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매체 및 시약

40 제품

Insulin, Human recombinant, Solution (5 mg/ml)

Volume: 5 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin Human Recombinant Solution is a chemically defined supplement commonly used for the cultivation of mammalian cell lines, including Chinese Hamster Ovary (CHO) cells. This cell culture–grade solution contains recombinant human insulin expressed in Saccharomyces cerevisiae, ensuring high purity and consistent performance in research applications. Application and Benefits Insulin is routinely added to serum-free and chemically defined media to promote cell growth and productivity. As a key regulatory hormone, insulin supports cellular uptake, utilization, and storage of glucose, amino acids, and fatty acids. It also inhibits the breakdown of glycogen, proteins, and lipids, thereby contributing to improved cell viability and metabolic stability in culture systems. The chemically defined formulation supports reproducibility and minimizes variability in sensitive cell culture workflows. Biological Properties and Usage Insulin is a two-chain polypeptide hormone naturally produced by the β-cells of the pancreatic islets. It has a molecular weight of approximately 5,800 Da. The α- and β-chains are linked by two interchain disulfide bonds, and the α-chain contains one intrachain disulfide bond. For cell culture applications, the solution should be handled under aseptic conditions and stored at +2°C to +8°C to maintain stability and performance. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€109.00

세금 및 배송비 별도

Insulin-Transferrin-Selenium (ITS), Solution 100x

Volume: 10 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) Solution (100x) is a chemically defined supplement designed for a wide range of cell culture applications. It is most commonly used as an additive to basal cell culture media to support cell growth under reduced-serum or serum-free conditions. Application and Benefits Our ITS supplement provides essential components required for the optimal performance of serum-free media. By supplementing conventional nutrient media with ITS, the fetal bovine serum (FBS) requirement for the routine maintenance of many cell lines can be significantly reduced. This helps minimize variability associated with serum use while maintaining consistent cell growth and viability. Insulin supports cellular uptake and metabolism of key nutrients, transferrin facilitates iron transport, and selenium contributes to antioxidant defense and enzymatic activity. Together, these components promote balanced cell metabolism and improved reproducibility in defined culture systems. Formulation and Usage Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) is supplied as a 100x concentrated solution in Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) without phenol red. For standard applications, dilute 1:100 into the appropriate basal medium to achieve the recommended working concentration. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to maintain product stability and sterility. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€59.00

세금 및 배송비 별도

McCoys 5A 배지(변형), w: 3.0 g/L 포도당, w: 안정화된 글루타민, w: 2.0 mM 피루브산 나트륨, w: 2.2 g/L NaHCO₃

McCoy의 5A 배지는 1차 세포 배양에서 바이러스의 증식과 복제를 촉진하도록 설계된, 매우 권장되는 특수 배지입니다. 이 배지는 다양한 생물학적 연구 분야에서 탁월한 성능을 발휘하여 큰 주목을 받고 있습니다. 맥코이 5A 배지의 대표적인 응용 분야 중 하나는 인간 대장암 세포주 배양에 활용되는 것입니다. 특히, 류신-풍부 반복 서열을 포함하는 G-단백질 결합 수용체(LGR5) 및 대장암 전이에 있어 이 수용체의 역할에 대한 연구에 사용되어 왔습니다. 이 배지는 HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b, TENN을 포함한 여러 대장암 세포주의 배양에 효과적으로 활용되어, 연구자들이 대장암 전이의 기전을 더 깊이 탐구할 수 있도록 했습니다. 암 연구에서의 응용 외에도, McCoy's 5A 배지는 조골세포 연구에 없어서는 안 될 것으로 입증되었습니다. 표준 세포 배양 배지에서 칼슘 결핍 하이드록시아파타이트의 이온 반응성을 연구하는 연구자들은 이 배지를 이용하여 조골세포를 배양해 왔습니다. 이러한 적용을 통해 조골세포와 칼슘 결핍 하이드록시아파타이트 간의 상호작용을 더 잘 이해할 수 있게 되었으며, 이는 골 연구 분야의 발전에 기여하고 있습니다. 맥코이 5A 배지는 간 종양 세포에 최적의 환경을 제공하기 위해 베이설 이글 배지(Basal Medium Eagle)에 포함된 아미노산을 수정하여 세심하게 조제되었습니다. 이러한 강화된 조제 방식 덕분에 다양한 확립된 세포주뿐만 아니라 1차 세포에도 적합하며, 다양한 연구 환경에서 이 배지의 다용도성과 적용성을 한층 더 높여줍니다. 맥코이 5A 배지는 간 종양 세포를 넘어 생화학적 및 생리학적 효과를 발휘합니다. 이 배지는 골수, 피부, 잇몸, 신장, 대망, 부신, 폐, 비장, 쥐 배아 및 기타 세포 유형의 1차 배양에서 세포 성장을 지원하는 데 성공적으로 활용되어 왔습니다. 이러한 광범위한 적용 범위는 포괄적인 생물학적 연구를 위해 다양한 세포 유형의 성장과 유지를 지원하는 데 있어 맥코이 5A 배지의 폭넓은 유용성을 입증합니다. 조성 이 McCoy's 5A 배지(변형)에는 3.0 g/L의 포도당, 안정화된 글루타민, 2.0 mM의 피루브산 나트륨 및 2.2 g/L의 NaHCO3가 포함되어 있습니다. 품질 관리 • 20-25°C에서 pH = 7.2 ± 0.02. • 각 로트는 무균성 및 마이코플라즈마와 박테리아의 부재에 대해 검사되었습니다. 보관 • 어두운 곳에서 +2°C ~ +8°C로 냉장 보관하십시오. 냉동 및 +37°C까지의 가열은 제품의 품질을 저하시킵니다. • 배지를 37°C 이상으로 가열하거나 제어할 수 없는 열원(예: 전자레인지)을 사용하지 마십시오. • 배지의 일부만 사용할 경우, 병에서 해당 양을 꺼내 실온에서 데워 주십시오. • 기본 배지를 제외한 모든 배지의 유통 기한은 개봉일로부터 6~8주입니다. 성분 성분 mg/L 무기염염화칼슘·2H₂O132.00 황산마그네슘97.67 염화칼륨400.00 염화나트륨6,460.00 인산수소나트륨(무수물)504.00 기타 성분D(+)-글루코스 (무수)3,000.00 글루타티온 (환원형)0.50 육류 펩톤600.00 페놀 레드 나트륨염11.00 아미노산L-알라닌13.36 L-아르기닌 × 염산염42.14 L-아스파라긴 x H₂O45.03 L-아스파르트산19.97 L-시스테인 × HCl × H₂O31.75 L-글루타민 (안정형)219.15 L-글루탐산22.07 글리신7.51 L-히스티딘 × 염산 × 물20.96 L-하이드록시프롤린19.67 L-이소류신39.36 L-류신39.36 L-라이신 × 염산염36.54 L-메티오닌14.92 L-페닐알라닌16.52 L-프롤린17.27 L-세린26.28 L-트레오닌17.87 L-트립토판3.06 L-티로신 디소듐염26.10 L-발린17.57 비타민p-아미노벤조산1.00 아스코르브산0.56 D(+)-비오틴0.20 D-판토텐산 칼슘0.20 콜린 클로라이드5.00 엽산10.00 미오-이노시톨36.00 니코틴아미드0.50 니코틴산0.50 피리독살 염산염0.50 피리독신 염산염0.50 리보플라빈0.20 티아민 염산염0.20 비타민 B122.00

€30.00

세금 및 배송비 별도

배지 199, w: 2.7 mM 안정화된 글루타민, w: 2.2 g/L NaHCO₃, w: EBSS

Medium 199는 1차 이식편 배양을 위해 특별히 고안된 다목적이며 널리 사용되는 세포 배양 배지입니다. 이 포괄적인 배지는 필수 비타민, 아미노산 및 기타 인자들을 결합하여 다양한 세포 유형에 대한 완전히 정의된 영양 공급원을 제공합니다. 특히 비형질전환 세포에 적합하여 생물학적 연구에 있어 매우 귀중한 도구로 활용됩니다. 미디엄 199는 해당 분야에서 다양한 용도로 활용됩니다. 이 배지는 쿠뮬루스-난자 복합체(COC)를 효과적으로 유지하고 난자의 체외 성숙을 지원합니다. 또한, 독일 홀스타인 젖소에서 난자를 채취할 때 흡인 라인을 세척하는 데에도 사용됩니다. 아울러, 배지 199는 쥐 유래 심장 내피 세포 배양을 위한 탁월한 배지 역할을 합니다. 이러한 응용 사례들은 다양한 실험적 요구에 대한 배지 199의 다용도성과 적응성을 입증합니다. 역사 1950년대에 개발된 배지 199는 조직 배양 배지 분야에서 중요한 진전을 가져왔습니다. 이 배지가 도입되기 전에는 많은 배양 배지가 동물 유래 제품과 조직 추출물에 의존했습니다. 그러나 모건(Morgan)과 동료들은 세포 배양을 위한 완전히 정의된 영양원을 개발함으로써 이 분야에 혁명을 일으켰습니다. 비타민, 아미노산 및 기타 인자들을 다양한 조합으로 실험한 결과, 그들은 배지 199가 탁월한 성장 촉진 특성을 지닌다는 사실을 발견했습니다. 품질 관리 • 20-25°C에서 pH = 7.2 ± 0.02. • 각 로트는 무균성 및 마이코플라스마와 박테리아의 부재에 대해 테스트를 거쳤습니다. 보관 • 어두운 곳에서 +2°C ~ +8°C로 냉장 보관하십시오. 냉동 및 +37°C까지의 가열은 제품의 품질을 저하시킵니다. • 배지를 37°C 이상으로 가열하거나 제어할 수 없는 열원(예: 전자레인지)을 사용하지 마십시오. • 배지의 일부만 사용할 경우, 병에서 해당 양을 꺼내 실온에서 데워 주십시오. • 기본 배지를 제외한 모든 배지의 유통 기한은 제조일로부터 8주입니다. 성분 성분 mg/L 무기염 염화칼슘·2H₂O 264,92 질산철(III) x 9H₂O 0,72 황산마그네슘 97,67 염화칼륨 400,00 아세트산나트륨·3H₂O 82,95 염화나트륨 6,800.00 인산이수소나트륨·H₂O 140,00 기타 성분 아데닌 황산염 10.00 AMP 0,20 ATP 1,00 콜레스테롤 0,20 2'-데옥시리보스 0.50 D(+)-포도당 무수물 1,000.00 글루타티온 (적색) 0,05 구아닌 × HCl 0.30 하이포크산틴 0,30 페놀 레드 10,00 D-리보스 0.50 티민 0,30 트윈 80 4.90 우라실 0,30 크산틴 0,30 NaHCO₃ 2,200.00 아미노산 L-알라닌 25.00 L-아르기닌 x HCl 70,00 L-아스파르트산 30,00 L-시스테인 × HCl × H₂O 0,10 L-시스틴 20,00 L-글루타민(안정형) 149,00 L-글루탐산 67,00 글리신 50,00 L-히스티딘 × 염산 × 물 21,88 L-하이드록시프롤린 10,00 L-이소류신 20,00 L-류신 60,00 L-라이신 x 염산염 70,00 L-메티오닌 15,00 L-페닐알라닌 25,00 L-프롤린 40,00 L-세린 25,00 L-트레오닌 30,00 L-트립토판 10,00 L-티로신 40,00 L-발린 25,00 비타민 4-아미노벤조산 0.05 아스코르빈산 0,05 D(+)-비오틴 0,01 칼시페롤 0,10 D-판토텐산 칼슘 0,01 콜린 클로라이드 0.50 엽산 0,01 미오-이노시톨 0.05 메나디온 0,01 니코틴산 0.025 니코틴아미드 0.025 피리독살 x 염산염 0.025 피리독솔 x 염산염 0.025 리보플라빈 0,01 DL-α-토코페롤 인산염 이나트륨염 0,01 티아민 x 염산염 0.01 비타민 A 아세테이트 0,14

€40.00

세금 및 배송비 별도

NCI-H295R 세포 배양 배지

전문적으로 배합된 영양 용액인 첨단 NCI-H295R 세포 배양 배지를 만나보세요. 이 배지는 특수 NCI-H295R 세포를 포함한 포유류 세포주의 성장과 유지를 촉진하기 위해 특별히 설계되었습니다. 이 배지는 딤베코 수정 이글 배지(DMEM)와 햄의 F-12(영양 혼합물 F-12)를 정확한 1:1 비율로 독특하게 배합한 것이 특징이며, 세포 배양의 복잡한 요구 사항을 충족시키기 위해 필수 보충제가 풍부하게 함유되어 있습니다. 탁월한 세포 배양 성능을 위한 강화된 배지 조성 • 보강된 기본 배지: 기본 배지는 DMEM의 높은 아미노산 및 비타민 농도와 햄의 F-12의 다양한 영양소가 결합되어 이미 풍부한 성분을 갖추고 있습니다. 이 강력한 혼합물에 5%의 소 태아 혈청(FBS)을 추가하여 필수적인 성장 인자, 호르몬 및 단백질을 공급합니다. • 맞춤형 첨가제: FBS 외에도 이 배지는 인슐린, 트랜스페린, 소 혈청 알부민, 셀레늄산, 리놀레산 등 필수 보충제로 강화되었습니다. 이러한 첨가물은 특정 세포 요구 사항을 충족시켜 세포 성장, 대사 기능 및 전반적인 건강을 증진시킵니다. • L-글루타민 강화: L-글루타민의 함유는 배지의 효능을 한층 더 높여주며, 필수적인 대사 과정을 지원하고 활발한 세포 증식을 촉진합니다. 세포 배양에 최적화됨 • pH 조절 환경: 중탄산염 완충 시스템과 페놀 레드 지시약을 포함하여, 이 배지는 안정적인 pH 환경을 보장합니다. 5% CO₂ 환경에 최적화되어 있어 정확한 pH 모니터링 및 조정이 가능합니다. • 품질 및 순도: 기본 배지의 각 로트는 무균성, 마이코플라스마 및 세균에 대한 엄격한 검사를 거쳐 배지의 무결성을 보장합니다. pH가 안정적으로 유지되는 이 배지를 통해 일관된 품질과 성능을 신뢰할 수 있습니다. 취급 및 보관 배지의 품질을 유지하려면 +2°C에서 +8°C 사이의 냉장고에서 빛을 피하여 보관하십시오. 효능을 보존하기 위해 동결이나 과열과 같은 극한 온도를 피하십시오. 일부만 사용할 경우, 필요한 양을 실온에서 부드럽게 데워 배지의 성분이 손상되지 않도록 적절한 상태로 만들어 주십시오. 유통 기한 제조일로부터 8주간의 유통기한을 가진 NCI-H295R 세포 배양 배지는 세포 배양 요구 사항을 충족하는 신뢰할 수 있는 선택으로, 연구의 활력과 생산성을 보장합니다.

€150.00

세금 및 배송비 별도

PBS

인산염 완충 식염수(PBS)는 생물학 및 화학 연구 분야에서 널리 사용되는 완충 용액입니다. 이 용액은 조직 처리 및 세포 배양을 비롯한 다양한 실험 과정에서 pH 균형과 삼투압을 유지하는 데 중요한 역할을 합니다. 당사의 PBS 용액은 모든 실험에서 안정성과 신뢰성을 보장하기 위해 고순도 성분으로 정밀하게 조제되었습니다. 당사의 PBS는 삼투압과 이온 농도가 인체와 매우 유사하여, 등장성이며 대부분의 세포에 무독성을 띱니다. 당사 PBS 용액의 조성 당사의 PBS 용액은 pH가 조정된 초순도 등급의 인산염 완충액과 식염수의 혼합물입니다. 1X 작업 농도에서 다음과 같은 성분을 함유하고 있습니다: • 8000 mg/L 염화나트륨(NaCl) • 200 mg/L 염화칼륨(KCl) • 1150 mg/L 무수 인산이수소나트륨 (Na₂HPO₄) • 200 mg/L 무수 일염기 인산칼륨 (KH₂PO₄) 이러한 조성은 최적의 pH 및 이온 균형을 보장하여 광범위한 생물학적 응용 분야에 적합합니다. 당사 PBS 용액의 용도 당사의 PBS 용액은 생물학적 연구의 다양한 용도에 이상적입니다. 등장성 및 무독성 특성 덕분에 물질 희석 및 세포 용기 세척에 적합합니다. EDTA가 함유된 PBS 용액은 부착되거나 뭉친 세포를 분리하는 데 효과적입니다. 그러나 아연과 같은 2가 금속은 침전을 유발할 수 있으므로 PBS에 첨가해서는 안 됩니다. 이러한 경우에는 Good의 완충액을 사용하는 것이 좋습니다. 또한, 당사의 PBS 용액은 SARS-CoV-2를 포함한 RNA 바이러스의 운반 및 보관을 위한 바이러스 운반 배지의 대체재로 사용할 수 있습니다. 품질 관리 • 무균 여과 처리 보관 및 유통 기한 • +2°C ~ +25°C에서 빛을 피하여 보관하십시오. • 개봉 후에는 2°C~25°C에서 보관하고 24개월 이내에 사용하십시오. 배송 조건 • 주변 온도 보관 • +2°C ~ +8°C의 어두운 곳에서 냉장 보관하십시오. 제품의 품질이 저하될 수 있으므로 동결 및 +37°C로의 빈번한 가열을 피하십시오. • 배지를 37°C 이상으로 가열하거나 전자레인지와 같은 제어되지 않은 열원을 사용하지 마십시오. • 배지의 일부만 사용할 경우, 필요한 양을 덜어내어 사용 전 실온으로 데워 주십시오. 성분 분류 성분 농도 (mg/L) 염류 염화칼륨 200 무수 일염기 인산칼륨 200 염화나트륨 8000 무수 이염기 인산나트륨 1150

€20.00

세금 및 배송비 별도

RPMI 1640, w: 2.0 mM 안정화된 글루타민, w: 2.0 g/L NaHCO3

RPMI 1640 배지(RPMI 배지라고도 함)는 다양한 포유류 세포를 배양하기 위해 생물학 연구 분야에서 널리 사용되는 매우 다용도적인 세포 배양 배지입니다. 1966년 저명한 로즈웰 파크 종합 암 센터(Roswell Park Comprehensive Cancer Center)에서 조지 E. 무어(George E. Moore), 로버트 E. 거너(Robert E. Gerner), H. 애디슨 프랭클린(H. Addison Franklin)에 의해 개발된 이 배지는 그 기원이 로즈웰 파크 기념 연구소(Roswell Park Memorial Institute, RPMI)에 있음을 반영하여 이름이 붙여졌습니다. 처음에는 현탁 배양 및 단층 배양 모두에서 인간 백혈병 세포의 성장을 지원하기 위해 설계된 RPMI 1640 배지는 연구자와 상업적 공급업체들의 개량을 거쳐 다양한 포유류 세포에 적합하도록 발전해 왔습니다. 이 배지는 HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, 성상세포 및 암종과 같은 세포주와 탁월한 호환성을 보입니다. RPMI 1640 배지는 독특한 조성으로 인해 다른 세포 배지들과 차별화됩니다. 이 배지에는 상당량의 인산염, 아미노산 및 비타민이 포함되어 있습니다. 특히, 이글 최소 필수 배지(Eagle's Minimal Essential Medium)나 덜베코 수정 이글 배지(Dulbecco's Modified Eagle Medium)에는 없는 비오틴, 비타민 B12 및 PABA를 함유하고 있습니다. 또한, RPMI 1640 배지는 이노시톨과 콜린의 농도가 현저히 높은 특징을 보입니다. 그러나 단백질, 지질, 성장 인자는 포함되어 있지 않습니다. 따라서 세포 성장에 최적의 조건을 제공하기 위해서는 일반적으로 10%의 소 태아 혈청(FBS)을 보충해야 합니다. RPMI 1640 배지의 완충 시스템은 중탄산나트륨에 의존하며, 생리학적으로 적절한 pH를 유지하기 위해 5~10%의 CO₂ 환경이 필요합니다. 환원제인 글루타티온이 포함되어 있다는 점도 이 배지를 다른 배지와 구별하는 특징입니다. 품질 관리 • 무균 여과 보관 및 유통 기한 • +2°C ~ +8°C에서 빛을 피하여 보관하십시오. • 개봉 후에는 4°C에서 보관하고 6~8주 이내에 사용하십시오. 배송 조건 • 주변 온도 보관 • +2°C ~ +8°C의 어두운 곳에서 냉장 보관하십시오. 제품의 품질이 저하될 수 있으므로 동결 및 +37°C로의 빈번한 가열을 피하십시오. • 배지를 37°C 이상으로 가열하거나 전자레인지와 같은 제어되지 않은 열원을 사용하지 마십시오. • 배지의 일부만 사용할 경우, 필요한 양을 덜어내어 사용 전 실온으로 데워 주십시오. 성분 분류 성분 농도 (mg/L) 아미노산 글리신 10.00 L-알라닐-L-글루타민 434.40 L-아르기닌 200.00 L-아스파라긴H2O 56.82 L-아스파르트산 20.00 L-시스틴 2HCl 65.20 L-글루탐산 20.00 L-히스티딘 염산염수화물 20.27 L-하이드록시-L-프롤린 20.00 L-이소류신 50.00 L-류신 50.00 L-라이신 HCl 40.00 L-메티오닌 15.00 L-페닐알라닌 15.00 L-프롤린 20.00 L-세린 30.00 L-트레오닌 20.00 L-트립토판 5.00 L-티로신 2Na2H₂O 28.83 L-발린 20.00 비타민 p-아미노벤조산 1.00 D-비오틴 0.20 콜린 클로라이드 3.00 D-판토텐산 칼슘 0.25 엽산 1.00 미오-이노시톨 35.00 니코틴아미드 1.00 피리독신 염산염 1.00 리보플라빈 0.20 티아민 염산염 1.00 비타민B12 0.005 무기염 Ca(NO₃)₂·4H₂O 100.00 KCl 400.00 MgSO₄·7H₂O 100.00 NaCl 6000.00 NaHCO₃ 2000.00 Na₂HPO₄ 800.00 기타 성분 D-글루코스 2000.00 환원형 L-글루타티온 1.00 페놀 레드 나트륨염 5.30

€25.00

세금 및 배송비 별도

Stable Glutamin (200mM), L-Alanyl-L-Glutamine Solution

Volume: 100 ml Storage: ≤ –15°C Sterility: Sterile-filtered Stable Glutamine Solution (L-Alanyl-L-Glutamine, 200 mM) is a highly stable dipeptide form of L-glutamine designed as a direct replacement for conventional L-glutamine in cell culture media. L-glutamine is an essential amino acid and a major energy source for cultured cells, playing a critical role in cell growth, metabolism, and protein synthesis. Application and Benefits In standard liquid media, L-glutamine degrades relatively quickly at 37°C, leading to the formation of toxic byproducts such as ammonium ions that can negatively affect cell viability and experimental outcomes. Stable glutamine overcomes this limitation by providing a non-degrading dipeptide form that remains intact in culture conditions. Cells enzymatically cleave the dipeptide bond to release L-glutamine as needed, ensuring a continuous fresh supply while preventing the accumulation of harmful waste products. This makes the solution particularly advantageous for long-term cell cultures and high-density growth systems. Formulation and Usage The L-Alanyl-L-Glutamine solution is prepared in cell culture–grade water at a concentration of 200 mM and is sterile-filtered for contamination-sensitive applications. It can be diluted directly into complete media according to experimental requirements. Store at ≤ –15°C and avoid repeated freeze-thaw cycles to maintain product stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

세금 및 배송비 별도

세포 배양 배지: 개요

생명과학 분야에서 가장 중요한 방법론 중 하나는 세포 배양입니다. “세포 배양”이란 동물이나 식물로부터 세포, 조직 또는 장기를 채취한 후, 그 생존 및/또는 성장에 유리한 인공 환경에 이식하는 과정을 의미합니다. 세포가 최적으로 발달하기 위해 필요한 기본적인 환경 요건은 제어된 온도, 세포 부착을 위한 기질, 적절한 배양액, 그리고 최적의 pH와 삼투압을 유지하는 인큐베이터입니다. 세포가 잠재력을 최대한 발휘하며 성장하기 위해서는 이러한 조건이 반드시 갖춰져야 합니다.

체외 배양을 위한 적절한 배지의 선택은 세포 배양 과정에서 가장 중요하면서도 필수적인 단계입니다. 배지(culture media)라고도 하는 성장 배지는 미생물, 세포, 또는 식물 수준의 유기체 발달을 촉진하도록 조제된 액체 또는 젤 형태입니다. 세포 배양에 사용되는 배지에는 대개 충분한 양의 에너지와 세포 주기를 조절하는 물질들이 포함되어 있습니다. 배지의 주요 성분으로는 아미노산, 비타민, 무기염, 포도당, 혈청 등이 있습니다. 혈청은 성장 인자, 호르몬, 부착 인자의 공급원 역할을 하기 때문에 배지에 첨가됩니다. 배지는 영양분을 공급할 뿐만 아니라 pH 및 삼투압 수치의 유지에도 기여합니다.

세포 배양에 사용되는 배지의 종류

인간 및 동물 세포 모두 인공 또는 합성 배지, 혹은 천연 성분이 보충된 완전 천연 배지에서 배양될 수 있습니다. 다음에서는 현재 사용 가능한 다양한 배지 유형에 대해 개괄적으로 설명하겠습니다.

천연 배지

천연 배지에는 자연 상태에 존재하는 생물학적 체액만 포함됩니다. 천연 배지는 매우 유용하며 다양한 동물 세포 유형을 배양하기에 용이합니다. 천연 배지를 구성하는 정확한 성분에 대한 이해 부족은 천연 배지를 사용하여 얻은 결과의 재현성이 낮은 주된 원인입니다.

인공 배지

인공 또는 합성 배지를 조제할 때는 영양소(유기 및 무기), 혈청 단백질, 탄수화물, 보조인자, 비타민, 염류는 물론 산소(O₂)와 이산화탄소(CO₂) 기체도 첨가됩니다 [1].

다음 기능 중 하나 이상을 충족하기 위해 다양한 유형의 인공 배지가 개발되었습니다: 1) 즉각적인 생존(정확한 pH 및 삼투압을 가진 균형 잡힌 염 용액). 2) 장기 생존(다양한 배합의 유기 화합물 및/또는 혈청이 보충된 균형 잡힌 염 용액). 3) 무기한 발달. 4) 특수 기능.

인공 배지는 크게 네 가지로 분류됩니다:

혈청 함유 배지

동물 세포 배양에 사용되는 배지에서 가장 흔히 발견되는 보충제는 소 태아 혈청이다. 이는 최상의 성장 조건을 확보하기 위해 저비용 보충제로 배양 배지에 첨가된다. 혈청은 불안정하거나 물에 녹지 않는 영양소, 호르몬 및 성장 인자, 프로테아제 억제제, 기타 물질의 운반체 또는 킬레이트제로 작용할 뿐만 아니라, 유해 분자를 결합하여 중화시키는 역할도 합니다.

무혈청 배지

배지에 혈청이 포함되면 여러 가지 단점이 있으며, 면역학 연구에서 해석상의 중대한 오류를 유발할 가능성이 있습니다 [2, 3]. 이에 따라 다양한 무혈청 배지가 개발되었습니다 [4, 5]. 이러한 배지는 일반적으로 특정 세포 유형의 배양을 지원하도록 특별히 조제되는데, 예를 들어 Thermo Fisher Scientific의 Knockout Serum Replacement 및 Knockout DMEM, 그리고 Stem Cell Technologies의 mTESR 배지[6]가 줄기세포[7] 배양용으로 사용된다.

또한, 이러한 배지에는 일반적으로 혈청을 통해 공급되는 정제된 성장 인자, 지단백질 및 기타 단백질이 정해진 양만큼 포함되어 있습니다[8]. 이러한 배지를 구성하는 성분들이 명확히 파악되어 있기 때문에, 이 배지들은 흔히 “정의된 배지(defined cultural media)”라고 불립니다.

화학적으로 정의된 배지

이러한 배지에는 어떠한 종류의 오염도 없는 초순도 무기 및 유기 성분이 포함됩니다. 또한 성장 인자와 같은 순수 단백질이 첨가될 수도 있습니다.

 박테리아나 효모의 유전자 변형과 특정 지방산, 비타민, 콜레스테롤, 아미노산의 첨가를 통해 배지의 구성 성분이 생산됩니다 [9].

무단백 배지

무단백 배지는 단백질을 전혀 포함하지 않고 비단백 성분만 포함하는 배지를 말합니다. 혈청이 첨가된 배지와 비교할 때, 단백질이 첨가되지 않은 배지를 사용하면 세포 증식과 단백질 발현이 더욱 촉진되며, 다운스트림 공정에서 생성된 제품을 정제하기가 더 쉬워집니다 [10-12]. MEM 및 RPMI-1640과 같은 배지 조성물에는 단백질이 포함되어 있지 않습니다. 그러나 필요한 경우 단백질 보충제를 투여할 수 있습니다.

배양 배지 및 그 기본 구성 성분

시판되는 배양 배지는 분말 또는 액체 형태로 구입할 수 있으며, 종종 아미노산, 포도당, 염류, 비타민 및 기타 영양 보충제와 같은 다양한 영양소를 포함하고 있습니다. 

이러한 성분에 대한 요구량은 세포주마다 다르며, 이러한 차이로 인해 배지의 조성이 매우 다양하게 존재합니다. 각 성분은 특정 기능을 담당하며, 이에 대해서는 다음 단락에서 설명하겠습니다:

완충 시스템

최적의 배양 조건을 유지하려면 pH를 조절해야 하며, 이는 대개 다음 두 가지 완충 시스템 중 하나를 통해 이루어집니다:

자연 완충 시스템

대기 중의 CO₂/H₂CO₃ 비율은 배지의 비율과 동일하여 자연적인 완충 기전을 형성합니다. 이러한 자연적인 완충 기전을 유지하기 위해서는 배양물을 5~10%의 CO₂가 포함된 공기 환경에서 관리해야 하며, 이는 대개 CO₂ 인큐베이터를 사용하여 달성됩니다. 자연 완충제를 사용할 때의 가장 큰 장점 중 하나는 비용이 저렴하고 안전하다는 점입니다.

HEPES

양쪽성 이온인 HEPES를 이용한 화학적 완충은 pH 7.2~7.4 범위에서 더 뛰어난 완충 능력을 보이며, 조절된 기체 환경이 필요하지 않습니다. 특정 세포 유형의 경우, HEPES를 과도하게 투여하면 해로울 수 있습니다. HEPES가 포함된 배지는 형광등의 광독성 영향에 훨씬 더 취약합니다 [13].

페놀 레드

pH 지시약인 페놀 레드는 시판되는 배양 배지에 종종 포함되어 있어 pH를 지속적으로 모니터링할 수 있게 해줍니다. 세포가 증식함에 따라 세포에서 생성된 대사 산물이 pH 변화를 일으키고, 이에 따라 배지의 색이 변합니다. 페놀 레드는 배지의 색상에 이중적인 영향을 미치며, 산성 pH에서는 노란색으로, 알칼리성 pH에서는 보라색으로 변합니다. 세포 배양에 최적의 값인 pH 7.4에서는 배지가 형광 빨간색으로 보입니다.

그러나 페놀 레드에는 몇 가지 단점이 있다. 첫째, 페놀 레드는 주로 에스트로겐을 비롯한 여러 스테로이드 호르몬의 작용을 모방할 수 있다[14]. 따라서 유방 조직과 같이 에스트로겐에 민감한 세포를 연구할 때는 페놀 레드가 포함되지 않은 배지를 사용하는 것이 권장된다. 여러 무혈청 배지 제형에서 페놀 레드의 존재로 인해 나트륨-칼륨 균형이 깨집니다. 배지에 혈청이나 소 뇌하수체 호르몬을 첨가하면 이러한 효과를 상쇄할 수 있습니다 [15]. 셋째, 유세포 분석 실험에서 페놀 레드의 존재로 인해 검출이 방해받습니다.

무기염

나트륨, 칼륨, 칼슘 이온과 같은 무기염을 함유한 배지는 삼투 평형을 유지하고 막 전위를 조절하는 데 도움을 줍니다.

아미노산

아미노산은 단백질의 기본 구성 요소이므로, 지금까지 고안된 모든 세포 배양 배지의 필수 구성 요소입니다. 세포는 특정 아미노산을 스스로 생성할 수 없기 때문에, 배양 배지에 필수 아미노산이 포함되는 것이 중요합니다. 아미노산은 세포 증식에 필수적이며, 아미노산의 농도에 따라 달성 가능한 최대 세포 밀도가 결정됩니다. 특히 필수 아미노산인 L-글루타민은 매우 중요합니다.

L-글루타민은 대사 과정의 2차 에너지원으로 기능하며, NAD, NADPH 및 뉴클레오티드 생성에 필요한 질소를 공급합니다. L-글루타민은 시간이 지남에 따라 세포가 이용할 수 없는 형태로 변하는 불안정한 아미노산이기 때문에 배지에 반드시 공급해야 합니다.

또한, 성장 과정에서 소모된 아미노산을 보충하기 위해 비필수 아미노산을 배지에 공급할 수 있습니다. 배지에 비필수 아미노산을 보충하면 세포의 성장이 촉진되고 생존율이 높아집니다.

탄수화물

당 형태의 탄수화물은 주요 에너지 공급원입니다. 많은 배지에는 일반적인 포도당과 갈락토스 외에도 말토스와 과당이 포함되어 있습니다.

단백질 및 펩타이드

알부민, 트랜스페린, 피브로넥틴은 가장 흔히 사용되는 단백질 및 펩타이드입니다. 이들은 특히 혈청을 포함하지 않는 배지에서 매우 중요합니다. 알부민, 트랜스페린, 아프로티닌, 페투인, 피브로넥틴 등은 단백질이 풍부한 공급원인 혈청에서 발견될 수 있는 단백질 중 일부입니다.

알부민은 혈액에서 주로 발견되는 단백질로, 물, 염분, 유리 지방산, 호르몬, 비타민 등 다양한 물질을 결합하여 서로 다른 장기 및 세포 간에 운반하는 기능을 합니다. 알부민은 화학 물질에 결합하는 능력이 있어, 세포 배양 배지에서 유해 화합물을 제거하는 데 효과적인 후보 물질입니다.

아프로티닌은 중성 및 산성 pH에서 안정적이며, 고온과 단백질 분해 효소에 의한 파괴에도 저항성이 있어 세포 배양 시스템에서 보호제로 사용됩니다. 이 물질은 트립신을 비롯한 여러 세린 프로테아제를 억제할 수 있습니다.

페투인은 성체 혈청에 비해 태아 및 신생아 동물의 혈청에서 더 높은 농도로 검출될 수 있는 당단백질입니다. 또한, 세린 프로테아제 억제제 역할을 합니다. 단백질인 피브로넥틴은 세포 접착 과정에서 필수적인 구성 요소입니다. 트랜스페린은 철분을 운반하는 단백질로, 세포막에 철분을 전달하는 역할을 담당합니다.

지방산 및 지질

이들은 혈청이 없는 무혈청 배지에서 중요한 역할을 합니다.

비타민

세포의 발달과 증식에 수많은 비타민이 필요합니다. 비타민은 세포 내에서 충분한 양으로 생성될 수 없기 때문에 조직 배양 시 영양 보충제로 필수적입니다.

세포 배양에서 혈청은 비타민의 주요 공급원이지만, 특정 세포 유형에 적합하도록 배지에 다양한 비타민을 첨가하기도 합니다. 가장 일반적으로는 B군 비타민이 성장 촉진을 위해 사용됩니다.

미량 원소

구리, 아연, 셀레늄 및 트리카르복실산 중간체와 같은 화학 원소는 미량 원소로 알려져 있습니다. 미량 원소는 일반적으로 혈청에 존재하는 성분을 대체하기 위해 혈청이 포함되지 않은 배지에 종종 첨가됩니다. 이러한 원소들은 건강한 세포 발달에 필요한 중요한 화학 성분입니다. 많은 생화학적 반응, 예를 들어 효소 활성은 특정 미량 영양소에 의존합니다.

배지 보충제

특정 세포주에 권장되는 완전 배양 배지에는 기본 배지와 혈청에는 없는 추가 성분이 필요합니다. 이러한 영양 보충제는 세포 성장과 적절한 대사 기능을 지원합니다.

호르몬, 성장 인자 및 신호 전달 분자는 특정 세포주의 적절한 증식에 필수적이지만, 항상 다음과 같은 주의 사항을 준수해야 합니다. 보충제를 첨가하면 완전한 배지의 삼투압이 변할 수 있으며, 이는 세포 발달을 저해할 수 있으므로, 보충제 첨가 후 항상 삼투압을 확인하는 것이 좋습니다. 대부분의 세포주에서 최적의 삼투압은 260~320 mOSM/kg 범위입니다.

항생제

항생제는 세포 성장에 필수적인 것은 아니지만, 박테리아 및 곰팡이 오염 물질의 증식을 억제하기 위해 종종 사용됩니다 [16]. 항생제는 마이코플라스마 및 내성 박테리아에 의한 오염을 은폐할 수 있으므로, 세포 배양에 항생제를 일상적으로 사용하는 것은 권장되지 않습니다 [17, 18].

또한, 항생제는 과민성 세포의 대사를 방해할 수 있습니다. MilliporeSigma와 Life Technologies에서 제조한 페니실린-스트렙토마이신 복합제가 흔히 사용됩니다. 플라스모신(Plasmocin)은 신경교종 세포주 TS603, TS516 및 BT260의 배양에 활용되어 왔으며[19], 마이코플라스마 오염을 제거하는 데 효과적인 것으로 밝혀졌습니다(20).

혈청

혈청에는 알부민, 성장 인자 및 성장 억제 인자가 모두 포함되어 있습니다. 혈청은 아미노산, 단백질, 비타민(특히 A, D, E, K와 같은 지용성 비타민), 탄수화물, 지질, 호르몬, 성장 인자, 미네랄 및 미량 원소를 공급하기 때문에 세포 배양 배지의 가장 중요한 구성 요소 중 하나입니다.

배양 세포의 성장을 촉진하기 위해 소 태아 및 송아지 유래 혈청이 자주 사용된다. 태아 혈청은 성장 인자가 풍부하여 세포 복제 및 민감한 세포의 배양에 적합하다. 성장 촉진 능력이 상대적으로 약한 송아지 혈청은 접촉 억제 실험에 활용된다. 일반적인 배양 배지에는 대개 2%에서 10%의 혈청이 포함됩니다. 배양 배지에 혈청을 첨가하는 것은 다음과 같은 목적을 갖습니다 [21]:

  • 혈청은 세포에 필수적인 영양소를 공급합니다(용액 상태 및 단백질에 결합된 형태 모두).

  • 혈청에는 성장 촉진 및 특화된 세포 활동에 관여하는 여러 성장 인자와 호르몬이 포함되어 있습니다.

  • 혈청에는 알부민 및 트랜스페린과 같이 다른 화학 물질을 세포 내로 운반하는 다양한 결합 단백질이 포함되어 있습니다. 예를 들어, 알부민은 지방, 비타민, 호르몬 등을 세포로 전달합니다.

  • 또한 기질에 대한 세포 접착력을 높이는 피브로넥틴과 같은 단백질을 제공합니다. 더불어, 분열 전 세포 확장을 돕는 확산 인자를 생성합니다.

  • 혈청은 세포 내 단백질 분해를 방지하는 프로테아제 억제제를 전달합니다.

  • 또한 Na+, K+, Zn2+, Fe2+와 같은 미네랄도 포함되어 있습니다.

  • 배지의 점도를 높여 현탁 배양 시 교반 과정에서 세포가 기계적 손상을 입지 않도록 보호합니다.

  • 또한 완충제 역할도 합니다.

참고 문헌

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