Medija ir reagentai

40 produktai

Rūšiuoti

Insulin, Human recombinant, Solution (5 mg/ml)

Volume: 5 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin Human Recombinant Solution is a chemically defined supplement commonly used for the cultivation of mammalian cell lines, including Chinese Hamster Ovary (CHO) cells. This cell culture–grade solution contains recombinant human insulin expressed in Saccharomyces cerevisiae, ensuring high purity and consistent performance in research applications. Application and Benefits Insulin is routinely added to serum-free and chemically defined media to promote cell growth and productivity. As a key regulatory hormone, insulin supports cellular uptake, utilization, and storage of glucose, amino acids, and fatty acids. It also inhibits the breakdown of glycogen, proteins, and lipids, thereby contributing to improved cell viability and metabolic stability in culture systems. The chemically defined formulation supports reproducibility and minimizes variability in sensitive cell culture workflows. Biological Properties and Usage Insulin is a two-chain polypeptide hormone naturally produced by the β-cells of the pancreatic islets. It has a molecular weight of approximately 5,800 Da. The α- and β-chains are linked by two interchain disulfide bonds, and the α-chain contains one intrachain disulfide bond. For cell culture applications, the solution should be handled under aseptic conditions and stored at +2°C to +8°C to maintain stability and performance. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€109.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Insulin-Transferrin-Selenium (ITS), Solution 100x

Volume: 10 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) Solution (100x) is a chemically defined supplement designed for a wide range of cell culture applications. It is most commonly used as an additive to basal cell culture media to support cell growth under reduced-serum or serum-free conditions. Application and Benefits Our ITS supplement provides essential components required for the optimal performance of serum-free media. By supplementing conventional nutrient media with ITS, the fetal bovine serum (FBS) requirement for the routine maintenance of many cell lines can be significantly reduced. This helps minimize variability associated with serum use while maintaining consistent cell growth and viability. Insulin supports cellular uptake and metabolism of key nutrients, transferrin facilitates iron transport, and selenium contributes to antioxidant defense and enzymatic activity. Together, these components promote balanced cell metabolism and improved reproducibility in defined culture systems. Formulation and Usage Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) is supplied as a 100x concentrated solution in Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) without phenol red. For standard applications, dilute 1:100 into the appropriate basal medium to achieve the recommended working concentration. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to maintain product stability and sterility. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€59.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Cytion Mammary epithelial growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850185

Pieno liaukų epitelio ląstelių auginimo terpė

„Mammary Epithelial Cell Growth Medium“ – tai serumo neturinti terpė, skirta žmogaus pieno liaukų epitelio ląstelių kultūrai auginti. Šią terpę siūlome kaip 500 ml bazinės terpės – atskirai arba kartu su priedais, kurie gali būti tiek atskiri komponentai, tiek iš anksto sumaišytas „Supplement-Mix“ mišinys. Atskiri komponentai leidžia reguliuoti arba praleisti atskirus veiksnius, o priedų mišinys įdedamas vienu veiksmu. Naudojant šią terpę būtini priedai, o atskiri priedų komponentai taip pat parduodami atskirai.

€280.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

McCoys 5A vidutinė (modifikuota), sudėtis: 3,0 g/l gliukozės, sudėtis: stabilus glutaminas, sudėtis: 2,0 mM natrio piruvato, sudėtis: 2,2 g/l NaHCO₃

„McCoy's 5A Medium“ – tai labai rekomenduojama specializuota terpė, sukurta siekiant palengvinti virusų augimą ir replikaciją pirminėse ląstelių kultūrose. Ji sulaukė didelio pripažinimo dėl išskirtinio veiksmingumo įvairiose biologinių tyrimų srityse. Viena iš svarbiausių „McCoy's 5A Medium“ taikymo sričių – žmogaus storosios žarnos karcinomos ląstelių linijų kultivavimas. Konkrečiai, ji buvo naudojama tirti leucino turtingų pasikartojimų turintį G-baltymų susietą receptorių (LGR5) ir jo vaidmenį storosios žarnos vėžio metastazavime. Ši terpė buvo veiksmingai naudojama kelių storosios žarnos karcinomos ląstelių linijų, įskaitant HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b ir TENN, kultivavimui, leidžiant tyrėjams giliau ištirti storosios žarnos vėžio metastazavimo mechanizmus. Be to, kad „McCoy's 5A“ terpė naudojama vėžio tyrimuose, ji pasirodė esanti nepakeičiama ir osteoblastų tyrimuose. Mokslininkai, tiriantys kalcio trūkumo turinčio hidroksiapatito jonų reaktyvumą standartinėse ląstelių kultūros terpėse, naudojo šią terpę osteoblastų kultivavimui. Šis pritaikymas padėjo geriau suprasti osteoblastų ir kalcio trūkumo turinčio hidroksiapatito sąveiką, prisidėdamas prie pažangos kaulų tyrimų srityje. „McCoy's 5A“ terpė buvo kruopščiai suformuluota modifikuojant „Basal Medium Eagle“ sudėtyje esančius aminorūgštis, siekiant užtikrinti optimalų palaikymą kepenų naviko ląstelėms. Ši praturtinta formulė leidžia ją pritaikyti įvairioms įsitvirtinusioms ląstelių linijoms, taip pat pirminėms ląstelėms, dar labiau padidindama jos universalumą ir pritaikomumą įvairiose mokslinių tyrimų aplinkose. „McCoy's 5A“ terpės biocheminis ir fiziologinis poveikis apima ne tik kepenų naviko ląsteles. Ji sėkmingai naudojama kaulų čiulpų, odos, dantenų, inkstų, omentumo, antinksčių, plaučių, blužnies, žiurkių embrionų ir kitų ląstelių tipų pirminių kultūrų augimui palaikyti. Šis platus taikymo spektras liudija apie „McCoy's 5A Medium“ terpės plačią naudą skatinant įvairių ląstelių tipų augimą ir palaikymą, siekiant atlikti išsamius biologinius tyrimus. Sudėtis Ši „McCoy's 5A“ terpė (modifikuota) sudėtyje turi 3,0 g/l gliukozės, stabilaus glutamino, 2,0 mM natrio piruvato ir 2,2 g/l NaHCO3. Kokybės kontrolė • pH = 7,2 ± 0,02 esant 20–25 °C. • Kiekviena partija buvo ištirta dėl sterilumo ir mikoplazmų bei bakterijų nebuvimo. Laikymas • Laikyti šaldytuve +2–+8 °C temperatūroje tamsioje vietoje. Užšaldymas ir pašildymas iki +37 °C pablogina produkto kokybę. • Terpės negalima kaitinti aukštesnėje nei 37 °C temperatūroje arba naudoti nekontroliuojamų šilumos šaltinių (pvz., mikrobangų krosnelių). • Jei ketinate naudoti tik dalį terpės, išimkite reikiamą kiekį iš butelio ir pašildykite jį kambario temperatūroje. • Visų terpių, išskyrus bazinę terpę, galiojimo laikas yra 6–8 savaitės nuo atidarymo dienos. Sudėtis Komponentai mg/l Neorganinės druskosKalcio chloridas x 2H₂O132,00 Magnio sulfatas97,67 Kalio chloridas400,00 Natrio chloridas6 460,00 Dinatrio vandenilio fosfatas (bevandenis)504,00 Kiti komponentaiD(+)-gliukozė (bevandenė)3 000,00 Glutationas (redukuotas)0,50 Mėsos peptonai600,00 Fenolio raudonojo natrio druska11,00 Amino rūgštysL-alaninas13,36 L-argininas x HCl42,14 L-asparaginas x H₂O45,03 L-asparto rūgštis19,97 L-cisteinas x HCl x H₂O31,75 L-glutaminas (stabilus)219,15 L-glutamo rūgštis22,07 Glicinas7,51 L-histidinas x HCl x H₂O20,96 L-hidroksiprolinas19,67 L-izoleucinas39,36 L-leucinas39,36 L-lizinas x HCl36,54 L-metioninas14,92 L-fenilalaninas16,52 L-prolinas17,27 L-serinas26,28 L-treoninas17,87 L-triptofanas3,06 L-tirozino dinatrio druska26,10 L-valinas17,57 Vitaminaip-aminobenzoinė rūgštis1,00 Askorbo rūgštis0,56 D(+)-biotinas0,20 D-kalcio pantotenatas0,20 Cholino chloridas5,00 Folio rūgštis10,00 mio-inozitolis36,00 Nikotinamidas0,50 Nikotino rūgštis0,50 Piridoksalo HCl0,50 Piridoksino HCl0,50 Riboflavinas0,20 Tiamino HCl0,20 Vitaminas B122,00

€30.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Terpė 199, sudėtis: 2,7 mM stabilaus glutamino, sudėtis: 2,2 g/l NaHCO₃, sudėtis: EBSS

„Medium 199“ – tai universali ir plačiai naudojama ląstelių kultūros terpė, specialiai sukurta pirminių eksplantatų auginimui. Ši visapusiška terpė apima būtinus vitaminus, amino rūgštis ir kitus veiksnius, kad įvairių tipų ląstelėms būtų užtikrintas visiškai apibrėžtas maistinių medžiagų šaltinis. Ji ypač tinka netransformuotoms ląstelėms, todėl yra neįkainojama biologinių tyrimų priemonė. „Medium 199“ turi daugybę pritaikymo galimybių šioje srityje. Ji gali veiksmingai išlaikyti kumulius-oocitų kompleksą (COC) ir palaikyti oocitų brendimą in vitro. Be to, ji naudojama aspiracijos linijų skalavimui, renkant kiaušinėlius iš vokiečių holšteinų karvių. Taip pat terpė „Medium 199“ yra puiki terpė žiurkių širdies endotelio ląstelių kultūrai auginti. Šios taikymo sritys rodo terpės „Medium 199“ universalumą ir pritaikomumą įvairiems eksperimentiniams poreikiams. Istorija „Medium 199“ sukūrimas 1950-aisiais žymėjo reikšmingą pažangą audinių kultūros terpių srityje. Iki jo atsiradimo daugelis kultūros terpių buvo pagamintos iš gyvūninės kilmės produktų ir audinių ekstraktų. Tačiau Morganas ir jo kolegos sukėlė revoliuciją šioje srityje, suformulavę visiškai apibrėžtą maistinių medžiagų šaltinį ląstelių kultūroms. Atlikdami eksperimentus su įvairiais vitaminų, amino rūgščių ir kitų veiksnių deriniais, jie atrado išskirtines „Medium 199“ savybes, skatinančias augimą. Kokybės kontrolė • pH = 7,2 ± 0,02 esant 20–25 °C temperatūrai. • Kiekviena partija buvo ištirta dėl sterilumo ir mikoplazmų bei bakterijų nebuvimo. Laikymas • Laikyti šaldytuve +2–+8 °C temperatūroje, tamsioje vietoje. Užšaldymas ir pašildymas iki +37 °C pablogina produkto kokybę. • Terpės negalima kaitinti aukštesnėje nei 37 °C temperatūroje arba naudoti nekontroliuojamų šilumos šaltinių (pvz., mikrobangų krosnelių). • Jei ketinate naudoti tik dalį terpės, išimkite reikiamą kiekį iš butelio ir pašildykite jį kambario temperatūroje. • Visų terpių, išskyrus bazinę terpę, galiojimo laikas yra 8 savaitės nuo pagaminimo datos. Sudėtis Komponentai mg/l Neorganinės druskos Kalcio chloridas x 2H₂O 264,92 Geležies (III) nitratas x 9H₂O 0,72 Magnio sulfatas 97,67 Kalio chloridas 400,00 Natrio acetatas x 3H₂O 82,95 Natrio chloridas 6 800,00 Natrio dihidrogeno fosfatas x H₂O 140,00 Kiti komponentai Adenino sulfatas 10,00 AMP 0,20 ATP 1,00 Cholesterolis 0,20 2‘-deoksiriboze 0,50 D(+)-gliukozė bevandenė 1,000.00 Glutationas (raudonasis) 0,05 Guaninas x HCl 0,30 Hipoksantinas 0,30 Fenolio raudonasis 10,00 D-ribozė 0,50 Timinas 0,30 Tween 80 4,90 Uracilas 0,30 Ksantinas 0,30 NaHCO₃ 2 200,00 Amino rūgštys L-alaninas 25,00 L-argininas x HCl 70,00 L-asparto rūgštis 30,00 L-cisteinas x HCl x H₂O 0,10 L-cistinas 20,00 Stabilus L-glutaminas 149,00 L-glutamo rūgštis 67,00 Glicinas 50,00 L-histidinas x HCl x H₂O 21,88 L-hidroksiprolinas 10,00 L-izoleucinas 20,00 L-leucinas 60,00 L-lizinas x HCl 70,00 L-metioninas 15,00 L-fenilalaninas 25,00 L-prolinas 40,00 L-serinas 25,00 L-treoninas 30,00 L-triptofanas 10,00 L-tirozinas 40,00 L-valinas 25,00 Vitaminai 4-aminobenzoinė rūgštis 0,05 Askorbo rūgštis 0,05 D(+)-biotinas 0,01 Kalciferolis 0,10 D-kalcio pantotenatas 0,01 Cholino chloridas 0,50 Folio rūgštis 0,01 mio-inozitolis 0,05 Menadionas 0,01 Nikotino rūgštis 0,025 Nikotinamidas 0,025 Piridoksalas x HCl 0,025 Piridoksolis x HCl 0,025 Riboflavinas 0,01 DL-α-tokoferolio fosfato dinatrio druska 0,01 Tiaminas x HCl 0,01 Vitamino A acetatas 0,14

€40.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Cytion Melanocyte growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850155

Melanocitų auginimo terpė

„Melanocyte Growth Medium“ – tai serumo neturinti terpė, skirta žmogaus epidermio melanocitų kultūrai auginti. Ši pilna terpė sudėtyje turi L-glutaminą, galvijų hipofizės ekstraktą (BPE), žmogaus rekombinantinį bFGF, hidrokortizoną, žmogaus rekombinantinį insuliną ir PMA. Siūlome 500 ml bazinės terpės – atskirai arba kartu su priedais, kurie gali būti tiek atskiri komponentai, tiek iš anksto sumaišytas „Supplement-Mix“. Atskiri komponentai leidžia reguliuoti atskirų veiksnių kiekį arba jų visai nenaudoti, o „Supplement-Mix“ pridedamas vienu veiksmu. Naudojimui būtini priedai, o abu priedų variantai taip pat parduodami atskirai.

€270.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Cytion Microvascular endothelial cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850013

Mikrovaskulinių endotelio ląstelių auginimo terpė

Mikrovaskulinių endotelio ląstelių auginimo terpė naudojama žmogaus mikrovaskulinių endotelio ląstelių, pavyzdžiui, iš odos, plaučių ar širdies, kultūrai auginti. Ši pilna terpė sudėtyje turi veršelių embrionų serumą, L-glutaminą, ECGS/H (endotelio ląstelių augimo priedą su heparinu), EGF ir hidrokortizoną. Jei reikalingi konkretūs rekombinantiniai augimo faktoriai, įskaitant VEGF, rinkitės „Advanced Microvascular Endothelial Cell Growth Medium“. Siūlome 500 ml bazinės terpės – atskirai arba kartu su priedais, tiek kaip atskirus komponentus, tiek kaip iš anksto sumaišytą „Supplement-Mix“. Atskiri komponentai leidžia reguliuoti atskirų veiksnių kiekį arba jų visai nenaudoti, o „Supplement-Mix“ pridedamas vienu veiksmu. Bazinė terpė taip pat yra prieinama be fenolio raudonojo tų pačių formų, o tai leidžia išvengti trukdžių atliekant fluorescencinius ir kolorimetrinius matavimus, taip pat fenolio raudonojo silpno estrogeno tipo veikimo. Naudojimui būtini priedai, o abu priedų formatai taip pat parduodami atskirai. Įmaišius priedus, galutinė terpė sudaro 5 % FCS (25 ml į 500 ml bazinės terpės).

€180.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

NCI-H295R ląstelių auginimo terpė

Susipažinkite su pažangia „NCI-H295R“ ląstelių auginimo terpe – profesionaliai paruoštu maistinių medžiagų tirpalu, specialiai sukurtu siekiant skatinti žinduolių ląstelių linijų, įskaitant specializuotas „NCI-H295R“ ląsteles, augimą ir išlaikymą. Ši terpė išsiskiria unikaliu „Dulbecco's Modified Eagle Medium“ (DMEM) ir „Ham's F-12“ (maistinių medžiagų mišinys F-12) deriniu tiksliu 1:1 santykiu, praturtintu būtinais priedais, kad patenkintų sudėtingus ląstelių kultūros poreikius. Patobulinta formulė, užtikrinanti puikius ląstelių kultūros rezultatus • Papildyta bazinė sudėtis: Pagrindinė terpė jau yra turtinga, joje suderintos didelės DMEM amino rūgščių ir vitaminų koncentracijos su įvairiomis „Ham’s F-12“ maistinėmis medžiagomis. Į šį galingą mišinį pridėjome 5 % veršelių serumo (FBS), kuris suteikia gyvybiškai svarbius augimo veiksnius, hormonus ir baltymus. • Pritaikytos priedų sudėtys: Be FBS, ši terpė yra praturtinta svarbiausiais priedais, įskaitant insuliną, transferiną, galvijų serumo albuminą, seleno rūgštį ir linolo rūgštį. Šie priedai tenkina specifinius ląstelių poreikius, skatindami intensyvesnį ląstelių augimą, medžiagų apykaitą ir bendrą sveikatos būklę. • L-glutamino papildas: L-glutamino buvimas dar labiau padidina terpės veiksmingumą, palaikydamas esminius medžiagų apykaitos procesus ir skatindamas intensyvų ląstelių dauginimąsi. Optimizuota ląstelių kultūrai • Aplinka su kontroliuojamu pH: Dėl įtrauktos bikarbonato buferinės sistemos ir fenolio raudonojo indikatoriaus terpė užtikrina stabilią pH aplinką. Ji optimizuota 5 % CO₂ atmosferai, leidžiančiai tiksliai stebėti ir reguliuoti pH. • Kokybė ir grynumas: Kiekviena bazinės terpės partija yra kruopščiai tikrinama dėl sterilumo, mikoplazmų ir bakterijų, taip užtikrinant terpės vientisumą. Naudodami terpę su pastoviu pH, galite pasitikėti jos nuoseklia kokybe ir veikimu. Naudojimas ir laikymas Siekiant išlaikyti terpės kokybę, ją reikia laikyti šaldytuve +2 °C – +8 °C temperatūroje, apsaugotą nuo šviesos. Siekiant išsaugoti jos veiksmingumą, reikia vengti ekstremalių sąlygų, pvz., užšalimo ar perkaitimo. Naudojant dalį terpės, reikiamą kiekį reikia švelniai pašildyti kambario temperatūroje, užtikrinant, kad terpė būtų atšildyta iki tinkamos būklės, nepažeidžiant jos sudedamųjų dalių. Tinkamumo laikas NCI-H295R ląstelių auginimo terpė, kurios galiojimo laikas nuo pagaminimo datos yra 8 savaitės, yra patikimas pasirinkimas jūsų ląstelių kultūrų poreikiams, užtikrinantis jūsų tyrimų gyvybingumą ir produktyvumą.

€150.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Non-essential Amino Acids (100x)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered MEM Non-Essential Amino Acids (100x) is a sterile supplement designed to enhance cell growth and viability in mammalian cell culture systems. The formulation corresponds to a 100x concentrate of the non-essential amino acids found in standard Minimum Essential Medium (MEM), allowing for direct supplementation of basal media with minimal preparation. Application and Benefits This supplement provides an additional amino acid pool for rapidly proliferating cells or for cell lines that have lost the capacity to synthesize non-essential amino acids de novo. By alleviating the metabolic burden of biosynthesis, it supports improved growth kinetics, prolonged viability, and greater experimental consistency—especially in nutrient-sensitive or high-density cultures. Composition and Use The solution includes glycine, L-alanine, L-asparagine, L-aspartic acid, L-glutamic acid, L-proline, and L-serine. It is compatible with MEM and most other standard media. To use, dilute 1:100 into the final culture medium. This product is sterile-filtered and ready to use without additional handling steps. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€30.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Cytion Osteoblast growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850057

Osteoblastų auginimo terpė

Osteoblastų auginimo terpė skirta žmogaus osteoblastų proliferacijai. Bazinė terpė yra be kalcio ir magnio, siekiant apriboti mineralų nusėdimą auginimo metu. Norint paskatinti mineralizaciją, reikia pereiti prie osteoblastų diferenciacijos terpės. Siūlome 500 ml bazinės terpės – atskirai arba kartu su priedais, kurie gali būti tiek atskiri komponentai, tiek iš anksto sumaišytas „Supplement-Mix“. Atskiri komponentai leidžia reguliuoti arba pašalinti atskirus veiksnius, o „Supplement-Mix“ pridedamas vienu veiksmu. Naudojimui būtini priedai, o abu priedų variantai taip pat parduodami atskirai. Pridėjus priedus, galutinė terpė sudaro 10 % FCS (50 ml į 500 ml bazinės terpės).

€300.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

PBS

Fosfato buferinis fiziologinis tirpalas (PBS) yra plačiai naudojamas buferinis tirpalas biologiniuose ir cheminiuose tyrimuose. Jis atlieka lemiamą vaidmenį palaikant pH pusiausvyrą ir osmoliarumą atliekant įvairias eksperimentines procedūras, įskaitant audinių apdorojimą ir ląstelių kultūrą. Mūsų PBS tirpalas yra kruopščiai paruoštas iš aukšto grynumo sudedamųjų dalių, siekiant užtikrinti stabilumą ir patikimumą kiekviename eksperimente. Mūsų PBS osmoliarumas ir jonų koncentracijos labai panašios į žmogaus organizmo, todėl jis yra izotoninis ir netoksiškas daugumai ląstelių. Mūsų PBS tirpalo sudėtis Mūsų PBS tirpalas yra pH reguliuotas ypač gryno laipsnio fosfato buferių ir fiziologinio tirpalo mišinys. Esant 1X darbinės koncentracijos, jame yra: • 8000 mg/l natrio chlorido (NaCl) • 200 mg/l kalio chlorido (KCl) • 1150 mg/l bevandenio dvibazinio natrio fosfato (Na₂HPO₄) • 200 mg/l bevandenio monobazinio kalio fosfato (KH₂PO₄) Ši sudėtis užtikrina optimalų pH ir jonų pusiausvyrą, tinkamą plačiam biologinių taikymų spektrui. Mūsų PBS tirpalo taikymo sritys Mūsų PBS tirpalas idealiai tinka įvairiems biologinių tyrimų taikymams. Dėl izotoninių ir netoksinių savybių jis tinka medžiagų skiedimui ir ląstelių indų skalavimui. EDTA turintys PBS tirpalai veiksmingai atskiria prilipusias ir susikaupusias ląsteles. Tačiau į PBS neturėtų būti dedami dvivalenčiai metalai, pvz., cinkas, nes tai gali sukelti nuosėdų susidarymą. Tokiais atvejais rekomenduojama naudoti „Good’s“ buferius. Be to, mūsų PBS tirpalas yra priimtina alternatyva virusų transportavimo terpei, skirtai RNR virusų, įskaitant SARS-CoV-2, transportavimui ir saugojimui. Kokybės kontrolė • Steriliai filtruotas Laikymas ir galiojimo laikas • Laikyti +2 °C – +25 °C temperatūroje, apsaugotą nuo šviesos. • Atidarius, laikyti 2 °C–25 °C temperatūroje ir sunaudoti per 24 mėnesius. Pristatymo sąlygos • Aplinkos temperatūra Laikymo sąlygos • Laikyti šaldytuve nuo +2 °C iki +8 °C tamsioje vietoje. Venkite užšalimo ir dažno šildymo iki +37 °C, nes tai sumažina produkto kokybę. • Nekaitinkite terpės aukštesnėje nei 37 °C temperatūroje ir nenaudokite nekontroliuojamų šilumos šaltinių, pvz., mikrobangų krosnelių. • Jei ketinate naudoti tik dalį terpės, prieš naudojimą paimkite reikiamą kiekį ir pašildykite jį iki kambario temperatūros. Sudėtis Kategorija Komponentai Koncentracija (mg/l) Druskos Kalio chloridas 200 Bevandenis monobazinis kalio fosfatas 200 Natrio chloridas 8000 Bevandenis dvibazinis natrio fosfatas 1150

€20.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

RPMI 1640, su: 2,0 mM stabilaus glutamino, su: 2,0 g/l NaHCO₃

RPMI 1640 terpė, taip pat žinoma kaip RPMI terpė, yra labai universali ląstelių kultūros terpė, plačiai naudojama biologiniuose tyrimuose įvairių žinduolių ląstelių auginimui. Šią terpę 1966 m. garsiajame Roswell Park Comprehensive Cancer Center sukūrė George E. Moore, Robert E. Gerner ir H. Addison Franklin; jos pavadinimas kilęs iš Roswell Park Memorial Institute (RPMI), kur ji buvo sukurta. Iš pradžių sukurta žmogaus leukeminių ląstelių augimui palaikyti tiek suspensijos, tiek monosluoksnėse kultūrose, RPMI 1640 terpė, mokslininkų ir komercinių tiekėjų modifikuota, tapo tinkama įvairioms žinduolių ląstelėms. Ji ypač suderinama su tokiomis ląstelių linijomis kaip „HeLa“, „Jurkat“, „MCF-7“, „PC12“, „PBMC“, astrocitais ir karcinomomis. RPMI 1640 terpė išsiskiria iš kitų ląstelių kultūros terpių dėl savo unikalios sudėties. Joje yra didelis kiekis fosfatų, amino rūgščių ir vitaminų. Pažymėtina, kad joje yra biotino, vitamino B12 ir PABA, kurių nėra „Eagle's Minimal Essential Medium“ ar „Dulbecco's Modified Eagle Medium“ terpėse. Be to, RPMI 1640 terpėje yra žymiai didesnės inozitolio ir cholino koncentracijos. Tačiau joje nėra baltymų, lipidų ar augimo veiksnių. Todėl, siekiant užtikrinti optimalias ląstelių augimo sąlygas, paprastai reikia papildyti 10 % veršelių serumo (FBS). RPMI 1640 terpės buferinė sistema pagrįsta natrio bikarbonatu, o fiziologiškai tinkamam pH palaikyti būtina 5–10 % CO₂ aplinka. Šią terpę nuo kitų dar labiau išskiria redukcinio agento glutationo įtraukimas. Kokybės kontrolė • Steriliškai filtruota Laikymas ir galiojimo laikas • Laikyti +2–+8 °C temperatūroje, apsaugotą nuo šviesos. • Atidarius, laikyti 4 °C temperatūroje ir sunaudoti per 6–8 savaites. Pristatymo sąlygos • Aplinkos temperatūra Laikymo sąlygos • Laikyti šaldytuve nuo +2 °C iki +8 °C tamsioje vietoje. Venkite užšalimo ir dažno šildymo iki +37 °C, nes tai sumažina produkto kokybę. • Nešildykite terpės aukštesnėje nei 37 °C temperatūroje ir nenaudokite nekontroliuojamų šilumos šaltinių, pvz., mikrobangų krosnelių. • Jei ketinate naudoti tik dalį terpės, prieš naudojimą paimkite reikiamą kiekį ir pašildykite jį iki kambario temperatūros. Sudėtis Kategorija Komponentai Koncentracija (mg/l) Amino rūgštys Glicinas 10,00 L-alanil-L-glutaminas 434,40 L-argininas 200,00 L-asparaginasH2O 56,82 L-asparto rūgštis 20,00 L-cistinas 2HCl 65,20 L-glutamo rūgštis 20,00 L-histidinas HClH₂O 20,27 L-hidroksi-L-prolinas 20,00 L-izoleucinas 50,00 L-leucinas 50,00 L-lizinas HCl 40,00 L-metioninas 15,00 L-fenilalaninas 15,00 L-prolinas 20,00 L-serinas 30,00 L-treoninas 20,00 L-triptofanas 5,00 L-tirozinas 2Na2H2O 28,83 L-valinas 20,00 Vitaminai p-aminobenzoinė rūgštis 1,00 D-biotinas 0,20 Cholino chloridas 3,00 D-kalcio pantotenatas 0,25 Folio rūgštis 1,00 mio-inozitolis 35,00 Nikotinamidas 1,00 Piridoksino HCl 1,00 Riboflavinas 0,20 Tiamino HCl 1,00 VitaminasB12 0,005 Neorganinės druskos Ca(NO₃)₂4H₂O 100,00 KCl 400,00 MgSO₄7H₂O 100,00 NaCl 6000,00 NaHCO₃ 2000,00 Na₂HPO₄ 800,00 Kiti komponentai D-gliukozė 2000,00 Redukuotas L-glutationas 1,00 Fenolio raudonojo natrio druska 5,30

€25.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Cytion Skeletal muscle cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850082

Skeletinių raumenų ląstelių auginimo terpė

Skeletinių raumenų ląstelių auginimo terpė užtikrina žmogaus skeletinių raumenų mioblastų proliferaciją ir neleidžia įvykti priešlaikinei susijungimui, todėl ląsteles galima dauginti prieš diferenciaciją. Ši pilna terpė sudėtyje turi veršelių embrionų serumą, L-glutaminą, fetuiną, EGF, bFGF, žmogaus rekombinantinį insuliną ir deksametazoną. Norint paskatinti susijungimą į miotubus, reikia pereiti prie skeleto raumenų ląstelių diferenciacijos terpės. Terpę siūlome kaip 500 ml bazinę terpę – atskirai arba kartu su priedais, kurie gali būti tiek atskiri komponentai, tiek iš anksto sumaišytas priedų mišinys („Supplement-Mix“). Atskiri komponentai leidžia reguliuoti arba pašalinti atskirus veiksnius, o priedų mišinys įdedamas vienu veiksmu. Priedai yra būtini naudojimui, ir abu priedų formatai taip pat yra prieinami atskirai. Įmaišius priedus, pilna terpė sudaro 5 % FCS (25 ml į 500 ml bazinės terpės).

€210.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Cytion Smooth muscle cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850075

Lygiajam raumenų ląstelių augimo terpė

Lygiajam raumenų ląstelių auginimo terpė skirta žmogaus lygiųjų raumenų ląstelių, paimtų iš kraujagyslių ir ne kraujagyslių audinių, pavyzdžiui, aortos, vainikinių ir plaučių arterijų, bronchų, trachėjos ir šlapimo pūslės, kultūrai auginti. Ši pilna terpė sudėtyje turi veršelių embrionų serumą, L-glutaminą, EGF, bFGF ir žmogaus rekombinantinį insuliną. Siūlome šią terpę kaip 500 ml bazinę terpę – atskirai arba kartu su priedais, tiek kaip atskirus komponentus, tiek kaip iš anksto sumaišytą „Supplement-Mix“ mišinį. Atskiri komponentai leidžia reguliuoti arba pašalinti atskirus veiksnius, o „Supplement-Mix“ mišinys įdedamas vienu veiksmu. Bazinė terpė taip pat yra prieinama be fenolio raudonojo tų pačių formų, o tai leidžia išvengti trukdžių atliekant fluorescencinius ir kolorimetrinius matavimus, taip pat fenolio raudonojo silpno estrogeno tipo veikimo. Naudojimui reikalingi priedai, o abu priedų formatai taip pat yra prieinami atskirai. Pridėjus priedus, galutinė terpė sudaro 5 % FCS (25 ml į 500 ml bazinės terpės).

€240.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Sodium Pyruvate Solution (100 mM)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Sodium Pyruvate Solution (100 mM) is a sterile, ready-to-use supplement designed to provide an additional, easily accessible energy source for cell culture media. Sodium pyruvate plays a key role in cellular energy metabolism and supports the growth of metabolically active and rapidly proliferating cells, such as tumor cells. Supplementation can enhance cell viability and help maintain metabolic stability in culture systems. Application and Benefits This solution is widely used in routine cell culture to enrich media with pyruvate and promote optimal growth conditions. It supports ATP production, may help reduce oxidative stress, and contributes to improved metabolic performance of cultured cells. Manufactured in cell culture–grade water and sterile-filtered, the product ensures consistent quality and reproducibility in research workflows. Usage and Compatibility The recommended final concentration for most cell culture applications is 1 mM sodium pyruvate, achieved by diluting the 100 mM stock solution 1:100 into complete culture medium. The solution is compatible with a wide range of basal media and mammalian cell lines. Store at +2°C to +8°C and protect from contamination to maintain product stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€18.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Stable Glutamin (200mM), L-Alanyl-L-Glutamine Solution

Volume: 100 ml Storage: ≤ –15°C Sterility: Sterile-filtered Stable Glutamine Solution (L-Alanyl-L-Glutamine, 200 mM) is a highly stable dipeptide form of L-glutamine designed as a direct replacement for conventional L-glutamine in cell culture media. L-glutamine is an essential amino acid and a major energy source for cultured cells, playing a critical role in cell growth, metabolism, and protein synthesis. Application and Benefits In standard liquid media, L-glutamine degrades relatively quickly at 37°C, leading to the formation of toxic byproducts such as ammonium ions that can negatively affect cell viability and experimental outcomes. Stable glutamine overcomes this limitation by providing a non-degrading dipeptide form that remains intact in culture conditions. Cells enzymatically cleave the dipeptide bond to release L-glutamine as needed, ensuring a continuous fresh supply while preventing the accumulation of harmful waste products. This makes the solution particularly advantageous for long-term cell cultures and high-density growth systems. Formulation and Usage The L-Alanyl-L-Glutamine solution is prepared in cell culture–grade water at a concentration of 200 mM and is sterile-filtered for contamination-sensitive applications. It can be diluted directly into complete media according to experimental requirements. Store at ≤ –15°C and avoid repeated freeze-thaw cycles to maintain product stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Ląstelių kultūros terpės: apžvalga

Gamtos mokslų srityje viena iš svarbiausių metodikų yra ląstelių kultūra. Terminas „ląstelių kultūra“ reiškia ląstelių, audinių ar organų paėmimą iš gyvūno ar augalo ir vėlesnį tų ląstelių, audinių ar organų implantavimą į dirbtinę aplinką, palankią jų išlikimui ir (arba) augimui. Pagrindiniai aplinkos reikalavimai, būtini optimaliam ląstelių vystymuisi, yra kontroliuojama temperatūra, substratas, prie kurio ląstelės gali prisitvirtinti, tinkama auginimo terpė ir inkubatorius, palaikantis optimalų pH ir osmolalumą. Kad ląstelės galėtų išaugti iki savo pilno potencialo, joms būtinos šios sąlygos.

Tinkamos auginimo terpės parinkimas in vitro kultivavimui yra ląstelių kultūros etapas, kuris yra ir svarbiausias, ir gyvybiškai būtinas. Augimo terpė, dar vadinama kultūrinė terpe, yra skystis arba gelis, sukurtas skatinti organizmų vystymąsi mikroskopiniu, ląstelių arba augalų lygiu. Ląstelių auginimui naudojama terpė dažnai turi pakankamą energijos kiekį ir medžiagų, reguliuojančių ląstelių ciklą. Pagrindiniai kultūrinės terpės komponentai yra amino rūgštys, vitaminai, neorganinės druskos, gliukozė ir serumas. Serumas į terpią įdedamas, nes jis veikia kaip augimo veiksnių, hormonų ir prisijungimo veiksnių šaltinis. Be maistinių medžiagų tiekimo, terpė taip pat padeda palaikyti pH ir osmolalumo lygį.

Ląstelių kultūroje naudojamų terpių rūšys

Tiek žmogaus, tiek gyvūnų ląstelės gali būti auginamos dirbtinėje arba sintetinėje terpėje, taip pat visiškai natūralioje terpėje, papildytoje natūraliais elementais. Toliau pateiksime apžvalgą apie įvairius šiuo metu prieinamus terpių tipus.

Natūralios terpės

Natūraliose terpėse gali būti tik natūralioje būsenoje esantys biologiniai skysčiai. Natūralios terpės yra labai naudingos ir patogios įvairių gyvūnų ląstelių tipų auginimui. Nepakankamas supratimas apie tikslius natūralių terpių komponentus yra pagrindinis veiksnys, lemiantis mažą rezultatų, gautų naudojant natūralias terpes, pakartojamumą.

Dirbtinės terpės

Dirbtinių arba sintetinių terpių paruošimas apima maistinių medžiagų (tiek organinių, tiek neorganinių), serumo baltymų, angliavandenių, kofaktorių, vitaminų ir druskų, taip pat O₂ ir CO₂ dujų fazių pridėjimą [1].

Siekiant užtikrinti vieną ar kelias iš šių funkcijų, buvo sukurti įvairių tipų dirbtiniai terpe: 1) Greitas išgyvenimas (subalansuotas druskų tirpalas su tiksliu pH ir osmosiniu slėgiu). 2) Ilgalaikis išgyvenimas (subalansuotas druskų tirpalas, papildytas įvairiais organinių cheminių medžiagų ir (arba) serumo mišiniais). 3) Neribotas vystymasis. 4) Specializuotos funkcijos.

Dirbtinės terpės skirstomos į keturias atskiras klases:

Terpės, kurių sudėtyje yra serumo

Dažniausiai gyvūnų ląstelių auginimui naudojamose terpėse randamas priedas yra veršelių serumas. Jis į kultūrinę terpę dedamas kaip nebrangus priedas, siekiant užtikrinti kuo geresnes augimo sąlygas. Be to, kad serumas veikia kaip nestabilių ar vandenyje netirpių maistinių medžiagų, hormonų ir augimo veiksnių, proteazės inhibitorių bei kitų medžiagų pernešėjas ar chelatorius, jis taip pat suriša ir neutralizuoja kenksmingas molekules.

Serumo neturinti terpė

Serumo buvimas terpėje turi nemažai trūkumų ir gali sukelti rimtų interpretavimo klaidų imunologiniuose tyrimuose [2, 3]. Buvo sukurta įvairių be serumo terpių [4, 5]. Paprastai šios terpės yra specialiai suformuluotos tam, kad palaikytų vieno ląstelių tipo kultūrą, pavyzdžiui, „Knockout Serum Replacement“ ir „Knockout DMEM“ iš „Thermo Fisher Scientific“ bei „mTESR“ terpė iš „Stem Cell Technologies“ [6], skirta kamieninėms ląstelėms [7].

Be to, į šias terpes įtraukiami nustatyti kiekiai išgrynintų augimo veiksnių, lipoproteinų ir kitų baltymų, kuriuos paprastai teikia serumas [8]. Šios terpes dažnai vadinamos „apibrėžtomis kultūrinėmis terpėmis“, nes jų sudedamosios dalys yra gerai žinomos.

Chemiškai apibrėžtos terpės

Šios terpės sudėtyje yra ypač grynų neorganinių ir organinių komponentų, kurie nėra užteršti jokiais teršalais. Jos taip pat gali būti papildytos grynais baltymais, pavyzdžiui, augimo faktoriais.

Genetiškai modifikavus bakterijas ar mieles ir pridedant tam tikrų riebalų rūgščių, vitaminų, cholesterolio bei amino rūgščių, gaunami jų sudedamieji komponentai [9].

Baltyminių medžiagų neturinčios terpės

Baltyminių medžiagų neturinčios terpės yra tokios, kuriose visiškai nėra baltymų, o yra tik nebaltyminiai elementai. Palyginti su terpėmis, į kurias pridėta serumo, baltyminių medžiagų neturinčių terpių naudojimas skatina didesnį ląstelių dauginimąsi ir baltymų ekspresiją bei palengvina bet kurio tolesniame procese susidariusio produkto gryninimą [10–12]. Baltymai neįeina į tokias formules kaip MEM ir RPMI-1640. Tačiau prireikus gali būti įdedamas baltymų papildas.

Kultūrinės terpės ir jų pagrindiniai komponentai

Komercinę kultūrinę terpę galima įsigyti miltelių arba skysčio pavidalu; dažnai joje yra įvairių maistinių medžiagų, pavyzdžiui, amino rūgščių, gliukozės, druskų, vitaminų ir kitų maisto papildų.

Kiekvienai ląstelių linijai šių komponentų poreikis skiriasi, o būtent šie skirtumai lemia didelę terpės sudėčių įvairovę. Kiekvienas komponentas atlieka tam tikrą funkciją, kuri bus aprašyta tolesniuose skyriuose:

Buferinės sistemos

Siekiant išlaikyti optimalias auginimo sąlygas, būtina kontroliuoti pH, o tai dažniausiai daroma naudojant vieną iš dviejų buferinių sistemų:

Natūrali buferinė sistema

CO₂/H₂CO₃ santykis atmosferoje yra toks pat kaip ir terpėje, todėl susidaro natūralus buferinis mechanizmas. Siekiant išsaugoti šį natūralų buferinį mechanizmą, kultūros turi būti laikomos aplinkoje, kurioje CO₂ koncentracija sudaro 5–10 %; tai dažniausiai pasiekiama naudojant CO₂ inkubatorių. Vienas iš didžiausių natūralaus buferio privalumų – jo pigumas ir saugumas.

HEPES

Cheminis buferavimas naudojant zwitterjoną HEPES pasižymi didesniu buferavimo pajėgumu pH intervale 7,2–7,4 ir nereikalauja reguliuojamos dujinės aplinkos. Tam tikrų tipų ląstelėms didesnė HEPES dozė gali būti žalinga. Terpės, kurių sudėtyje yra HEPES, taip pat yra daug jautresnės fluorescencinės šviesos fototoksiniam poveikiui [13].

Fenolio raudonasis

pH indikatorius fenolio raudonasis dažnai įtraukiamas į komerciškai parduodamas kultūrinės terpės, leidžiant nuolat stebėti pH. Ląstelėms dauginantis, jų gaminami metabolitai sukelia pH pokytį ir dėl to pasikeičia terpės spalva. Fenolio raudonasis turi dvejopą poveikį terpės spalvai: rūgščiame pH ji tampa geltona, o šarminiame pH – violetinė. Esant pH 7,4 – optimaliam ląstelių kultūrai – terpė tampa fluorescuojančiai raudona.

Tačiau fenolio raudonasis turi keletą trūkumų: pirma, fenolio raudonasis gali imituoti daugelio steroidinių hormonų, visų pirma estrogeno, veikimą [14]. Todėl tiriant estrogenui jautrias ląsteles, pavyzdžiui, krūties audinį, rekomenduojama naudoti terpę be fenolio raudonojo. Natrio ir kalio pusiausvyra sutrinka dėl fenolio raudonojo buvimo kai kuriose be serumo sudėtyse. Šio poveikio galima išvengti į terpę įdedant serumo arba galvijų hipofizės hormono [15]. Trečia, fenolio raudonojo buvimas trukdo aptikti ląsteles atliekant srauto citometrijos eksperimentus.

Neorganinės druskos

Terpės, kurių sudėtyje yra neorganinių druskų, pvz., natrio, kalio ir kalcio jonų, padeda išlaikyti osmosinę pusiausvyrą ir reguliuoja membranos potencialą.

Amino rūgštys

Kadangi aminorūgštys yra pagrindiniai baltymų komponentai, jos yra būtina kiekvienos kada nors sukurto ląstelių auginimo terpės sudėtinė dalis. Kadangi ląstelės pačios negali pagaminti tam tikrų aminorūgščių, svarbu, kad kultūrinėje terpėje būtų būtinųjų aminorūgščių. Jos yra būtinos ląstelių proliferacijai, o jų koncentracija lemia didžiausią pasiekiamą ląstelių tankį. Ypač svarbi yra būtinoji amino rūgštis – L-glutaminas.

L-glutaminas veikia kaip antrinis energijos šaltinis medžiagų apykaitai ir tiekia azotą NAD, NADPH bei nukleotidų sintezei. Kadangi L-glutaminas yra nestabili amino rūgštis, kuri laikui bėgant virsta forma, kurios ląstelės negali panaudoti, ją būtina papildomai įtraukti į terpę.

Be to, į auginimo terpę galima įtraukti nepagrindinių amino rūgščių, siekiant papildyti tas, kurios buvo sunaudotos augimo proceso metu. Ląstelių augimas paspartėja, o jų gyvybingumas padidėja, kai auginimo terpė papildoma nepagrindinėmis amino rūgštimis.

Angliavandeniai

Angliavandeniai cukrų pavidalu yra pagrindinis energijos šaltinis. Daugelyje terpių, be labiau paplitusių gliukozės ir galaktozės, taip pat yra maltozės ir fruktozės.

Baltymai ir peptidai

Albuminas, transferinas ir fibronektinas yra dažniausiai naudojami baltymai ir peptidai. Jie ypač svarbūs terpėse, kurių sudėtyje nėra serumo. Albuminas, transferinas, aprotininas, fetuinas ir fibronektinas yra tik keletas baltymų, kurių galima rasti serume – turtingame baltymų šaltinyje.

Albuminas yra pagrindinis kraujyje randamas baltymas, kurio funkcija – jungti ir transportuoti įvairias medžiagas, įskaitant vandenį, druskas, laisvąsias riebalų rūgštis, hormonus ir vitaminus, tarp skirtingų organų ir ląstelių. Albumino gebėjimas jungtis prie cheminių medžiagų daro jį veiksmingu kandidatu pašalinti kenksmingus junginius iš terpės, kurioje auginamos ląstelės.

Aprotininas yra apsauginė medžiaga ląstelių kultūrų sistemose, nes jis yra stabilus esant neutraliam ir rūgštiniam pH, taip pat atsparus aukštai temperatūrai ir proteolitinių fermentų sukeliamam irimui. Jis gali slopinti daugelį serino proteazių, tarp jų – tripsiną.

Fetuinas yra glikoproteinas, kurio kiekis gyvūnų vaisiaus ir naujagimio serume gali būti didesnis nei suaugusiųjų serume. Be to, jis veikia kaip serino proteazės inhibitorius. Baltymas fibronektinas yra esminis komponentas ląstelių adhezijos procese. Transferinas yra baltymas, kuris transportuoja geležį ir yra atsakingas už jos pristatymą į ląstelių membranas.

Riebalų rūgštys ir lipidai

Jos atlieka lemiamą vaidmenį beserumėje terpėje, kai nėra serumo.

Vitaminai

Ląstelių vystymuisi ir dauginimuisi reikalingi įvairūs vitaminai. Ląstelės negali pačios pagaminti pakankamo vitaminų kiekio, todėl audinių kultūroje jie yra būtini kaip maisto papildai.

Ląstelių kultūroje serumas yra pagrindinis vitaminų šaltinis; tačiau terpės taip pat praturtinamos įvairiais vitaminais, kad tiktų konkrečiam ląstelių tipui. Dažniausiai augimui skatinti naudojami B grupės vitaminai.

Mikroelementai

Cheminiai elementai, tokie kaip varis, cinkas, selenas ir trikarboksirūgšties tarpinių junginių, vadinami mikroelementais. Mikroelementai dažnai pridedami į terpes, kurių sudėtyje nėra serumo, siekiant pakeisti tuos, kurie paprastai yra serume. Šie elementai yra svarbūs cheminiai komponentai, reikalingi sveikam ląstelių vystymuisi. Daugelis biocheminių reakcijų, pavyzdžiui, fermentų aktyvumas, priklauso nuo tam tikrų mikroelementų.

Terpės priedai

Tam tikroms ląstelių linijoms rekomenduojamoms pilnoms auginimo terpėms reikalingi papildomi komponentai, kurių nėra bazinėse terpėse ir serume. Šie maisto papildai palaiko ląstelių augimą ir tinkamą medžiagų apykaitą.

Nors hormonai, augimo faktoriai ir signalinės molekulės yra būtini tam tikrų ląstelių linijų tinkamai proliferacijai, visada reikėtų laikytis šių atsargumo priemonių: kadangi priedų įdėjimas gali pakeisti visos auginimo terpės osmolalumą, o tai gali slopinti ląstelių vystymąsi, visada patartina patikrinti osmolalumą po priedų įdėjimo. Daugumai ląstelių linijų optimalus osmolalumas svyruoja nuo 260 iki 320 mOSM/kg.

Antibiotikai

Antibiotikai dažnai naudojami bakterinių ir grybelinių teršalų plitimui slopinti [16], nors jie nėra būtini ląstelių augimui. Kadangi antibiotikai gali paslėpti mikoplazmų ir atsparių bakterijų sukeltą užteršimą, jų reguliarus naudojimas ląstelių kultūrose nerekomenduojamas [17, 18].

Be to, antibiotikai gali sutrikdyti jautrių ląstelių medžiagų apykaitą. Dažnai naudojami „MilliporeSigma“ ir „Life Technologies“ gaminami penicilino ir streptomicino deriniai. „Plasmocin“ buvo naudojamas gliomos ląstelių linijų TS603, TS516 ir BT260 kultūrose [19], ir buvo įrodyta, kad jis veiksmingai pašalina mikoplazmų užteršimą (20).

Serumas

Serume yra albuminų, augimo veiksnių ir augimo inhibitorių. Serumas yra viena iš svarbiausių ląstelių kultūros terpės sudedamųjų dalių, nes jis aprūpina amino rūgštimis, baltymais, vitaminais (ypač riebaluose tirpiais vitaminais, tokiais kaip A, D, E ir K), angliavandeniais, lipidais, hormonais, augimo veiksniais, mineralais ir mikroelementais.

Kultivuojamų ląstelių vystymuisi skatinti dažnai naudojamas veršelių ir galvijų vaisiaus serumas. Vaisiaus serumas yra gausus augimo veiksnių šaltinis ir tinka ląstelių klonavimui bei jautrių ląstelių vystymuisi. Dėl sumažėjusių augimą skatinančių savybių veršelių serumas naudojamas kontaktinio slopinimo eksperimentuose. Įprastose auginimo terpėse dažnai yra nuo 2 % iki 10 % serumo. Serumo įmaišymas į kultūrinę terpę atlieka šias funkcijas [21]:

Serumas tiekia ląstelėms būtinas maistines medžiagas (tiek tirpale, tiek prisijungusias prie baltymų).
Serume yra keletas augimo veiksnių ir hormonų, dalyvaujančių augimo skatinime ir specializuotoje ląstelių veikloje.
Jame yra daug rišamųjų baltymų, pavyzdžiui, albumino ir transferino, kurie perneša kitas chemines medžiagas į ląstelę. Pavyzdžiui, albuminas į ląsteles perneša riebalus, vitaminus, hormonus ir pan.
Jis taip pat suteikia baltymų, pavyzdžiui, fibronektino, kurie padidina ląstelių adheziją prie substrato. Be to, jis gamina plitimo elementus, kurie padeda ląstelėms išsiplėsti prieš dalijimąsi.
Jis tiekia proteazės inhibitorius, kurie užkerta kelią proteolizei ląstelėse.
Jame taip pat yra mineralų, pvz., Na+, K+, Zn2+ ir Fe2+.
Jis padidina terpės klampumą, taip apsaugodamas ląsteles nuo mechaninių pažeidimų maišant suspensijos kultūrą.
Be to, jis veikia kaip buferis.

Nuorodos

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Gyvūnų ląstelių mityba audinių kultūroje; pradiniai tyrimai su sintetinėmis terpėmis. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Greita veršelių vaisiaus serumo komponento adsorbcija kultūroje auginamose žinduolių ląstelėse. Galimas artefaktų šaltinis atliekant tyrimus su antiserumais, nukreiptais prieš ląstelių specifinius antigenus. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. Serumo įmaišymas į terpę, naudojamą ląstelių suspensijoms paruošti, kaip galimas artefaktų šaltinis ląstelių tarpininkaujamose reakcijose, tiriamose naudojant poplitealinio limfmazgio testą. J Immunogenet. 1980;7:483–9

[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Komercinės serumo neturinčios terpės: hibridomų auginimas ir monokloninių antikūnų gamyba. J Immunol Methods. 1991;145:175–83

[5] Barnes D, Sato G. Kultivuojamų ląstelių auginimo be serumo terpėje metodai. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O ir kt. HSP70 chaperonai perkelia RNR neturintį TDP-43 į anizotropinius intranuklearinius skystus sferinius apvalkalus. „Science“. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J ir kt. Dauno sindromo sukeltas senėjimas sutrikdo nervinių progenitorinių ląstelių branduolio struktūrą. „Cell Stem Cell“. 2022;29:116–130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Visiškas serumo pakeitimas albuminu, transferinu ir sojos riebalais lipopolisacharidams reaguojančių B limfocitų kultūrose. „J Exp Med“. 1978;147:923–33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Chemiškai apibrėžtos baltymų neturinčios terpės, skirtos hibridomų auginimui ir monokloninių antikūnų gamybai, sistemingas tobulinimas. „J Biotechnol“. 1996;45:111–23

[10] Darfler F. Baltymių neturinti terpė hibridomų ir kitų imuninės sistemos ląstelių auginimui. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769–78

[11] Barnes D, Sato G. Serumo neturinti ląstelių kultūra: vieningas požiūris. „Cell“. 1980;22:649–55

[12] Hamilton W, Ham R. Kinų žiurkių ląstelių linijų kloninis augimas baltymų neturinčiose terpėse. In Vitro. 1977;13:537–47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Šviesai veikiamos HEPES turinčios kultūros terpės citotoksinio poveikio analizė. „In Vitro Cell Dev Biol“. 1985;21:282–7

[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. Fenolio raudonasis audinių kultūros terpėse yra silpnas estrogenas: pasekmės, susijusios su estrogenui jautrių ląstelių tyrimais kultūroje. „Proc Natl Acad Sci U S A“. 1986;83:2496–500

[15] Karmiol S. Serumo neturinčių terpių kūrimas. Į: Master JRW, red. „Animal Cell culture“, 3-iasis leidimas. Oksfordas: Oxford University Press; 2000.

[16] Perlman D. Antibiotikų naudojimas ląstelių kultūros terpėse. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. Ląstelių kultūrų mikoplazminės infekcijos plitimas ir kontrolė. In Vitro. 1976;12:643–8

[18] Masters J, Stacey G. Terpės keitimas ir ląstelių linijų perauginimas. „Nat Protoc“. 2007;2:2276–84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M ir kt. Histonų demetilazė KDM6A tiesiogiai reaguoja į deguonį, reguliuodama chromatino būklę ir ląstelių likimą. „Science“. 2019;363:1217–1222

[20] Molla Kazemiha V, Azari S, Amanzadeh A, Bonakdar S, Shojaei Moghadam M, Habibi Anbouhi M ir kt. „Plasmocin™“ veiksmingumas įvairiose molikutų užkrėstose žinduolių ląstelių linijose, palyginti su ląstelių kultūrose dažniausiai naudojamais antibiotikais: vietinė patirtis. „Cytotechnology“. 2011;63:609–20

[21] Kragh Hansen U. Ligando prisijungimo prie serumo albumino molekuliniai aspektai. „Pharmacol Rev.“ 1981;33:17–53