. The sterile-filtered formulation eliminates the need for additional solubilization steps, supporting streamlined media preparation and reducing variability in daily lab procedures. Usage and Compatibility To achieve standard working concentrations, dilute the solution 1:100 into your complete culture medium. The product is compatible with a broad range of mammalian cell lines and basal media. With consistent stock availability, researchers benefit from dependable supply continuity and simplified logistics planning. The solution should be stored at ≤ –15 °C and protected from repeated freeze-thaw cycles to maintain stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€45.00

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Cytion Chondrocyte growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850048

軟骨細胞培養培地

軟骨細胞増殖培地は、ヒトおよびウシの軟骨細胞の単層培養の拡大、例えばペレット培養やスキャフォールド培養への移殖前などに使用されます。当社では、この培地を500 mlの基礎培地として、単体で、あるいは補足成分と組み合わせて、個別の成分として、またはあらかじめ混合された「サプリメントミックス」として提供しています。個々の成分を使用すれば、特定の因子を調整したり除外したりすることが可能ですが、サプリメントミックスを使用すれば、1ステップで添加できます。また、ベース培地にはフェノールレッドを含まないタイプも同様の形式で用意されており、これにより蛍光測定や比色測定への干渉、およびフェノールレッドの弱いエストロゲン様活性を回避できます。使用にはサプリメントが必要であり、両方のサプリメント形式も個別に購入可能です。サプリメントを添加した後の完成培地には、10 %のFCS（基礎培地500 mlあたり50 ml）が含まれます。

€310.00

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Cytion Defined fibroblast growth medium-maintenance, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850143

定義済み線維芽細胞維持培地

「Defined Fibroblast Maintenance Medium」は、血清を含まない完全定義培地であり、ヒト線維芽細胞の急速な増殖を促すのではなく、安定した状態を維持します。血清が干渉してしまうセクレトーム、細胞外マトリックス、および化合物の試験に適しています。この完全培地には、L-グルタミン、ヒト組換えbFGF、およびヒト組換えインスリンが含まれています。線維芽細胞の増殖には、「線維芽細胞増殖培地」をお選びください。本培地は、500 mlのベース培地として、単独で、あるいは無血清サプリメントと組み合わせて、個々の成分として、またはあらかじめ混合された「サプリメントミックス」としてご提供しています。個々の成分を使用すれば、特定の因子を調整したり除外したりすることが可能ですが、「サプリメントミックス」は1ステップで添加できます。使用にはサプリメントが必要であり、どちらの形式のサプリメントも個別に購入可能です。

€170.00

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D-Glucose Solution (Dextrose Solution), 250 g/L

Volume: 50 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered D-(+)-Glucose Solution (Dextrose Solution) is a sterile, ready-to-use supplement containing the naturally occurring sugar D-(+)-glucose, a central component of cellular metabolism. Glucose is involved in essential biological processes such as energy production, glycosylation, and the formation of glycans that contribute to cellular structure and function. Application and Benefits This glucose solution is widely used as a supplement in cell culture media and in numerous cellular and molecular biology applications. As a primary carbon and energy source, glucose supports cell growth, proliferation, and metabolic activity. Its involvement in biosynthetic pathways also makes it critical for maintaining normal cellular physiology and experimental consistency. Formulation and Usage The solution is supplied at a high concentration of 250 g/L glucose, allowing flexible dilution into culture media according to experimental requirements. It is sterile-filtered to ensure suitability for contamination-sensitive applications. Store at +2°C to +8°C and handle aseptically to maintain product quality and stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€32.00

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DMEM：ハムズF12（1:1）、重量比：3.1 g/L グルコース、重量比：2.5 mM L-グルタミン、重量比：15 mM HEPES、重量比：0.5 mM ピルビン酸ナトリウム、重量比：1.2 g/L NaHCO₃

DMEM:Ham's F12は、生物学的研究における細胞培養で広く認知され、多用されている基礎培地です。特に胎児牛血清（FBS）を添加した場合、さまざまな哺乳類細胞株の増殖に必要な栄養素の主要な供給源となります。この独自の配合は、ダルベッコ改良型イーグル培地（DMEM）とハムF-12（ハム栄養混合液F-12）を正確な1:1の比率で組み合わせたものです。L-グルタミンの添加により、その組成はさらに強化されています。イーグル最小必須培地（EMEM）に由来するDMEMは、その前身と比較してアミノ酸やビタミンの濃度が高くなっています。対照的に、ハムF-12はハムF-10培地をベースとしており、必須成分を補完するセットを提供します。最適な細胞増殖をサポートするため、DMEM:ハムズF-12に通常5～10％の濃度のFBSを添加するのが一般的です。この添加は、培地に細胞の発達に不可欠な成長ホルモン、脂質、タンパク質が欠けているため必要です。 DMEM:ハムズF12にはpH緩衝系が組み込まれており、pH指示薬であるフェノールレッドが添加されることが多い。DMEM:ハムズF12、あるいは重炭酸塩緩衝系を利用するあらゆる培地で培養される細胞は、適切なpHレベルを維持するために、5～10％のCO₂濃度に制御された環境を必要とする。品質管理 • 無菌ろ過済み保存および有効期限 • +2°C～+8°Cで、光を避けて保管してください。 • 開封後は 4°C で保存し、6～8 週間以内に使用してください。輸送条件 • 周囲温度保管 • +2°C～+8°Cの暗所で冷蔵保存してください。製品の品質が低下するため、凍結や+37°Cへの頻繁な加熱は避けてください。 • 培地を 37°C 以上に加熱したり、電子レンジなどの温度制御できない熱源を使用したりしないでください。 • 培地の一部のみを使用する場合は、必要な量を取り出し、使用前に室温まで温めてください。組成カテゴリー成分濃度 (mg/L) アミノ酸グリシン 18.75 L-アラニン 4.45 L-アルギニン塩酸塩 147.50 L-アスパラギン・水和物 7.50 L-アスパラギン酸 6.65 L-システイン塩酸塩・水和物 17.56 L-シスチン・2HCl 31.29 L-グルタミン酸 7.35 L-グルタミン 365.00 L-ヒスチジン塩酸塩・水和物 31.48 L-イソロイシン 54.47 L-ロイシン 59.05 L-リジン塩酸塩 91.25 L-メチオニン 17.24 L-フェニルアラニン 35.48 L-プロリン 17.25 L-セリン 26.25 L-スレオニン 53.45 L-トリプトファン 9.02 L-チロシン・2Na・2H₂O 55.79 L-バリン 52.85 ビタミン D-ビオチン 0.0035 塩化コリン 8.98 D-パントテン酸カルシウム 2.24 葉酸 2.66 ミオイノシトール 12.60 ニコチンアミド 2.02 ピリドキシン塩酸塩 0.031 ピリドキサール塩酸塩 2.00 リボフラビン 0.219 チアミン塩酸塩 2.17 ビタミンB12 0.68 無機塩 CaCl₂・2H₂O 154.50 CuSO₄・5H₂O 0.0013 Fe(NO₃)₃・9H₂O 0.05 FeSO₄・7H₂O 0.417 KCl 311.80 MgCl₂・6H₂O 61.20 MgSO₄・7H₂O 100.00 NaCl 6996.00 NaHCO₃ 1200.00 Na₂HPO₄ 71.02 NaH₂PO₄・2H₂O 70.87 ZnSO₄・7H₂O 0.432 その他の成分 D-グルコース 3151.00 ヒポキサンチン 2.40 HEPES 3574.50 リノール酸 0.042 リポ酸 0.105 フェノールレッドナトリウム塩 8.63 プトレシン・2・塩酸塩 0.081 ピルビン酸ナトリウム 55.00 チミジン 0.365

€25.00

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DMEM、重量比：4.5 g/L グルコース、重量比：4 mM L-グルタミン、重量比：3.7 g/L NaHCO₃、重量比：1.0 mM ピルビン酸ナトリウム

DMEM（ダルベッコ改変イーグル培地）は、生物学研究において多種多様な哺乳類細胞の増殖をサポートするように設計された、汎用性が高く広く利用されている基礎培地です。これは、初代線維芽細胞、ニューロン、グリア細胞、HUVEC、平滑筋細胞、さらにはHeLa、293、Cos-7、PC-12などの一般的な細胞株を培養するための理想的な培地として機能します。 DMEMが他の培地と一線を画すのは、その独自の組成にあります。オリジナルのイーグル最小必須培地（Eagle's Minimal Essential Medium）と比較して、アミノ酸およびビタミンの濃度が4倍にも増加しています。当初は低グルコース（1 g/L）およびピルビン酸ナトリウムを含有して開発されましたが、現在ではピルビン酸ナトリウムの有無にかかわらず、より高いグルコース濃度で用いられることが多くあります。特に、DMEMにはタンパク質、脂質、成長因子が含まれていないため、これらの補充が必要となります。最適な増殖を実現するための一般的な手法として、DMEMに10％の胎児牛血清（FBS）を添加することが挙げられます。さらに、DMEMは重炭酸ナトリウム緩衝系を採用しているため、生理的pHを維持するには5～10％のCO₂環境が必要となります。ダルベッコ改変イーグル培地（DMEM）は、細胞および組織培養用の定義培地の中で高く評価されており、さまざまな付着性細胞の表現型の増殖ニーズに対応しています。これは、1950年代にニワトリ細胞の培養のために開発されたオリジナルのイーグル培地を、「ダルベッコの改良」として知られる強化された添加処方を用いて凌駕するものです。この改良により、特定のアミノ酸やビタミンの含有量が、オリジナルの培地に比べて最大4倍まで大幅に増加しています。細胞培養の分野において、DMEMは初代細胞、幹細胞、形質転換細胞など、さまざまな細胞タイプの増殖培地として重要な役割を果たしています。また、研究者たちは、創薬、組織工学、細胞シグナル伝達経路の研究など、幅広い研究用途にDMEMの改良版を活用しています。品質管理 • 無菌ろ過済み保存および有効期限 • +2°C～+8°Cで、光を避けて保存してください。 • 開封後は4°Cで保存し、6～8週間以内に使用してください。輸送条件 • 周囲温度保管 • +2°C～+8°Cの暗所で冷蔵保存してください。製品の品質が低下するため、凍結や+37°Cへの頻繁な加熱は避けてください。 • 培地を 37°C 以上に加熱したり、電子レンジなどの制御不能な熱源を使用したりしないでください。 • 培地の一部のみを使用する場合は、必要な量を取り出し、使用前に室温まで温めてください。組成カテゴリー成分濃度 (mg/L) アミノ酸グリシン 30.00 L-アルギニン塩酸塩 84.00 L-シスチン二塩酸塩 62.57 L-グルタミン 584.00 L-ヒスチジン塩酸塩・水和物 42.00 L-イソロイシン 105.00 L-ロイシン 105.00 L-リジン塩酸塩 146.00 L-メチオニン 30.00 L-フェニルアラニン 66.00 L-セリン 42.00 L-スレオニン 95.00 L-トリプトファン 16.00 L-チロシン・2Na・2H₂O 103.79 L-バリン 94.00 ビタミン塩化コリン 4.00 D-パントテン酸カルシウム 4.00 葉酸 4.00 ミオイノシトール 7.20 ニコチンアミド 4.00 ピリドキサール塩酸塩 4.00 リボフラビン 0.40 チアミン塩酸塩 4.00 無機塩 CaCl₂・2H₂O 265.00 Fe(NO₃)₃・9H₂O 0.10 KCl 400.00 MgSO₄・7H₂O 200.10 NaCl 6400.00 NaHCO₃ 3700.00 NaH₂PO₄・2H₂O 141.73 その他の成分 D-グルコース 4500.00 フェノールレッドナトリウム塩 15.90 ピルビン酸ナトリウム 110.00

€25.00

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EMEM（MEM Eagle）、w: 2 mM L-グルタミン、w: 2.2 g/L NaHCO3、w: EBSS

イーグル最小必須培地（EMEM）は、幅広い哺乳類細胞、特に付着性細胞株の培養において、最も広く使用されている基礎培地の一つです。ハリー・イーグルによって最初に開発されたこの古典的な配合には、標準的な培養条件下で初代細胞および確立された細胞株の増殖を維持するために必要な必須アミノ酸、ビタミン、無機塩が含まれています。この即用型の無菌ろ過済み液体製剤には、アール平衡塩溶液（EBSS）、 2 mM L-グルタミン、D-グルコース（1.0 g/L）、および2.2 g/Lの炭酸水素ナトリウム（NaHCO₃）が添加されており、CO₂制御インキュベーター環境（通常5 % CO₂）での使用に適しています。配合されているフェノールレッドはpH指示薬として機能し、細胞培養中の培地状態を視覚的に簡単に確認することができます。主な特徴 • Earle’s Balanced Salt Solution（EBSS）を配合した、従来のEagle’s MEM処方 • 2 mM L-グルタミンが含まれており、すぐに使用可能 • 2.2 g/L の重炭酸ナトリウム – 5 % CO2 インキュベーション用に緩衝処理済み • 主たる炭素源としてD-グルコース（1.0 g/L）を含有 • pH指示薬としてフェノールレッドを配合 • HEPESおよびピルビン酸ナトリウムは含まれていません • 滅菌ろ過済みの液体培地、すぐに使用可能 • pH 7.0～7.6 代表的な用途 EMEMは、HeLa、HEK 293、Vero、MRC-5、L-929、BHK-21、および多くの初代細胞を含む、多種多様な哺乳類細胞株の培養をサポートします。一般的な用途には以下が含まれます： • 付着性細胞株の日常的な維持および増殖 • ウイルスの増殖およびワクチン製造ワークフロー • 細胞毒性試験およびバイオアッセイ • トランスフェクションおよびタンパク質発現に関する研究 • 細胞生物学および分子生物学における基礎研究最適な細胞増殖のため、EMEMには通常、5～10 %の胎児牛血清（FBS）が添加され、細胞株によっては、非必須アミノ酸（NEAA）やペニシリン／ストレプトマイシンなどの抗生物質も添加されます。取り扱いおよび保存未開封のボトルは、+2 °C～+8 °Cで、光を避けて保管してください。開封後は、無菌条件下で使用してください。溶液中のL-グルタミンは徐々に分解されるため、最適な性能を得るには開封後4週間以内に培地を使用するか、長期間保存する場合は使用前に新鮮なL-グルタミンを補充することを推奨します。細胞に添加する前に、培地を37 °Cまで温めてください。品質厳格な品質基準に基づいて製造されています。各ロットについて、無菌性、pH、浸透圧、およびエンドトキシンレベルを検査し、細胞培養用途において一貫した性能を確保しています。製品仕様仕様詳細製品タイプMEM 製品カテゴリ細胞培養培地形態液体滅菌済みはいサイズ500 ml L-グルタミンL-グルタミン（2 mM）配合グルコースグルコース配合（1.0 g/L）重炭酸ナトリウムNaHCO3 含有 (2.2 g/L) HEPESHEPES不含ピルビン酸ナトリウムピルビン酸ナトリウムなしフェノールレッドフェノールレッドを含む塩溶液アール平衡塩溶液（EBSS） pH7.0 ～ 7.6 エンドトキシン含有量未指定保存条件+2 °C ～ +8 °C 製剤（1リットルあたりの組成）

€25.00

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Cytion Endothelial cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850176

内皮細胞増殖培地

「内皮細胞増殖培地」は、臍静脈、臍動脈、伏在静脈、大動脈などの大血管由来のヒト内皮細胞の培養に用いられる標準培地です。本完全培地には、胎児牛血清、L-グルタミン、ECGS/H（ヘパリン含有内皮細胞増殖補足剤）、EGF、bFGF、およびヒドロコルチゾンが含まれています。ECGS/Hの代わりにVEGFを含む定義済み組換え増殖因子をご希望の場合は、「アドバンスト内皮細胞増殖培地」をお選びください。本培地は、500 mlのベース培地として、単独で、あるいは補足成分と組み合わせて、個別の成分として、またはあらかじめ混合された「サプリメントミックス」として提供しています。個別の成分を使用すれば、個々の因子の量を調整したり、除外したりすることが可能ですが、サプリメントミックスを使用すれば、1ステップで添加できます。基質培地は、フェノールレッドを含まないタイプも同様の形式で用意されており、これにより蛍光測定や比色測定への干渉、およびフェノールレッドの弱いエストロゲン様活性を回避できます。使用にはサプリメントが必要であり、両方のサプリメント形式も個別に購入可能です。補液を加えた後の完全培地には、2 %のFCS（基礎培地500 mlあたり10 ml）が含まれます。

€200.00

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Cytion Endothelial cell proliferation medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850002

内皮細胞増殖培地

内皮細胞増殖培地は、臍静脈、臍動脈、伏在静脈、大動脈、冠動脈、肺動脈などの大血管由来のヒト内皮細胞を迅速に増殖させるために設計されています。本完全培地には、胎児牛血清、L-グルタミン、ヘパリン、EGF、bFGF、VEGF、Long R3 IGF-1、アスコルビン酸、およびヒドロコルチゾンが含まれています。血清含有量を低くしたい場合は、「アドバンスト内皮細胞増殖培地」をお選びください。本培地は、500 mlのベース培地として、単独で、あるいは補足成分と組み合わせて、個別の成分として、またはあらかじめ混合された「サプリメントミックス」として提供しています。個別の成分を使用すれば、個々の因子の量を調整したり、除外したりすることが可能ですが、「サプリメントミックス」は1ステップで添加できます。ベース培地は、フェノールレッドを含まないタイプも同様の形式で用意されており、これにより蛍光測定や比色測定への干渉、およびフェノールレッドの弱いエストロゲン様活性を回避できます。使用にはサプリメントが必要であり、両方のサプリメント形式も個別に購入可能です。補液を加えた後の完全培地には、7 %のFCS（基礎培地500 mlあたり35 ml）が含まれます。

€170.00

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500 ml bottle Fetal Bovine Serum South America Origin (FBS)

FBS 南米 500ml

南米の牛由来のこの無菌ろ過済み胎児牛血清（FBS）は、安定した細胞培養性能を発揮します。出荷前に、すべてのロットについて無菌性、マイコプラズマ、および牛ウイルスの検査が行われます。さらに、各ロットについて、HEK293細胞およびCHO細胞の増殖を支持する能力が評価されています。本血清は50 mLおよび500 mLの容量で提供されており、ご要望に応じてロットごとの分析証明書（CoA）を発行いたします。

€310.00

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50 ml bottle Fetal Bovine Serum South America Origin (FBS)

FBS サウス・オリジン 50ml

€32.00

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FBS US 500 ml

米国産であるこの無菌ろ過済みウシ胎児血清（FBS）は、細胞培養用途において安定した基盤を提供します。すべてのロットについて、無菌性、マイコプラズマ、およびウシウイルスに関する品質管理検査が実施されています。さらに、各ロットは、CHOおよびHEK293細胞株の増殖を支持する能力を確認するために、生物学的検証が行われています。本血清は50 mLおよび500 mLの容量で包装されています。バッチごとの分析証明書（CoA）は、ご要望に応じてご提供いたします。

€506.00

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500 ml bottle Fetal Bovine Serum US Origin (FBS)

FBS US Origin 50ml

€52.00

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Cytion Fibroblast growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850066

線維芽細胞増殖培地

線維芽細胞増殖培地は、真皮や歯肉などに由来するヒト線維芽細胞の培養に使用されます。所定の条件下で無血清培養を行う場合は、「定義済み線維芽細胞維持培地」をお選びください。本培地は、500 mlのベース培地として、単体または補足成分と組み合わせて、個別の成分として、あるいはあらかじめ混合された「サプリメントミックス」としてご提供しています。個別の成分を使用すれば、個々の因子を調整したり省略したりすることが可能ですが、サプリメントミックスを使用すれば、1ステップで添加できます。ベース培地は、フェノールレッドを含まないタイプも同様の形式で用意されており、これにより蛍光測定や比色測定への干渉、およびフェノールレッドの弱いエストロゲン様活性を回避できます。使用にはサプリメントが必要であり、両方のサプリメント形式も個別に購入可能です。補液を加えた後の完全培地には、10 %のFCS（基礎培地500 mlあたり50 ml）が含まれます。

€180.00

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凍結培地 CM-1 - 100 ml

Cytion社の「Freeze Medium CM-1」は、解凍後の細胞の生存率と機能性を最高レベルで確保するよう設計された、最先端の凍結保存培地です。この汎用性の高い培地は、ヒト細胞や動物細胞を含む幅広い種類の細胞に適しており、多様な研究用途において不可欠なツールとなっています。凍結保護剤と必須栄養素を綿密にバランスよく配合した「Freeze Medium CM-1」は、凍結プロセス中の氷結晶の形成と細胞へのストレスを最小限に抑え、細胞の完全性を維持します。 Freeze Medium CM-1の主な特徴は以下の通りです： • 幅広い互換性：初代細胞、幹細胞、確立された細胞株など、幅広い細胞タイプに有効です。 • 高い生存率：解凍後の細胞回収率と生存率を最大化するように最適化されており、信頼性の高い実験結果を保証します。 • 即用型：すぐに使用できるよう調製・滅菌済みであり、準備時間の短縮と汚染リスクの低減を実現します。 • 安定性の向上：標準的な凍結保存条件下で一貫した性能を維持し、再現性の高い結果を保証します。 • 長期保存性：CM-1は血清含有の即用型凍結保存培地であり、冷蔵庫で最長1年間保存可能です。細胞の凍結にCM-1を使用する場合付着細胞および浮遊細胞の両方を凍結するためにCM-1を使用する場合は、以下の手順に従ってください： • 付着細胞の場合は、洗浄を行い、培養基質から細胞を剥離させます。浮遊細胞の場合は、次の手順に直接進んでください。 • 細胞数を計数し、適切な濃度であることを確認します。 • 細胞を遠心分離してペレット化し、CM-1凍結培地に再懸濁します。 • 再懸濁した細胞をクライオバイアルに移します。 • 細胞を長期保存に移す前に、緩慢凍結法を用いてください。方法説明手順 ❄️ 手動凍結細胞の生存率を確保するために、温度を徐々に下げていく段階的な方法。 1️⃣ 凍結培地に入れた細胞を、4°Cの冷凍庫に40分間入れます。 2️⃣ -80°Cの冷凍庫に移し、24時間保管します。 3️⃣ 長期保存のため、細胞を液体窒素で保存します。 ❄️ Mr. Frostyの使用電源を必要とせず、凍結速度を制御できる便利な装置です。 1️⃣ 凍結培地を入れたクライオバイアルに細胞を準備します。 2️⃣ クライオバイアルをMr. Frostyの容器に入れます。 3️⃣ 液体窒素に移す前に、-80°Cで24時間保存します。 ❄️ 制御凍結装置サーモフィッシャー社やその他のメーカーが製造する、温度低下を制御するように設計された高精度フリーザーです。 1️⃣ 温度を徐々に下げるよう装置をプログラムします。 2️⃣ 準備した細胞を冷凍庫に入れます。 3️⃣ 凍結サイクル終了後、細胞を液体窒素に移します。 • 長期保存のため、クライオバイアルを-130°C以下の温度、または液体窒素中で保存してください。成分 • FBS、DMSO、グルコース、塩類を含む • 緩衝能：pH = 7.2～7.6 Cytion社の凍結培地CM-1は、凍結保存のための信頼性の高いソリューションを提供し、幅広い研究用途において、解凍後の高い細胞生存率と機能性を確保します。

€99.00

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凍結培地 CM-1 - 50 ml

Cytion社の「Freeze Medium CM-1」は、解凍後の細胞の生存率と機能性を最高レベルで確保するよう設計された、最先端の凍結保存培地です。この汎用性の高い培地は、ヒト細胞や動物細胞を含む幅広い種類の細胞に適しており、多様な研究用途において不可欠なツールとなっています。凍結保護剤と必須栄養素を綿密にバランスよく配合した「Freeze Medium CM-1」は、凍結プロセス中の氷結晶の形成と細胞へのストレスを最小限に抑え、細胞の完全性を維持します。 Freeze Medium CM-1の主な特徴は以下の通りです： • 幅広い互換性：初代細胞、幹細胞、確立された細胞株など、幅広い種類の細胞に有効です。 • 高い生存率：解凍後の細胞回収率と生存率を最大化するように最適化されており、信頼性の高い実験結果を保証します。 • 即用型：すぐに使用できるよう調製・滅菌済みであり、準備時間の短縮と汚染リスクの低減を実現します。 • 安定性の向上：標準的な凍結保存条件下で一貫した性能を維持し、再現性の高い結果を保証します。 • 長期保存性：CM-1は血清含有の即用型凍結保存培地であり、冷蔵庫で最長1年間保存可能です。細胞の凍結にCM-1を使用する場合付着細胞および浮遊細胞の両方を凍結するためにCM-1を使用する場合は、以下の手順に従ってください： • 付着細胞の場合は、洗浄を行い、培養基質から細胞を剥離させてください。浮遊細胞の場合は、次の手順に直接進んでください。 • 細胞数を計数し、適切な濃度であることを確認します。 • 細胞を遠心分離してペレット化し、CM-1凍結培地に再懸濁します。 • 再懸濁した細胞をクライオバイアルに移します。 • 細胞を長期保存に移す前に、緩慢凍結法を用いてください。方法説明手順 ❄️ 手動凍結細胞の生存率を確保するために、温度を徐々に下げていく段階的な方法。 1️⃣ 凍結培地に入れた細胞を、4°Cの冷凍庫に40分間入れます。 2️⃣ -80°Cの冷凍庫に移し、24時間保管します。 3️⃣ 長期保存のため、細胞を液体窒素で保存します。 ❄️ Mr. Frostyの使用電源を必要とせず、凍結速度を制御できる便利な装置です。 1️⃣ 凍結培地を入れたクライオバイアルに細胞を準備します。 2️⃣ クライオバイアルをMr. Frostyの容器に入れます。 3️⃣ 液体窒素に移す前に、-80°Cで24時間保存します。 ❄️ 制御凍結装置サーモフィッシャー社やその他のメーカーが製造する、温度低下を制御するように設計された高精度フリーザーです。 1️⃣ 温度を徐々に下げるよう装置をプログラムします。 2️⃣ 準備した細胞を冷凍庫に入れます。 3️⃣ 凍結サイクル終了後、細胞を液体窒素に移します。 • 長期保存のため、クライオバイアルを-130°C以下の温度、または液体窒素中で保存してください。成分 • FBS、DMSO、グルコース、塩類を含む • 緩衝能：pH = 7.2～7.6 Cytion社の凍結培地CM-1は、凍結保存のための信頼性の高いソリューションを提供し、幅広い研究用途において、解凍後の高い細胞生存率と機能性を確保します。

€59.00

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Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamine, w: 2.0 mM Sodium pyruvate, w: 2.5 g/L NaHCO3

Introducing Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, a specialized modification of Ham's F-12 medium designed to meet the unique requirements of biological research. This advanced medium offers distinct advantages, enhancing the cultivation of primary human hepatocytes, as well as rat and chicken liver cells, particularly in reduced serum conditions. Ham's F-12K (Kaighn's) Medium is carefully formulated to optimize cell culture conditions. It features an enriched composition, providing elevated levels of essential components such as amino acids and sodium pyruvate, as well as additional elements including putrescine, thymidine, hypoxanthine, and zinc. These additions enable researchers to supplement the medium with minimal serum or defined components for specific cell types, facilitating precise experimental conditions. Notably, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium does not contain proteins or growth factors. Consequently, supplementation with growth factors and Fetal Bovine Serum (FBS) is often necessary, allowing researchers to tailor the medium to the requirements of their specific cell lines. For optimal performance, the concentration of FBS must be carefully optimized for each cell line, ensuring optimal growth and functionality. To maintain physiological pH, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium employs a sodium bicarbonate buffer system (2.5 g/L), necessitating a controlled 5-10% CO2 environment during cultivation. This ensures the medium's pH remains within the ideal range for cell growth and viability. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing as well as warming up to +37°C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37°C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium but the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2H2O 135,24 Copper(II) sulfate x 5H2O 0,00 Iron (II) sulfate x 7H2O 0,83 Magnesium chloride x 6H2O 105,72 Magnesium sulfate x 7H2O 394,49 Potassium chloride 283,29 Potassium dihydrogen phosphate 58,52 Sodium chloride 7597,20 di-Sodium hydrogen phosphate anhydrous 115,02 Zinc sulfate x 7H2O 0,14 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 1260,00 Hypoxanthine 4,08 DL-α-Lipoic acid 0,21 Phenol red 3,00 Putrescine x 2HCl 0,32 Sodium pyruvate 220,00 NaHCO3 2500,00 Thymidine 0,73 Amino Acids L-Alanine 17,82 L-Arginine x HCl 421,40 L-Asparagine x H2O 30,02 L-Aspartic acid 26,62 L-Cysteine x HCl x H2O 70,24 L-Glutamine 292,20 L-Glutamic acid 29,42 Glycine 15,01 L-Histidine x HCl x H2O 41,92 L-Isoleucine 7,87 L-Leucine 26,24 L-Lysine x HCl 73,04 L-Methionine 8,95 L-Phenylalanine 9,91 L-Proline 69,06 L-Serine 21,02 L-Threonine 23,82 L-Tryptophan 4,08 L-Tyrosine 10,87 L-Valine 23,42 Vitamins D(+)-Biotin 0,07 D-Calcium pantothenate 0,48 Choline chloride 13,96 Folic acid 1,32 myo-Inositol 18,02 Nicotinamide 0,04 Pyridoxine x HCl 0,06 Riboflavin 0,04 Thiamine x HCl 0,34 Vitamin B12 1,36

€108.00

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ハムズF12ミディアム、w: 1.0 mM 安定型グルタミン、w: 1.0 mM ピルビン酸ナトリウム、w: 1.176 g/L NaHCO3

ハムズF-12培地（ハムズF-12栄養混合培地とも呼ばれる）は、細胞培養用に特別に設計された、広く使用されている基礎培地です。この培地は、チャイニーズハムスター卵巣（CHO）細胞、肺細胞、およびマウスL細胞の無血清単細胞播種に広く用いられています。さらに、ハムズF-12はクローン毒性アッセイ（CTA）に最適な培地でもあります。その顕著な利点の一つは、血清を添加することなく細胞の増殖を維持できることです。これにより、血清成分による潜在的な干渉が排除され、一貫性のある信頼性の高い実験結果が得られます。無血清培養環境を提供することで、ハムズF-12培地は研究者に対し、研究をより厳密に制御する手段を提供します。ハムズF-12培地のもう一つの重要な特徴は、単一細胞播種に適していることです。これにより、CHO細胞、肺細胞、マウスL細胞を含む様々な細胞株にとって優れた選択肢となります。この培地の最適化された栄養成分組成は、個々の細胞の効率的な付着と増殖を促進し、再現性が向上した均一な細胞培養の確立を可能にします。さらに、ハムF-12培地は、クローン毒性アッセイ（CTA）に最適な培地として広く認知されています。このアッセイは、物質が細胞に及ぼす細胞毒性効果を評価する上で極めて重要な役割を果たします。CTAにおいてハムF-12培地を利用することで、研究者は様々な化合物や処理が個々の細胞に与える影響を正確に評価でき、毒性プロファイルに関する貴重な知見を得ることができます。品質管理 • 20～25°C で pH = 7.2 ± 0.02。 • 各ロットについて、無菌性、マイコプラズマおよび細菌の不存在が試験されています。保存 • +2°C～+8°Cの暗所で冷蔵保存してください。凍結および+37°Cまでの加温は、製品の品質を低下させます。 • 培地を 37°C 以上に加熱したり、温度制御ができない熱源（電子レンジなど）を使用したりしないでください。 • 培地の一部のみを使用する場合は、その分だけをボトルから取り出し、室温で温めてください。 • 基本培地を除くすべての培地の保存期間は、製造日から 8 週間です。組成成分 mg/L 無機塩塩化カルシウム・2H₂O 44.00 硫酸銅(II)・5H₂O 0,00 硫酸鉄(II)・7H₂O 0,83 塩化マグネシウム・6H₂O 122,00 塩化カリウム 223,65 塩化ナトリウム 7599,00 無水リン酸水素二ナトリウム 142.04 硫酸亜鉛・7H₂O 0,86 その他の成分 D(+)-グルコース無水物 1801,60 ヒポキサンチン 4,08 リノール酸 0,08 DL-α-リポ酸 0,21 フェノールレッド 1,20 プトレシン・2HCl 0.16 ピルビン酸ナトリウム 110,00 チミジン 0.73 NaHCO₃ 1176,00 アミノ酸 L-アラニン 8,91 L-アルギニン・塩酸塩 210.70 L-アスパラギン × H₂O 15.01 L-アスパラギン酸 13.31 L-システイン × HCl × H₂O 35.12 L-アラニル-L-グルタミン 217,30 L-グルタミン酸 14.71 グリシン 7,51 L-ヒスチジン・塩酸塩・水和物 20.96 L-イソロイシン 3,94 L-ロイシン 13.12 L-リジン・塩酸塩 36.54 L-メチオニン 4.48 L-フェニルアラニン 4.96 L-プロリン 34.53 L-セリン 10.51 L-スレオニン 11.91 L-トリプトファン 2.04 L-チロシン 5,44 L-バリン 11.71 ビタミン D(+)-ビオチン 0,01 D-パントテン酸カルシウム 0,24 塩化コリン 13.96 葉酸 1,32 ミオイノシトール 18,02 ニコチンアミド 0,04 ピリドキシン・塩酸塩 0,06 リボフラビン 0.04 チアミン塩酸塩 0.34 ビタミンB12 1,36

€25.00

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HEPES Buffer Solution (1M)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered HEPES Buffer Solution (1 M), also known as N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic acid, is a zwitterionic organic buffering agent widely used in cell culture media. It is designed to maintain stable pH conditions in the physiological range of 6.7 to 8.6, supporting optimal cellular function during in vitro applications. Application and Benefits HEPES provides reliable buffering capacity in cell culture systems, particularly when cells are handled outside a CO₂ incubator. The addition of 10–25 mM HEPES to culture media offers enhanced pH stability during extended manipulation periods, helping to maintain consistent experimental conditions. This buffer is membrane-impermeable, has minimal interference with biochemical reactions, and demonstrates strong chemical and enzymatic stability. These properties make it suitable for a wide range of cell culture and biochemical applications. Formulation and Usage The solution is supplied as a 1 M concentrate prepared in cell culture–grade water and is sterile-filtered for use in contamination-sensitive environments. It can be diluted to the desired working concentration depending on application requirements. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to preserve product integrity. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

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IMDM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 3.024 g/L NaHCO3

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) is a complex and enriched growth medium for cell culture. IMDM is a modification of DMEM containing selenium and has additional amino acids, vitamins, and inorganic salts compared to DMEM. It lacks iron and requires supplementation with Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM uses a sodium bicarbonate buffer system and requires a 5-10% CO2 environment to maintain physiological pH. IMDM is well suited for rapidly proliferating, high-density cell cultures, including Jurkat, COS-7, and macrophage cells. The various modifications of IMDM available for a range of cell culture applications can be found using the media selector tool. Liquid media provide essential nutrients for all cell culture applications. Each of our high-quality cell culture media is manufactured according to the initially published formula or modifications necessary to the consistent performance and stability of the culture medium. IMDM vs. DMEM IMDM contains potassium nitrate instead of ferric nitrate and HEPES and sodium pyruvate. The additional components in IMDM make it more suitable for specialized cell types and specific applications than DMEM. IMDM vs. RPMI IMDM and RPMI have different formulations that may be relevant for PMA/ionomycin stimulation. One significant difference is the concentration of Ca2+. While RPMI contains 0.42 mM Ca2+, IMDM contains 1.49 mM. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2 H2O 219,00 Potassium chloride 330,00 Potassium nitrate 0.076 Magnesium sulfate anhydrous 97,73 Sodium chloride 4,505.00 Sodium dihydrogen phosphate anhydrous 109,00 Sodium selenite 0,02 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 4,500.00 HEPES 5,958.00 Sodium pyruvate 110,00 Phenol red 15,00 Amino Acids L-Alanine 25,00 L-Arginine x HCl 84,00 L-Asparagine x H2O 25,00 L-Aspartic acid 30,00 L-Cystine x 2HCl 91,24 L-Glutamine 584,00 L-Glutamic acid 75,00 Glycine 30,00 L-Histidine x HCl x H2O 42,00 L-Isoleucine 104,80 L-Leucine 104,80 L-Lysine x HCl 146,20 L-Methionine 30,00 L-Phenylalanine 66,00 L-Proline 40,00 L-Serine 42,00 L-Threonine 95,20 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosine x 2Na 104,20 L-Valine 93,60 Vitamins D(+)-Biotin 0.013 D-Calcium pantothenate 4,00 Choline chloride 4,00 Folic acid 4,00 myo-Inositol 7,20

€25.00

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細胞培養培地：概要

生命科学の分野において、最も重要な手法の一つが細胞培養である。「細胞培養」とは、動物や植物から細胞、組織、あるいは臓器を取り出し、それらの生存および／または増殖に適した人工環境に移植することを指す。細胞が最適に発育するために必要な基本的な環境条件としては、温度管理、細胞が付着するための基質、適切な培養液、そして最適なpHおよび浸透圧を維持するインキュベーターが挙げられます。細胞がその潜在能力を最大限に発揮して増殖するためには、これらの条件が整っている必要があります。

in vitro培養に適した増殖培地の選択は、細胞培養において最も重要かつ不可欠な段階である。培養液（カルチャーメディアとも呼ばれる）とは、微生物、細胞、あるいは植物などのレベルで生物の発育を促進するように調製された液体またはゲル状の物質である。細胞の培養に使用される培養液には、多くの場合、十分なエネルギー源と、細胞周期を制御する物質が含まれている。培養培地の主な成分には、アミノ酸、ビタミン、無機塩、グルコース、および血清が含まれます。血清は、成長因子、ホルモン、および付着因子の供給源として機能するため、培地に添加されます。培地は栄養素を供給するだけでなく、pHや浸透圧レベルの維持にも寄与します。

細胞培養で使用される培地の種類

ヒト細胞も動物細胞も、人工または合成培地、あるいは天然成分を添加した完全な天然培地のいずれでも培養することが可能です。以下では、現在利用可能なさまざまな培地の種類について概要を説明します。

天然培地

天然培地には、自然の状態にある生体液のみが含まれます。天然培地は、多種多様な動物細胞の培養において非常に有用であり、扱いも容易です。天然培地を構成する正確な成分が十分に解明されていないことが、天然培地を用いた実験結果の再現性が低い主な要因となっています。

人工培地

人工培地または合成培地の調製には、栄養素（有機・無機双方）、血清タンパク質、炭水化物、補因子、ビタミン、塩類に加え、O₂およびCO₂の気相成分の添加が含まれます[1]。

以下の機能のうち1つ以上を満たすために、さまざまな種類の人工培地が開発されてきた：1) 即時生存（正確なpHおよび浸透圧を有する平衡塩溶液）。2) 長期生存（さまざまな配合の有機化合物および／または血清を添加した平衡塩溶液）。 3) 無期限の発育。4) 特殊な機能。

人工培地には、以下の4つの明確な分類がある：

血清含有培地

動物細胞の培養に用いられる培地において、最も頻繁に見られる添加物はウシ胎児血清である。これは、可能な限り最良の増殖条件を実現するために、低コストの添加物として培養培地に添加される。血清は、不安定または水に溶けない栄養素、ホルモンや成長因子、プロテアーゼ阻害剤、その他の物質の運搬体やキレート剤として機能するだけでなく、有害な分子を結合・中和する役割も果たします。

無血清培地

培地中に血清が含まれていることには多くの欠点があり、免疫学的研究において解釈上の重大な誤りを引き起こす可能性があります [2, 3]。これまでに、さまざまな無血清培地が開発されてきました [4, 5]。これらの培地は一般的に、特定の細胞種の培養をサポートするように特別に調製されており、例えば、Thermo Fisher Scientific社の「Knockout Serum Replacement」や「Knockout DMEM」、Stem Cell Technologies社の幹細胞用「mTESR培地」などが挙げられる[6][7]。

さらに、これらの培地には、通常は血清によって供給される精製された成長因子、リポタンパク質、その他のタンパク質が、所定の量で配合されている[8]。これらの培地を構成する成分は十分に解明されているため、しばしば「定義済み培養培地」と呼ばれる。

化学的に定義された培地

これらの培地には、いかなる種類の汚染も受けていない超高純度の無機および有機成分が含まれています。また、成長因子などの純粋なタンパク質が添加されている場合もあります。

細菌や酵母の遺伝子改変に加え、特定の脂肪酸、ビタミン、コレステロール、アミノ酸を添加することで、その構成成分が生成される[9]。

無タンパク質培地

無タンパク質培地とは、タンパク質を一切含まず、代わりに非タンパク質成分のみを含む培地のことである。血清を添加した培地と比較して、タンパク質を添加しない培地を使用すると、細胞の増殖とタンパク質の発現が促進され、下流工程で生成される製品の精製が容易になる[10-12]。 MEMやRPMI-1640などの培地には、タンパク質は含まれていない。ただし、必要に応じてタンパク質サプリメントを添加する場合もある。

培養培地とその基本成分

市販の培養培地は粉末または液体の形で購入でき、多くの場合、アミノ酸、グルコース、塩類、ビタミン、その他の栄養補助成分など、様々な栄養素が含まれています。

これらの成分に対する必要量は細胞株ごとに異なり、こうした差異が培地の配合が数多く存在する理由となっている。各成分は特定の機能を担っており、それについては以下の段落で概説する：

緩衝系

最適な増殖条件を維持するためにはpHを制御する必要があり、これは通常、以下の2つの緩衝系のいずれかによって行われます：

天然の緩衝系

大気中のCO₂/H₂CO₃比は培液中のそれと同等であり、これが自然な緩衝メカニズムを生み出しています。この自然な緩衝メカニズムを維持するためには、培養物を5～10％のCO₂を含む空気環境下で保持する必要があり、これは多くの場合、CO₂インキュベーターを使用することで実現されます。天然緩衝系を使用する最大の利点は、その安価さと安全性にあります。

HEPES

双性イオンであるHEPESを用いた化学的緩衝は、pH 7.2～7.4の範囲でより高い緩衝能力を持ち、ガス環境の制御を必要としません。特定の細胞種によっては、HEPESの投与量が多すぎると有害となる場合があります。また、HEPES を含む培地は、蛍光灯による光毒性の影響を受けやすくなります [13]。

フェノールレッド

pH指示薬であるフェノールレッドは、市販の培養培地にしばしば含まれており、pHの継続的なモニタリングを可能にします。細胞が増殖するにつれて、細胞から生成される代謝産物がpHを変化させ、その結果、培地の色が変わります。フェノールレッドは培地の色に二重の効果をもたらし、酸性pHでは黄色に、アルカリ性pHでは紫色に変化する。細胞培養の最適値であるpH 7.4では、培地は蛍光赤色に見える。

しかし、フェノールレッドにはいくつかの欠点がある。第一に、フェノールレッドは、主にエストロゲンをはじめとする多くのステロイドホルモンの作用を模倣する可能性がある[14]。そのため、乳腺組織のようなエストロゲン感受性細胞を研究する際には、フェノールレッドを含まない培地の使用が推奨される。いくつかの無血清培地では、フェノールレッドの存在によりナトリウム・カリウムのバランスが乱される。培地に血清やウシ下垂体ホルモンを添加することで、この影響を打ち消すことができる[15]。第三に、フローサイトメトリー実験における検出が、フェノールレッドの存在によって妨げられる。

無機塩

ナトリウム、カリウム、カルシウムイオンなどの無機塩を含む培地は、浸透圧平衡の維持や膜電位の調節に寄与する。

アミノ酸

アミノ酸はタンパク質の基本構成要素であるため、これまでに考案されたあらゆる細胞培養培地の必須成分となっています。細胞は特定のアミノ酸を自ら生成することができないため、培養培地に必須アミノ酸を含めることが重要です。これらは細胞の増殖に不可欠であり、その濃度によって達成可能な最大細胞密度が決まります。特に、必須アミノ酸であるL-グルタミンは極めて重要です。

L-グルタミンは、代謝のための二次的なエネルギー源として機能し、NAD、NADPH、およびヌクレオチドの生成に窒素を供給します。L-グルタミンは不安定なアミノ酸であり、時間の経過とともに細胞が利用できない形態に変化してしまうため、培地に添加する必要があります。

さらに、増殖過程で消費されたアミノ酸を補充するために、非必須アミノ酸を培地に添加することも可能です。増殖培地に非必須アミノ酸を添加することで、細胞の増殖が促進され、生存率も向上します。

炭水化物

糖類の形態をとる炭水化物は、主要なエネルギー源である。多くの培地には、一般的なグルコースやガラクトースに加え、マルトースやフルクトースも含まれている。

タンパク質およびペプチド

アルブミン、トランスフェリン、フィブロネクチンは、最も一般的に使用されるタンパク質およびペプチドである。これらは、血清を含まない培地において特に重要である。アルブミン、トランスフェリン、アプロチニン、フェトゥイン、フィブロネクチンなどは、タンパク質が豊富に含まれる血清中に見られるタンパク質の一部である。

アルブミンは血液中に存在する主要なタンパク質であり、その機能は、水、塩類、遊離脂肪酸、ホルモン、ビタミンなどの様々な物質を結合させ、異なる臓器や細胞間で輸送することにある。アルブミンには化学物質に結合する能力があるため、細胞培養培地から有害な化合物を除去するための有効な候補となる。

アプロチニンは、中性および酸性のpH条件下で安定しており、高温やタンパク質分解酵素による破壊にも耐性があるため、細胞培養システムにおける保護剤として用いられます。トリプシンをはじめとする多くのセリンプロテアーゼを阻害する能力を持っています。

フェトゥインは、成体の血清と比較して、胎児や新生動物の血清中でより高濃度に検出される可能性のある糖タンパク質である。さらに、セリンプロテアーゼ阻害剤としても作用する。タンパク質であるフィブロネクチンは、細胞接着の過程において不可欠な構成要素である。トランスフェリンは、鉄を輸送し、細胞膜へ鉄を供給する役割を担うタンパク質である。

脂肪酸および脂質

これらは、血清が存在しない無血清培地において極めて重要な役割を果たす。

ビタミン

細胞の発達と増殖には、数多くのビタミンが必要です。ビタミンは細胞内で十分な量が産生できないため、組織培養においては栄養補助剤として不可欠です。

細胞培養において、血清はビタミンの主な供給源ですが、特定の細胞種に適した培地にするために、さまざまなビタミンが添加されることもあります。最も一般的なのは、増殖を促進するためにB群ビタミンが使用されることです。

微量元素

銅、亜鉛、セレン、トリカルボン酸中間体などの化学元素は、微量元素として知られています。微量元素は、血清に通常含まれている成分を補うために、血清を含まない培地に添加されることがよくあります。これらの元素は、健康な細胞の発達に不可欠な重要な化学成分です。酵素活性など、多くの生化学反応は特定の微量栄養素に依存しています。

培地添加剤

特定の細胞株に推奨される完全培養液には、ベースライン培地や血清には含まれていない追加成分が必要です。これらの添加物は、細胞の増殖と適切な代謝機能をサポートします。

ホルモン、成長因子、シグナル伝達分子は特定の細胞株の適切な増殖に不可欠ですが、以下の注意事項を常に遵守する必要があります。添加物の添加により完全培養液の浸透圧が変化し、細胞の発育が阻害される可能性があるため、添加後は必ず浸透圧を確認することが推奨されます。ほとんどの細胞株において、最適な浸透圧は260～320 mOSM/kgの範囲です。

抗生物質

抗生物質は、細菌や真菌による汚染の増殖を抑制するためにしばしば用いられますが [16]、細胞の増殖に必須というわけではありません。抗生物質は、マイコプラズマや耐性菌による汚染を隠してしまう可能性があるため、細胞培養における日常的な使用は推奨されません [17, 18]。

さらに、抗生物質は過敏な細胞の代謝を阻害する可能性がある。MilliporeSigma社およびLife Technologies社製のペニシリン・ストレプトマイシン配合剤が頻繁に使用される。プラズモシンは、グリオーマ細胞株 TS603、TS516、および BT260 の培養に利用されており [19]、マイコプラズマ汚染の除去に有効であることが示されている (20)。

血清

血清には、アルブミン、成長因子、および増殖阻害因子がすべて含まれている。血清は、アミノ酸、タンパク質、ビタミン（特にA、D、E、Kなどの脂溶性ビタミン）、炭水化物、脂質、ホルモン、成長因子、ミネラル、微量元素を供給するため、細胞培養培地の最も重要な成分の一つである。

培養細胞の発育を促進するために、胎児牛由来および子牛由来の血清がしばしば利用される。胎児血清は成長因子を豊富に含んでおり、細胞のクローニングや感受性の高い細胞の培養に適している。一方、子牛血清は増殖促進能力が低いため、接触抑制実験に用いられる。通常の培養液には、多くの場合2％から10％の血清が含まれています。培養液への血清添加には、以下の目的があります[21]：

血清は、細胞に必須の栄養素を供給する（溶液中およびタンパク質に結合した形態の両方）。
血清には、増殖促進や特殊な細胞活動に関与するいくつかの成長因子やホルモンが含まれている。
血清には、アルブミンやトランスフェリンなど、他の化学物質を細胞内に輸送する多くの結合タンパク質が含まれている。例えば、アルブミンは脂肪、ビタミン、ホルモンなどを細胞内に運ぶ。
また、フィブロネクチンなどのタンパク質も提供し、これらは基質への細胞接着を促進する。さらに、分裂前の細胞の拡大を助ける「スプレッディング要素」も生成する。
また、細胞内でのタンパク質分解を防ぐプロテアーゼ阻害剤も供給します。
また、Na+、K+、Zn2+、Fe2+などのミネラルも含まれています。
培地の粘度を高めるため、浮遊培養時の撹拌中に細胞が機械的損傷を受けるのを防ぎます。
また、緩衝剤としての役割も果たします。

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